茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯的分离纯化研究

论文摘要

EGCG是茶多酚中的重要组成成分,现已广泛的应用于医药保健、食品添加剂等领域。由于目前生产上EGCG的需求量越来越大,所以对EGCG产品的提取纯化工艺要求也越来越严格。目前在EGCG提取纯化过程中,仍存在着很多的问题,尤其是EGCG与ECG两种强水溶性物质的分离,仍是一个难以解决的问题。在EGCG提取纯化过程中,各种不同影响因素的变化,可能都会对高纯度EGCG的提取纯化产生重大的影响。本文以新鲜的老龄茶叶为原料,采用匀浆萃取及负压空化混旋固液萃取技术对EGCG进行高效的提取,同时进一步采用硅胶柱层析法进行纯化,考察硅胶初始含水量、硅胶粒度、径高比、流速、流动相含水量以及负载量等因素对EGCG纯化过程的影响,从而制备出高纯度EGCG,通过实验,证明了柱层析法纯化的实用性与节能性。本工艺具有流程简单、生产周期短、溶剂用量少、成本低、得率高等优点,是一条值得推广的制备高纯度EGCG新工艺,具有极好的发展前景。通过硅胶柱层析的小试及中间放大试验,建立了如下工艺条件:1.最佳提取工艺新鲜老龄茶叶高温杀青后,常温水匀浆及负压空化混旋固液提取,经组合工艺EGCG提取率为2.514%。2.最佳纯化工艺确定了最佳洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚:含水2%的乙酸溶液=7.5:2.5:0.5;最佳硅胶初始含水量为10%;最佳硅胶粒度为200-300目;径高比为1:10时,硅胶柱对样品的分离效果最佳;最佳流速为80mL/min;最佳负载量为1gEGCG/20g硅胶。通过如上工艺的处理,成功的解决了强水溶性物质EGCG和ECG的分离,EGCG成品的纯度达到98.15%,回收率为71.35%,ECG纯度85%以上。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 茶多酚的研究与发展
• 1.2 茶多酚的组成及结构
• 1.3 茶多酚的提取分离及测定方法
• 1.4 茶多酚的保健应用
• 1.5 茶叶中EGCG纯化方法的研究现状
• 1.5.1 溶剂-沉淀法
• 1.5.2 柱色谱分离法
• 1.5.3 高效液相制备色谱法（HPLC）
• 1.5.4 高速逆流色谱法（HSCCC）
• 1.6 本论文的研究内容及意义
• 2 茶叶中活性成分的含量测定
• 2.1 实验仪器和材料
• 2.2 茶叶中EGCG、ECG的含量检测方法研究
• 2.2.1 色谱条件的建立
• 2.2.2 标准曲线的绘制
• 2.3 方法学的建立
• 2.3.1 重现性实验
• 2.3.2 回收率测定
• 2.4 本章小结
• 3 匀浆、负压空化混悬组合技术高效提取鲜茶叶中EGCG的研究
• 3.1 实验仪器与材料
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 组合工艺
• 3.2.2 传统工艺
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 组合工艺实验结果
• 3.3.2 传统提取方法实验结果
• 3.4 小结
• 4 EGCG柱层析纯化方法研究
• 4.1 EGCG的小试柱层析分离条件确定
• 4.1.1 实验仪器、材料和试剂
• 4.1.2 实验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 硅胶柱层析的优点
• 4.2.2 展开剂TLC条件的选择
• 4.3 小试放大实验
• 4.3.1 硅胶用量的选择
• 4.3.2 上样量的选择
• 4.3.3 流速的选择
• 4.3.4 径高比的选择
• 4.3.5 硅胶初始含水量的选择
• 4.3.6 结果分析
• 4.4 小结
• 5 EGCG高效纯化中间实验
• 5.1 实验仪器、材料和试剂
• 5.2 连续中压硅胶柱层析纯化EGCG
• 5.2.1 连续中压柱层析设备
• 5.2.2 连续中压硅胶柱层析纯化EGCG
• 5.3 中间试验与小试实验结果比较
• 5.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢