阿苯哒唑在黄鳝体内的药物动力学及残留研究

论文摘要

本研究建立了同时检测ABZ及其3种代谢物（ABZSO、ABZSO2和ABZSO2NH2）在黄鳝血浆及各组织中的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）,并以此方法研究了在20℃水温条件以15mg/kgbw剂量对健康黄鳝进行单次口灌ABZ后体内的药物动力学特征和多次口灌的残留消除规律。以乙酸乙酯为萃取剂两次抽提,取上清液蒸干,残留物用流动相溶解后上机检测。用Varian 325型高效液相色谱仪,VarianMicrosorb-MV-C18色谱柱（250×4.6mm2,5μm）,外加保护柱12.5×4.6mm2;紫外检测器,波长为292nm;柱温30℃:进样量20μL:以甲醇/双蒸水/冰乙酸（梯度洗脱）为流动相,用乙酸盐调节pH至3.8;流速1.5mL/min。结果显示,在0.125～32μg/g浓度范围内,线性关系良好;回收率在73%-96%。ABZ、ABZSO、ABZSO2和ABZSO2NH2的检测限分别为:血浆中0.02μg/g,0.03μg/g,0.05μg/g,0.05μg/g;肌肉中0.01μg/g,0.01μg/g,0.03μg/g,0.03μg/g;肝脏中0.03μg/g,0.04μg/g,0.05μg/g,O.05μg/g;肾脏中0.03μg/g,0.05μg/g,0.04μg/g,0.04μg/g;肌肉带皮中0.011μg/g,0.01μg/g,0.03μg/g,0.03μg/g。日内变异系数均小于5%,日间变异系数均小于15%。结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便的特点,可以同时检测鱼组织中ABZ、ABZSO、ABZSO2和ABZSO2NH2的含量。本实验研究了在20□2水温条件下单次口灌给药后ABZ在黄鳝体内的药物动力学。所选黄鳝体重为60±7 g,给药剂量为15mg/（kgbw）。d。结果显示,ABZ在灌注到黄鳝胃肠道之后,经过首过效应,很快转化成其活性产物ABZSO,并广泛分布全身各组织中去,原药被检测到很少,主要以ABZSO形式存在。经3P97药物动力学软件进行数据处理,在20□水温条件下药-时曲线符合有吸收一室模型,主要药物动力学参数为:ABZ,吸收速率常数（Kα）为0.24h-1;消除半衰期(t1/2ke)为3.87h;药时曲线下面积（AUC）为5.87μg·mL-1·h:表观分布容积（Vd/F）为14.27 L/kg;达峰时间（Tp）为4.79h;峰浓度(Cmax)为0.45μg/mL。ABZSO,Kα为1.02h-1;t1/2ke为11.45h;AUC为39.75μg·mL-1·h;Vd/F为5.40L/kg;Tp为5.03h;Cmax为1.77μg/mL。ABZSO2,Kα为4.38h-1;t1/2ke为14.70h:AUC为9.19μg·mL-1·h;Vd/F为34.63 L/kg:Tp为1.05h:Cmax为0.4μg/mL。以15mg/（kgbw）d的剂量连续3次口灌给药后,于最后一次给药后的第6、8、12、16、24、36、48、72、96、120、144h采集可食部分肌肉带皮样品,研究该药物在黄鳝体内的消除及残留规律。ABZ的消除速率比其代谢物ABZSO、ABZSO2和ABZSO2NH2快。ABZSO的平均浓度在120h后才降至0.1μg/g以下,144h后才检测不到药物。给药3d后在肌肉带皮中144h后4者均检测不到。通过药物残留实验得知,为确保所有个体可食组织中含药量均低于欧盟和中国的MRL,建议在20□水温条件下休药期不少于21d。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语表
• 1 引言
• 1.1 药物动力学研究在水产品安全测评上的重要性
• 1.1.1 药物动力学基本原理及参数
• 1.1.2 水产药物动力学研究意义
• 1.1.3 抗寄生虫药的药物动力学研究意义
• 1.2 国内外阿苯哒唑的相关研究进展
• 1.2.1 阿苯哒唑的理化性质
• 1.2.2 阿苯哒唑的作用机理
• 1.2.3 阿苯哒唑的抗虫谱
• 1.2.4 阿苯哒唑药效学研究
• 1.2.5 阿苯哒唑的药物动力学及残留研究
• 1.2.6 阿苯哒唑的残留检测研究
• 1.2.7 阿苯哒唑的毒理学及剂型的研究
• 1.3 本研究的目的意义
• 1.4 本文的研究内容
• 2 阿苯哒唑检验条件及方法学验证
• 2.1 药品来源与制备
• 2.1.1 标准品与试剂
• 2.1.2 标准储备液的制备
• 2.2 实验动物及组织样品的处理
• 2.2.1 实验动物暂养及取样
• 2.2.2 样品的处理
• 2.3 仪器设备
• 2.4 高效液相分析方法
• 2.4.1 血浆标准工作曲线
• 2.4.2 组织标准工作曲线
• 2.4.3 方法学验证
• 2.5 结果
• 2.5.1 标准曲线及线性范围
• 2.5.2 方法学验证数据
• 2.5.3 色谱条件
• 2.6 讨论
• 2.6.1 药物在组织中萃取方法的优化
• 2.6.2 检测器的选择
• 2.6.3 色谱条件的选择
• 2.7 小结
• 3 药物代谢动力学及组织分布研究
• 3.1 药品与口灌药液的配制
• 3.2 实验动物及饲养条件
• 3.3 动物分组、给药与采样
• 3.3.1 药动学分组与确定采样时间点
• 3.3.2 确定给药方式和剂量
• 3.3.3 样品采集方法
• 3.4 药物动力学分析
• 3.5 数据处理及统计分析
• 3.6 结果
• 3.6.1 药物动力学数据
• 3.6.2 药物组织分布数据
• 3.7 讨论
• 3.7.1 药物动力学分析
• 3.7.2 对给药剂量的选择依据
• 3.7.3 给药方式的比较
• 3.7.4 小结
• 4 药物残留研究
• 4.1 药品与试剂
• 4.2 实验动物及饲养条件
• 4.3 动物分组、给药与采样
• 4.4 药物残留数据分析方法
• 4.5 结果
• 4.6 讨论
• 4.6.1 阿苯哒唑及其代谢物在肌肉带皮中的残留分析
• 4.6.2 休药期的制定
• 4.7 小结
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 附录1 标准工作液色谱图
• 附录2 血浆及各组织中加样色谱图及空白对照图
• 附录3 最低检测限色谱图
• 硕士期间发表的论文