鸡卵清蛋白启动子论文-蔡薇,吴志鹏,赵俊生,徐宁迎,郭晓令

鸡卵清蛋白启动子论文-蔡薇,吴志鹏,赵俊生,徐宁迎,郭晓令

导读:本文包含了鸡卵清蛋白启动子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:纳豆激酶,卵清蛋白启动子,雌激素反应元件(ERE),慢病毒载体

鸡卵清蛋白启动子论文文献综述

蔡薇,吴志鹏,赵俊生,徐宁迎,郭晓令[1](2019)在《基于鸡卵清蛋白启动子的纳豆激酶慢病毒表达载体表达特性的研究》一文中研究指出纳豆激酶(nattokinase,NK)是一种有效的抗血栓药物。基于已构建的纳豆激酶慢病毒表达载体,旨在比较其在鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞中特异性表达的有效性。提取含卵清蛋白启动子(ovalbumin promoter,OV2)和雌激素反应元件(estrogen response element,ERE)的pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP重组质粒。通过PCR和双酶切进行初步鉴定,经生物公司测序、包装和滴定得转染传代培养的鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞,并采用荧光显微镜和qPCR法检测细胞表达产物。结果表明,载体pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP构建成功;且荧光显微镜下,鸡输卵管上皮细胞的绿色荧光多于成纤维细胞;qPCR检测发现NK正常表达。提示成功构建纳豆激酶慢病毒表达载体且在鸡输卵管上皮细胞中正常表达。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年13期)

王明山,任强,陆树,白培明[2](2018)在《鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ的功能及其在肿瘤中的作用》一文中研究指出鸡卵清蛋白上游启动子转录因子(COUP-TF)Ⅱ是一种转录调节因子,在器官发育和血管生成的过程中起着重要的作用,近几年来发现它能调节多个信号通路来控制多种肿瘤细胞生长和血管生成及淋巴管的生成,且被证实与多种肿瘤的发生和转移有至关重要的作用~([1])。本文研究其在非腺癌膀胱癌中的表达,并重点对COUP-TFⅡ的表达、功能调节及其在相关肿瘤中的作用进行综述。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2018年18期)

吴志鹏,刘健,赵俊生,徐宁迎,郭晓令[3](2016)在《鸡卵清蛋白启动子慢病毒载体构建及荧光定量PCR检测重组慢病毒滴度》一文中研究指出构建鸡卵清蛋白启动子(OV 2.8kb)与含有eGFP基因的慢病毒表达载体,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测重组慢病毒滴度。将鸡卵清蛋白启动子基因OV连接到慢病毒载体p LVshRNA-eGFP中替换质粒上CMV promoter元件,经酶切、测序鉴定获得携带OV与eGFP融合基因的重组慢病毒质粒,用QPCR检测病毒浓度滴定。结果显示,重组慢病毒质粒p LVshRNA-OV-eGFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的OV基因序列完全一致。在QPCR试验过程中,发现空白组和载体组的溶解曲线和扩增曲线较好,证明基因组抽提和QPCR过程无问题。最终测得病毒滴度约为1.6×10~7IU/m L。成功构建了携带OV与eGFP融合基因的慢病毒表达载体,为进一步研究卵清蛋白启动子基因的相关功能提供了优质的稳定转染载体。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2016年11期)

王凯,连海峰,牛琼,贾兴芳,刘成霞[4](2016)在《胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ、神经纤毛蛋白2的表达变化及其意义》一文中研究指出目的观察胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)和神经纤毛蛋白2(NRP2)的表达变化,并分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织各60例,采用Western blotting法和免疫组化法检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中的COUPTFⅡ、NRP2,分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系。结果胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为70.0%、78.3%,正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为30.0%、21.7%。胃癌组织、正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ相对表达量分别为0.84±0.22、0.68±0.34,NRP2相对表达量分别为0.86±0.17、0.58±0.22,胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2相对表达量均高于正常胃黏膜组织(P均<0.05)。胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2表达呈正相关关系(r=0.263,P<0.05)。浸润深度为T_3、T_4的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于浸润深度T_1、T_2的胃癌组织(P均<0.05);中低分化胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于高分化胃癌组织(P均<0.05);有淋巴结转移的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于无淋巴结转移的胃癌组织(P均<0.05)。结论 COUP-TFⅡ、NRP2在胃癌组织中高表达,并与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关,二者可能协同参与了胃癌的发生和发展。(本文来源于《山东医药》期刊2016年31期)

郭政,张秋婷,吴志昊,王春生,安铁洙[5](2016)在《鸡卵清蛋白基因启动子克隆及其活性的检测》一文中研究指出为了获得鸡输卵管特异表达的卵清蛋白基因启动子,研究在采用PCR方法从鸡心基因组DNA中扩增卵清蛋白基因启动子(5OV)的基础上,将其与p Ac GFP1-N1载体连接构建真核表达载体p Ac GFP1-5OV,并采用脂质体法将p Ac GFP1-5OV分别转染鸡输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞后,观察其在两种细胞中的表达活性。结果表明:利用克隆获得的5OV构建的真核表达载体p Ac GFP1-5OV在转染鸡输卵管上皮细胞后第24小时,在荧光倒置显微镜下可见绿色荧光,而转染鸡成纤维细胞后未观察到GFP表达。说明所克隆的5OV具有在输卵管上皮细胞特异表达的活性。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2016年01期)

焦点,杨安钢,王禾,温伟红[6](2015)在《鸡卵清蛋白上游启动子转录因子2与肿瘤关系的研究进展》一文中研究指出鸡卵清蛋白上游启动子转录因子2(COUP-TF2)是核受体家族的重要成员,其编码基因位于第15号染色体。COUP-TF2参与调节血管和淋巴管生成、能量代谢和脂肪生成、神经发育和器官形成等。COUP-TF2可抑制肿瘤细胞表面MHCⅠ类分子的表达,导致肿瘤细胞逃避免疫系统的监视从而诱发肿瘤。COUP-TF2也在多种肿瘤组织中高表达,且其表达水平与肿瘤的恶性程度呈正相关。COUP-TF2还可通过调节血管和淋巴管生成、肿瘤细胞的侵袭和转移、肿瘤细胞对激素的敏感性等机制参与肿瘤的发生发展。本文就COUP-TF2的生理作用及其参与肿瘤发生发展的分子机制进行综述。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2015年11期)

李增亮,姜宝飞,李伟,徐皓,徐泽宽[7](2013)在《鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ在人胃癌组织中的表达及临床意义》一文中研究指出目的:检测鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)在人胃癌组织中的表达,并探讨其临床意义及其影响胃癌发生、发展的可能分子机制。方法:收集66例手术切除的胃癌组织和相对应的癌旁非肿瘤组织标本,采用免疫组织化学法检测标本中COUP-TFⅡ和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达,分析COUP-TFⅡ与患者临床病理特征及预后之间的关系,以及COUP-TFⅡ与其潜在靶基因MMP-2的相关性。结果:COUP-TFⅡ蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为65.2%(43/66)和19.7%(13/66),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。COUP-TFⅡ蛋白的表达与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。COUP-TFⅡ蛋白阳性表达的患者术后平均生存时间比阴性表达者短,分别为(26.8±2.6)个月和(36.4±3.0)个月(χ2=4.118,P=0.042)。MMP-2蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为78.8%(52/66)和34.8%(23/66),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。COUP-TFⅡ与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.310,P=0.011)。结论:COUP-TFⅡ蛋白与胃癌的发生、发展、侵袭、转移以及不良预后密切相关,推测可能是通过调控MMP-2的表达而发挥作用。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2013年07期)

吴治昊[8](2013)在《鸡卵清蛋白启动子克隆及特异性表达质粒构建》一文中研究指出利用转基因动物生物反应器技术来进行人类药用蛋白的生产,在研究生物学领域和开发生物技术方面具有较为广泛的应用。目前有许多的人类药用蛋白,譬如单克隆抗体等都是利用工业生物反应器技术生产,但这样一种体系的建立时间周期长并且经济成本相对比较高。随着人们对药用蛋白的需求的日益增长,研制一种新型的既经济又能够有效生产药用蛋白的生物反应器成为了新的研究热点。家禽作为转基因动物生物反应器具有生产周期短,容易管理和规模化并且很经济等优点,虽然相关领域的技术研究已经趋于成熟,但是转基因禽类的技术研究仍未完善。本研究根据GeneBank中已发表的卵清蛋白基因序列设计引物扩增卵清蛋白OV5'端启动调控序列,得到一条约为3000bp特异性扩增产物。将扩增产物连接入pEASY-T1载体中并进行序列测定,结果证明我们成功克隆出了鸡卵清蛋白基因调控区。将克隆得到的鸡卵清蛋白基因特异性启动子插入本实验室保存的表达载体pAcGFP1-N1中,构建成鸡输卵管特异表达载体。将构建的质粒利用脂质体转染法转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡胚胎成纤维细胞进行瞬时表达以验证鸡卵清蛋白基因特异性启动子的特异性。本研究的研究结果如下:(1)利用鸡心组织DNA扩增获得经PCR和酶切鉴定约在3000bp处出现特异条带的卵清蛋白OV5'端启动子基因。对所获得的基因进行序列分析,其与GenBank中相应序列的同源性为99.27%。(2)利用克隆获得的卵清蛋白OV5'端启动子基因,与表达载体pAcGFP1-N1构建获得经PCR、酶切和测序鉴定正确的表达载体50V-GFP。(3)利用脂质体转染法将5OV-GFP质粒转染入鸡输卵管上皮细胞和鸡胚胎成纤维细胞中。在48h后,鸡输卵管上皮细胞出现绿色荧光,而鸡胚胎成纤维细胞未显示出绿色荧光。综上所述,本研究成功运用克隆获得的卵清蛋白OV5’端启动子基因与表达载体pAcGFP1-N1连接构建表达载体50V-GFP,利用其转染鸡输卵管上皮细胞和鸡胚胎成纤维细胞,验证了卵清蛋白OV5'端启动子基因的特异性,为转基因禽类生物反应器的研究奠定了基础。(本文来源于《东北林业大学》期刊2013-04-01)

逄越,李庆伟[9](2005)在《鸡卵清蛋白基因启动子调控GFP基因在鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞的表达》一文中研究指出特异性扩增家鸡卵清蛋白基因上游调控序列 1340bp~ +16 5 5bp片段和第一内含子 +49bp~ +16 5 5bp片段 ,去除pG FP N2载体自身的CMV启动子 ,分别构建了P2 9koval GFP和P1 5koval GFP两种表达载体 ,经测序和酶切鉴定表达载体构建正确。采用脂质体转染法分别将这两种载体、pGFP N2 (阳性对照 )质粒及阴性对照转染鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞。用荧光倒置显微镜观测绿色荧光蛋白的表达。结果表明 :两种表达质粒在鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞中都可以表达荧光蛋白。结果既显示卵清蛋白第一内含子对基因的表达起到一定的调控作用 ,也显示卵清蛋白启动子对输卵管上皮细胞和卵巢细胞不存在特异性 ,并且不存在种属差异性。(本文来源于《生物工程学报》期刊2005年01期)

鸡卵清蛋白启动子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

鸡卵清蛋白上游启动子转录因子(COUP-TF)Ⅱ是一种转录调节因子,在器官发育和血管生成的过程中起着重要的作用,近几年来发现它能调节多个信号通路来控制多种肿瘤细胞生长和血管生成及淋巴管的生成,且被证实与多种肿瘤的发生和转移有至关重要的作用~([1])。本文研究其在非腺癌膀胱癌中的表达,并重点对COUP-TFⅡ的表达、功能调节及其在相关肿瘤中的作用进行综述。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

鸡卵清蛋白启动子论文参考文献

[1].蔡薇,吴志鹏,赵俊生,徐宁迎,郭晓令.基于鸡卵清蛋白启动子的纳豆激酶慢病毒表达载体表达特性的研究[J].江苏农业科学.2019

[2].王明山,任强,陆树,白培明.鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ的功能及其在肿瘤中的作用[J].中国老年学杂志.2018

[3].吴志鹏,刘健,赵俊生,徐宁迎,郭晓令.鸡卵清蛋白启动子慢病毒载体构建及荧光定量PCR检测重组慢病毒滴度[J].江苏农业科学.2016

[4].王凯,连海峰,牛琼,贾兴芳,刘成霞.胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ、神经纤毛蛋白2的表达变化及其意义[J].山东医药.2016

[5].郭政,张秋婷,吴志昊,王春生,安铁洙.鸡卵清蛋白基因启动子克隆及其活性的检测[J].黑龙江畜牧兽医.2016

[6].焦点,杨安钢,王禾,温伟红.鸡卵清蛋白上游启动子转录因子2与肿瘤关系的研究进展[J].细胞与分子免疫学杂志.2015

[7].李增亮,姜宝飞,李伟,徐皓,徐泽宽.鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ在人胃癌组织中的表达及临床意义[J].南京医科大学学报(自然科学版).2013

[8].吴治昊.鸡卵清蛋白启动子克隆及特异性表达质粒构建[D].东北林业大学.2013

[9].逄越,李庆伟.鸡卵清蛋白基因启动子调控GFP基因在鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞的表达[J].生物工程学报.2005

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鸡卵清蛋白启动子论文-蔡薇,吴志鹏,赵俊生,徐宁迎,郭晓令
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