百喜草体细胞耐盐突变体筛选及其生理生化特性研究

论文摘要

本研究以百喜草成熟种子为外植体诱导出颗粒状愈伤组织,并以不同浓度(0 g / L、5 g / L、10 g / L、15 g / L、20 g/L)的NaCl盐做为选择剂,采用逐步正筛选法,筛选出耐盐愈伤组织变异系,并且再生出耐盐植株。按常规耐盐变异体植株的筛选方法,在再生耐盐植株幼苗移栽成活后,进行不同浓度的Nacl浇盐处理,并比较百喜草耐盐性愈伤组织与对照组以及筛选出的耐盐变异植株与对照组的几项生理生化指标。主要研究结果有:1百喜草的发芽率随NaCl浓度的升高显著下降;随着培养基中NaCl浓度的增大,愈伤组织诱导率、愈伤组织存活率、再生率及其稳定性均显著下降。2对百喜草成熟种子诱导产生耐盐颗粒状愈伤组织和同种普通愈伤组织的生理生化特性研究结果表明,随NaCl胁迫浓度的升高,百喜草耐盐组愈伤组织与对照组愈伤组织在多方面存在明显差异,前者含水量、丙二醛含量均高于后者;POD酶活性、SOD酶活性亦均高于对照组。研究还发现在提高愈伤组织耐盐性诸因素中,脯氨酸起着重要作用。这为做进一步的百喜草耐盐突变体系的筛选奠定了良好的基础。3对浇盐处理后再生植株的生理生化特性研究表明,随着浇盐浓度的提高,叶绿素含量及根系活力呈先升后降趋势,百喜草耐盐变异体组植株普遍高于对照组;耐盐变异体组植株和对照组的丙二醛含量均呈先降后升的趋势,耐盐变异体组植株的丙二醛含量低于同等盐胁迫条件下的对照组;耐盐变异体组植株和对照组的细胞膜透性均呈逐渐上升的趋势,但耐盐变异体组植株的细胞膜透性明显低于同等盐胁迫条件下的对照组;耐盐变异体组植株和对照组在无盐胁迫下,脯氨酸的含量基本相同,但随着盐浓度的增加,均有积累更多的脯氨酸倾向,并且耐盐变异体组植株的积累能力显著地高于对照组;耐盐变异体组植株和对照组的POD、SOD活性基本呈先升后降趋势,在任意不同Nacl盐浓度条件下,耐盐变异体组植株的POD、SOD活性均显著地高于同等盐胁迫条件下的对照组。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 国内外土壤盐渍化现状及研究进展
• 1.1.1 国内外土壤盐渍化现状
• 1.1.2 国内外土地盐渍化研究进展
• 1.2 草坪草耐盐性研究意义及进展
• 1.2.1 草坪草耐盐性研究的意义
• 1.2.2 草坪草耐盐性研究的进展
• 1.3 体细胞无性系变异和植物耐盐变异体离体筛选及其在草坪草育种上的应用
• 1.3.1 体细胞无性系变异定义及其特点
• 1.3.2 耐盐变异体的筛选
• 1.3.3 耐盐变异体在草坪草育种上的应用
• 2 引言
• 2.1 研究的目的和意义
• 2.2 研究的内容
• 2.2.1 不同 NaCl 浓度对种子萌发及其生长的影响
• 2.2.2 盐胁迫下体细胞突变体的筛选
• 2.2.3 耐盐性愈伤组织的生理生化检测
• 2.2.4 百喜草再生植株耐盐性的鉴定
• 2.2.5 百喜草耐盐再生植株生理生化特性检测
• 3 材料与方法
• 3.1 材料
• 3.2 百喜草耐盐突变体筛选
• 3.2.1 颗粒状愈伤组织诱导
• 3.2.2 NaCl 耐盐再生植株筛选
• 3.2.3 百喜草再生植株 NaCl 初筛
• 3.2.4 百喜草再生植株耐盐性鉴定
• 3.3 不同NaCl 浓度对种子萌发、愈伤组织诱导、及存活的影响
• 3.3.1 不同 NaCl 浓度对种子萌发期的影响
• 3.3.2 不同 NaCl 浓度对愈伤组织诱导的影响
• 3.3.3 数据统计
• 3.3.4 数据统计软件
• 3.4 百喜草耐盐性愈伤组织和耐盐突变体植株生理生化特性检测
• 3.4.1 相对含水量的测定
• 3.4.2 叶绿素含量的测定
• 3.4.3 丙二醛（MDA）含量测定
• 3.4.4 细胞膜透性的测定
• 3.4.5 脯氨酸（PRO）含量测定
• 3.4.6 植物根系活力的测定（TTC 法）
• 3.4.7 过氧化物酶（POD）活性的测定
• 3.4.8 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定
• 4 结果与分析
• 4.1 百喜草种子耐盐性研究及耐盐再生植株的筛选
• 4.1.1 不同盐浓度对种子萌发的影响
• 4.1.2 不同浓度 NaCl 对种子根长、芽长、及根冠比的影响
• 4.1.3 两种不同培养基对颗粒状愈伤组织诱导的影响
• 4.1.4 盐浓度对愈伤组织诱导率的影响
• 4.1.5 耐盐愈伤组织变异体的存活率
• 4.1.6 耐盐性变异体的绿苗分化率及移栽成活率
• 4.1.7 耐盐性变异体植株各部分的干重
• 4.2 百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性分析
• 4.2.1 两种愈伤组织在不同盐浓度处理下对丙二醛含量的影响
• 4.2.2 两种愈伤组织在不同盐浓度处理下对愈伤组织含水量的影响
• 4.2.3 两种愈伤组织在不同盐浓度处理下对POD 酶活性的影响
• 4.2.4 两种愈伤组织在不同盐浓度处理下对SOD 酶活性的影响
• 4.2.5 两种愈伤组织在不同盐浓度处理下对愈伤组织脯氨酸含量的影响..
• 4.3 盐胁迫下耐盐植株筛选的最佳时间与浓度
• 4.4 耐盐突变体植株生理生化特性分析
• 4.4.1 不同盐处理下叶绿素含量的变化
• 4.4.2 不同盐处理下丙二醛（MDA）含量的变化
• 4.4.3 不同盐浓度处理下细胞膜透性的变化
• 4.4.4 不同盐处理下脯氨酸（PRO）含量的变化
• 4.4.5 不同盐处理下植物根系活力（TTC 法）的变化
• 4.4.6 不同盐处理下过氧化物酶（POD）活性的变化
• 4.4.7 不同盐处理下超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化
• 5 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.1.1 百喜草种子及耐盐变异体植株的耐盐性研究
• 5.1.2 百喜草再生体系建立组培研究
• 5.1.3 百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性研究
• 5.1.4 百喜草耐盐性变异植株的生理生化特性
• 5.2 讨论
• 5.2.1 关于盐浓度对种子萌发的影响
• 5.2.2 关于脯氨酸含量的测定
• 5.2.3 关于耐盐变异体的筛选方法
• 5.2.4 关于植物的生理生化特性
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 在校期间以第一作者发表的论文硕士期间论文