论文摘要
目的:近年来,随着社会人口老龄化,脑血管病的发病率不断升高。脑血管病已经成为人类死亡的三大主要原因之一,对缺血性脑损伤的治疗方法和治疗药物的研究是当前神经科学领域的研究热点之一。本研究采用骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,MSCs）移植来对大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型进行干预,探讨骨髓基质干细胞在急性局灶性脑缺血疾病治疗中的作用及其机制。方法:线拴法制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型（MCAO） （ n = 80） ,随机均分为假手术组（A组）,缺血模型组（B组）,缺血+磷酸盐缓冲液（ PBS）对照组（C组）和缺血+MSCs组（D组）。缺血2 h后再灌注, D组将2×106个MSCs通过颈动脉移植入脑缺血大鼠体内, C组经颈动脉注入等体积的PBS液,B组不做任何处理。A组麻醉后,做颈部正中切口,暴露颈总动脉,颈内动脉、颈外动脉、翼腭动脉后缝合皮肤。再灌注24小时后,分别观察神经行为学评分,脑梗死体积,尼氏小体平均灰度,凋亡相关基因Bcl-2,Bax及血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor, VEGF）的表达。结果:1、神经行为学评分:A组为0分,B组为（3.7±0.5）明显高于D组（2.0±0.6）,具有明显统计学差异（P<0.01）。C组（3.6±0.6）,与D组相比,有统计学差异（P<0.01）。而B组与C组之间的差异无统计学意义。2、脑梗死体积:A组梗死体积为0,B组梗死体积为（208±26）mm3、C组为（210±18）mm3,D组为（130±17）mm3。D组梗死体积明显小于B、C组,有统计学差异（P<0.05）,B组和C组间无统计学上差异。3、病理形态学:1)尼氏小体:A组平均灰度值（109.73±10.96）,B组为（178.18±21.66）,C组为（163.64±20.29）,D组为（124.36±14.85）。尼氏体的平均灰度值与细胞内尼氏体含量呈反比:平均灰度值越低,其细胞内尼氏体含量越高。A组尼氏体的平均灰度值最低,尼氏体含量最高。B组尼氏体的平均灰度值最高,尼氏体含量最低。D组的平均灰度值与B组、C组相比明显下降,说明其细胞内尼氏体含量有明显提高,在统计学上有差异（P<0.01）。而C组与B组相比无统计学意义。2) Bcl-2免疫组化染色:Bcl-2的表达A组为（0.15±0.03）,B组为（0.39±0.04）,C组为（0.41±0.03）,D组为（0.68±0.11）。Bcl-2的过度表达具有神经元保护作用。以D组为最高,与其他各组相比均具有统计学差异（P<0.05）,但B、C两组间无统计学意义。3) Bax免疫组化染色:Bax表达A组为（0.19±0.03）,B组为（0.54±0.05）,C组为（0.45±0.03）,D组为（0.27±0.03）。细胞受损时Bax表达增强。以B组表达最强,C组次之,A组最低,D组与B、C二组相比具有统计学差异（P<0.05）,但B、C两组间无统计学意义。4) VEGF的表达:A组为（3.256±1.920,%）,B组为（3.345±1.400,%）,C组为（3.940±0.945,%）,D组为（7.207±2.245,%）。MSCs移植后,在脑内存活、迁徙、分泌血管内皮细胞生长因子（VEGF）,与其他组相比,D组VEGF含量明显增高,与各组相比均有统计学差异（P<0.05）。结论:1、动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤具有较好的疗效,能够明显改善神经功能缺损。2、动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤能够明显缩小梗死体积,减轻神经细胞水肿,改善神经细胞代谢。3、动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤的可能机制是通过上调细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax的比值,减少神经细胞的凋亡;增加了VEGF的表达,促进新生血管形成,使缺血边缘区的血流改善,从而影响神经功能的恢复。
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标签：骨髓基质干细胞论文; 脑缺血论文; 血管内皮生长因子论文;