离心运动对骨骼肌生肌调节因子的影响及针刺干预研究

论文摘要

目的：通过观察离心运动及针刺干预对生肌调节因子（MRFs）与Wnt/β-catenin信号通路主要信号分子的影响,探讨MRFs变化的可能机理及其在骨骼肌损伤修复过程中的作用。方法：实验一将SD大鼠分为安静（C）、运动（E）与运动针刺组（EA）,进行坡度为-16°四周跑台运动；免疫印迹法检测MRFs蛋白表达。实验二将SD大鼠分为C、CA（安静针刺）、E与EA组,进行坡度为-16°一次性跑台运动；实时定量PCR检测Wnt1、Wnt3a mRNA表达,免疫印迹法检测β-catenin、GSK-3β蛋白磷酸化水平及MyoD、Myogenin蛋白表达。结果：1.一、三、四周EA组MyoD、MRF4蛋白表达显著高于E组（P<0.05）,一、三周EA组Myf5蛋白表达显著高于E组（P<0.05）,一、二周EA组Myogenin蛋白表达显著高于E组（P<0.05）,三、四周与之相反。2.CA组Wnt1 mRNA表达均低于C组,Wnt3a mRNA在12h、72h及120h显著高于C组（P<0.05）；CA组72h GSK-3β活性与120hβ-catenin磷酸化水平显著低于C组（P<0.05）；24h、48h MyoD与48h及其之后Myogenin蛋白表达显著高于C组（P<0.05）。3.EA组Wnt1、Wnt3a mRNA表达的升高程度低于E组。72h E组、EA组GSK-3β活性与β-catenin磷酸化水平均显著低于C组（P<0.05）,E组β-catenin磷酸化水平显著低于EA组（P<0.05）。EA组12h与24h MyoD蛋白表达均显著高于E组与C组（P<0.05）；E组Myogenin蛋白表达在24h、72h出现两个峰值,12h、24h、120h EA组Myogenin蛋白表达显著高于E组（P<0.05）。结论：四周离心运动能上调Myf5与Myogenin蛋白表达,下调MyoD与MRF4蛋白表达；针刺具有调控骨骼肌MRFs维持在正常水平的作用。针刺正常骨骼肌对Wnt/β-catenin信号通路有影响；一次性离心运动及运动后针刺能上调Wnt1、Wnt3a mRNA表达,降低GSK-3β活性与β-catenin磷酸化水平,针刺有上调β-catenin磷酸化水平的作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 概述
• 1.2 研究内容
• 1.3 研究假设
• 1.4 研究方案
• 1.4.1 实验一 技术路线
• 1.4.2 实验二 技术路线
• 2 文献综述——运动与骨骼肌再生
• 2.1 骨骼肌再生的形态学特征
• 2.2 卫星细胞
• 2.2.1 卫星细胞的生物学特征
• 2.2.2 卫星细胞的鉴定
• 2.3 卫星细胞与骨骼肌再生
• 2.3.1 肌卫星细胞的激活——生肌调节因子的作用
• 2.3.2 肌卫星细胞的自我更新
• 2.3.3 Pax7对肌卫星细胞的作用
• 2.4 调控卫星细胞增殖与分化的信号通路
• 2.4.1 Myostatin信号通路的作用
• 2.4.2 Notch信号通路的作用
• 2.4.3 Wnt/β-catenin信号通路的作用
• 2.5 运动对生肌调节因子的影响
• 2.5.1 一次性运动对生肌调节因子的影响
• 2.5.2 长期运动对生肌调节因子的影响
• 2.6 运动对Wnt/β-catenin信号通路的影响
• 2.7 针刺对骨骼肌损伤的修复作用
• 3 研究过程与分析
• 3.1 实验一 四周离心运动对生肌调节因子的影响及针刺的干预作用
• 3.1.1 前言
• 3.1.2 材料与方法
• 3.1.3 实验结果
• 3.1.4 讨论
• 3.1.5 小结
• 3.2 实验二 一次性离心运动及针刺对大鼠骨骼肌生肌调节因子影响的机理研究
• 3.2.1 前言
• 3.2.2 材料与方法
• 3.2.3 实验结果
• 3.2.4 讨论
• 3.2.5 小结
• 4 结论
• 5 创新点
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果