NOS在子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜中的表达

论文摘要

目的本实验旨在通过选取子宫内膜异位症患者在位内膜和同一异位内膜组织以及正常育龄期妇女子宫内膜组织,从分子水平上检测和比较一氧化氮合成酶（NOS）的两个亚型:诱导型一氧化氮合成酶（INOS）和内皮型一氧化氮合成酶（ENOS）在三组子宫内膜组织中mRNA的表达变化,来证实子宫内膜组织上的NO水平与子宫内膜异位症之间的关系,以进一步探讨一氧化氮合成酶对子宫内膜异位症发病机制的作用及其影响,为临床采取靶向治疗子宫内膜异位症开启一条新思路提供了实验依据。材料和方法选取2006年10月至2007年3月在江西省妇幼保健院就诊患者,将研究对象分为两组,分别为实验组（Experiment E组）和对照组（Control,C组）,其中实验组又可分为在位内膜组（Eutopic endometrial EU组）和异位内膜组（Ectopic endometrial EC组）。实验组为因盆腔包块在我院经手术后确诊为盆腔子宫内膜异位症患者,取其术前诊刮所得子宫内膜组织和术中所得囊肿之囊皮,在位和同一患者异位内膜共30例（增生期18例,分泌期12例）,经术后病理证实且排除其他内膜病变。对照组为宫颈疾病术前在我院行诊断性刮宫,取其内膜组织20例（增生期15例,分泌期5例）,经病理证实排除其他内膜病变。盆腔子宫内膜异位症患者实验组平均年龄（32.2±2.77）岁,对照组平均年龄（34.9±3.24）岁,两组间年龄差异无统计学意义（P=0.294）。所有患者要求有正常生育功能且年龄在45岁以下,肝肾功能、外周血正常,无炎症性、缺氧性疾病,且术前六个月未用性激素以及免疫抑制剂治疗。将所取内膜组织用生理盐水漂洗后在滤纸上吸干水分,放入EP管中,置于液氮中速冻半小时后转移至-70℃低温冰箱中备用。采用RT-PCR从分子水平上检测不同月经周期诱导型一氧化氮合成酶（INOS）和内皮型一氧化氮合成酶（ENOS）在在位内膜和同一患者异位内膜以及对照组内膜上的mRNA表达情况,并探讨eNOS和INOS的mRNA表达情况与月经周期之间的相关性。所有数据均采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析处理。结果:1、增生期eNOS在三组内膜中均有表达,子宫内膜异位症患者在位内膜组eNOS与β-actin光密度积分值的比值显著高于对照组（p=0.0001）,异位内膜组的eNOS与β-actin光密度积分值的比值也显著高于对照组（p=0.0001）,在位内膜组和异位内膜组的eNOS与β-actin光密度积分值的比值差异无统计学意义（p=0.759）;2.分泌期eNOS在三组内膜中均有表达,子宫内膜异位症患者在位内膜组eNOS与β-actin光密度积分值的比值显著高于对照组（p=0.049）,异位内膜组的eNOS与β-actin光密度积分值的比值也显著高于对照组（p=0.038）,在位内膜组和异位内膜组的eNOS与β-actin光密度积分值的比值差异无统计学意义（p=0.793）;3.增生期iNOS在在位内膜组和异位内膜组以及对照组均无表达;4.分泌期iNOS在三组内膜中也有表达,子宫内膜异位症患者在位内膜组iNOS与β-actin光密度积分值的比值显著高于对照组（p=0.05）,异位内膜组的iNOS与β-actin光密度积分值的比值也显著高于对照组（p=0.012）,在位内膜组和异位内膜组的iNOS与β-actin光密度积分值的比值差异无统计学意义（p=0.822）; 5.子宫内膜异位症患者在位内膜组eNOS分泌期光密度积分值的比值显著高于增生期（p=0.001）,异位内膜组eNOS分泌期光密度积分值的比值显著高于增生期（p=0.004）,对照组eNOS分泌期光密度积分值的比值与增生期相比差异无统计学意义（p=0.072）;结论:1.Nos在子宫内膜异位症患者在位和同一患者异位子宫内膜上的光密度积分值的比值高于对照组可能与其发病机制存在一定的关系;2.在位内膜组和异位内膜组相比较,异位内膜组中eNOS在增生期和分泌期,iNOS在分泌期光密度积分值的比值均高于在位内膜组,但是差别无统计学意义,从某种程度上印证了“在位内膜决定论”。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 RT –PCR 试剂与材料
• 2.2 RT-PCR 试剂溶液配置
• 2.3 主要仪器与设备
• 2.4 研究对象
• 2.5 研究方法
• 2.5.1 标本取材
• 2.5.2 RT-PCR
• 2.5.2.1 组织总RNA的提取
• 2.5.2.2 RNA逆转录
• 2.5.2.3 PCR扩增
• 2.6 统计学处理
• 第3章 结果
• 3.1 实验图片
• 3.2 数据统计
• 3.3 结果分析
• 第4章 讨论
• 4.1 NO 和 NOS 简介
• 4.2 NO和NOS与子宫内膜异位症之间的关系
• 4.3 NOS在子宫内膜异位症患者内膜中的表达
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述 一氧化氮合酶与子宫内膜异位症之间的关系
• 攻读学位期间的研究成果