论文题目: 离心运动对骨骼肌细胞膜骨架蛋白含量影响的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 运动人体科学
作者: 周越
导师: 王瑞元
关键词: 骨骼肌,细胞膜骨架蛋白,肌养蛋白,离心运动,微损伤,基因表达
文献来源: 北京体育大学
发表年度: 2005
论文摘要: 1研究目的研究肌细胞膜骨架蛋白dystrophin在大强度离心运动及适应性训练后的含量变化特点,分析肌细胞膜骨架蛋白缺失与延迟性骨骼肌损伤时血清酶升高的关系,及其对肌细胞膜部分功能的影响,探讨细胞膜骨架蛋白在骨骼肌纤维中存在的特点和作用。2研究方法以雄性Wistar大鼠为研究对象,进行“一次性大强度离心运动”和“6周适应性离心运动训练”两种方式运动。其中一次性离心运动实验为-16°下坡跑台跑,定量大负荷间歇性运动,跑速为26.8m/min,运动5min×10组,组间歇1min。适应性离心训练为6周,每周5天训练,速度从20.0m/min增加到35.0m/min,每次20min,-5°下坡间歇跑。离心运动后不同时段和适应性训练后取大鼠后肢腓肠肌外侧头进行分析。样本-20℃冷冻切片,15μm厚。“异染性染料-腺苷三磷酸酶法”鉴别肌纤维类型;抗C端单克隆抗体,二步免疫组化法和免疫印迹法检测Dystrophin含量。地高辛标记的寡核苷酸探针原位杂交检测Dystrophin基因表达。用Scion Image进行组织切片的图像分析。酶动力法测试血清CK、LDH含量。黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别用于肌肉匀浆SOD和MDA检测。测定肌细胞膜Na+-K+-ATPase活性。以DPH和N[3P]M为探针,用荧光分光光度计分别测定肌细胞膜脂质流动性和膜蛋白的活动性。3研究结果3.1 I型纤维中的dystrophin含量在离心运动后即刻没有明显的变化,在随后的4小时和24小时,有下降的趋势,在运动后48小时和72小时则明显减少(P<0.05);IIa型纤维中的Dystrophin含量各个时相均没有显著性的变化;IIb型纤维中的dystrophin含量在离心运动后即刻就有明显的下降(P<0.05)。但在其后的各时相基本保持稳性,不再有明显的变化。3.2离心运动后即刻dystrophin基因表达水平明显下降(P<0.05),为安静组的28%;并在随后时相内逐渐升高,在48小时达到最大,为安静组的172%。3.3进行适应性训练的大鼠肌细胞膜骨架蛋白的dystrophin含量有上升的趋势。大强度定量负荷后,训练组肌细胞膜dystrophin含量减少的幅度具有小于对照组的趋势。3.4一次性离心运动后,膜脂质流动性逐渐变低,并在运动后48小时达最低。一次性运动后的膜蛋白活动性,则在运动后逐渐增高,并在12小时达最高,24小时降低后又在48小时再次升高。适应性训练后的膜脂流动性,在定量负荷后,训练组明显低于其对照组。膜蛋白活动性则没有显著的组间差异。3.5未发现肌细胞膜骨架蛋白含量的变化与自由基代谢指标及血清CK、LDH有明显的相关关系。细胞膜骨架蛋白dystrophin含量与膜蛋白活动性呈负相关r=-0.722(P<0.05)。3.6适应性训练后的离心运动测试结果中,血清CK、LDH与膜质流动性正相关,其中CK与膜脂质流动性有具显著意义的正相关,r=0.802;与膜蛋白活动性具有负相关趋势。同时膜脂质流动性与膜蛋白活动性有负相关的趋势。在一次性离心运动测试结果中,肌细胞膜上Na~+-K~+-ATPase活性与脂质流动性正相关r=0.518。4结论4.1肌细胞膜骨架蛋白dystrophin在离心运动的即时损伤中,以IIb型纤维中的缺失为主,延迟损伤以I型纤维中的缺失为主。4.2进行适应性训练的大鼠肌细胞膜骨架蛋白dystrophin的含量有上升的趋势。4.3膜骨架蛋白减少使膜蛋白活动性增加,并可能通过影响膜脂流动性而引起膜的通透性及ATPase活性变化。
论文目录:
缩略语中英文对照表
中文摘要
英文摘要
前言
1 选题依据
2 研究目的和内容
3 研究假设
文献综述
细胞膜骨架蛋白dystrophin 及与运动损伤有关的研究进展
1 细胞膜骨架蛋白 Dystrophin 与肌营养不良症
2 与 Dystrophin 的结构功能研究
3 Dystrophin 与运动有关的研究现状
4 结语
研究内容
1 细胞膜骨架蛋白dystrophin 分布及一次性离心损伤时的含量及表达变化
1.1 实验材料与方法
1.1.1 实验对象与分组
1.1.2 测试样本的采集与处理
1.1.3 指标测试与方法
1.1.4 数据统计方法
1.2 实验结果
1.2.1 离心运动后不同类型肌纤维中膜骨架蛋白dystrophin 的变化
1.2.2 离心运动后血清 CK、LDH 的变化及自由基代谢变化
1.2.3 损伤后膜骨架蛋白含量变化与骨骼肌内容物泄漏及自由基代谢变化的相关分析
1.2.4 离心运动致骨骼肌损伤过程中dystrophin 基因表达的变化
1.3 分析讨论
1.4 结论
2 适应性离心训练对肌细胞膜骨架蛋白含量的影响
2.1 实验材料与方法
2.1.1 实验对象与分组
2.1.2 测试样本的采集与处理
2.1.3 指标测试与方法
2.1.4 数据统计方法
2.2 实验结果
2.2.1 适应性训练过程中大鼠体重的变化
2.2.2 适应性训练期间及定量负荷后膜骨架蛋白的变化
2.2.3 适应性训练期间及定量负荷后对生化指标的变化
2.3 分析讨论
2.4 结论
3 细胞膜骨架蛋白含量变化与膜流动性及 Na~+-K~+-ATPase 活性变化的关系
3.1 实验材料与方法
3.1.1 实验对象与分组
3.1.2 测试样本的采集与处理
3.1.3 指标测试与方法
3.1.4 数据统计方法
3.2 实验结果
3.2.1 离心运动时细胞膜骨架蛋白丢失对膜流动性的影响
3.2.2 细胞膜骨架蛋白含量变化对膜流动性、ATPase 活性的影响
3.3 分析讨论
3.4 结论
全文总结
致谢
参考文献
发布时间: 2007-12-27
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