三氧化二砷诱导子宫颈癌HeLa细胞凋亡的初步研究

论文摘要

目的:通过研究三氧化二砷（As2O3）诱导子宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡作用,探讨As2O3在子宫颈癌治疗中的临床意义。方法:通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测浓度分别为0.0,1.0,2.0,5.0,10.0μmol/L的As2O3作用24,48,72,96h后,检测As2O3对HeLa细胞增殖活性的影响;采用HE染色及倒置相差显微镜进行形态学观察;利用细胞凋亡原位检测法（TUNEL法）及细胞荧光染色法（AO/EB荧光染色法）进行细胞凋亡的检测;免疫组织细胞化学检测凋亡相关基因bcl-2和bax的蛋白表达情况;采用流式细胞仪分析细胞周期。结果:2μmol/L As2O3处理HeLa细胞24h后,可见反应细胞存活的OD值（光吸收值）明显降低（p<0.05）,处理72h后,OD值进一步降低（p<0.01）,经5μmol/L As2O3处理的HeLa细胞24h后可见OD值也明显降低（p<0.05）,As2O3对HeLa细胞生长的这种抑制作用呈现出浓度和时间依赖性;As2O3作用后,细胞出现明显的凋亡特征性改变;细胞凋亡原位检测法（TUNEL法）可发现有DNA的断裂;凋亡相关基因bcl-2蛋白表达下降,而bax表达上升;流式细胞术分析显示2.0,5.0,10.0μmol/LAs2O3作用于HeLa细胞24小时后G2/M期的细胞数分别从3.6%增加到4.0%和4.5%;处理48小时后G2/M期细胞数增加更显著,从3.8%增加到7.9%和10.5%。结论:As2O3可以诱导子宫颈癌HeLa细胞凋亡,抑制细胞增殖,其作用具有浓度和时间依赖性。As2O3作用于HeLa细胞后该细胞生长阻滞于G2/M期。凋亡相关基因bcl-2蛋白表达下降,而bax表达上升。As2O3使HeLa细胞周期阻滞和诱导其凋亡的作用机制可能在宫颈癌的治疗作用中具有重要意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文