论文摘要
目的通过检测PDR患者玻璃体中Ang-2的表达情况，以及PDR患者玻璃体液对人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）生长情况的影响，探讨Ang-2在PDR发病过程中的作用，以进一步研究PDR的发病机制，为抗新生血管形成的治疗提供理论基础。材料与方法一、材料来源1、PDR患者玻璃体液取自2005年12月至2006年9月在中国医科大学附属一院眼科行玻璃体切割手术的PDR患者，25例26只眼。正常人玻璃体液取自角膜移植供体眼，5例5只眼。2、人脐静脉血管内皮细胞株（HUVECs）购自中国医科大学肿瘤研究所。3、主要试剂：人Ang-2定量EIA试剂盒（购自上海西唐生物科技有限公司）；单克隆兔抗人Ang-2一抗，免疫组化SABC试剂盒和DAB显色试剂盒（购自武汉博士德生物制品有限公司）。二、实验方法1、采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定25例PDR患者26只眼及5例正常人5只眼玻璃体中Ang-2的含量。2、制备培养的HUVECs爬片，选取生长状态好的细胞爬片，随机分成3组：A组为空白对照组，B组为试验对照组给予正常人玻璃体液，C组为试验组给予PDR患者玻璃体液，培养24小时后，观察细胞形态学改变，固定行Ang-2免疫细胞化学染色。3、统计学分析采用SPSS13.0 For Windows统计软件对测定结果行Kruskal-Wallis秩和检验及Spearman相关分析，P＜0.05有统计学意义。结果1、PDRV期（540.5470 pg／ml）和Ⅵ期（472.2060 pg／ml）患者玻璃体中Ang-2含量明显高于正常对照组（7.9170 pg／ml），差异有显著的统计学意义（P＜0.01），PDRⅤ期患者的玻璃体中Ang-2含量高于Ⅵ期患者，但差异无统计学意义（P＞0.05）。2、PDR患者玻璃体中Ang-2含量与视力下降加重病史呈负相关，r=-0.802，P＜0.01。3、PDR患者玻璃体中Ang-2含量与开始出现视物模糊、眼前黑影飘动病史无相关性（P＞0.05）。4、PDR患者玻璃体中Ang-2含量与糖尿病病史无相关性（P＞0.05）。5、PDR患者玻璃体液处理的HUVECs呈十字交叉样或不规则分布，可见不规则管腔样结构，细胞呈梭形，Ang-2免疫细胞化学染色呈强阳性表达；而试验对照组细胞均匀分布，可见较规则的管腔样结构，Ang-2免疫细胞化学染色呈弱阳性表达。结论Ang-2在PDR患者玻璃体中的含量明显高于正常人，Ang-2可能参与了PDR的发病过程，可能是在视网膜新生血管形成的始动因子之一。
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