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万古霉素阳离子脂质体复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架治疗兔慢性难治性感染性骨缺损的实验研究

2020-12-11阅读(879)

万古霉素阳离子脂质体复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架治疗兔慢性难治性感染性骨缺损的实验研究

论文摘要

目的；检验阳离子脂质体包封万古霉素附着于纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖（Nano-hydroxyapatite/chitosan/konjac glucomannan n-HA/CS/KGM）复合支架上后体内抗感染及骨修复活性。方法：本实验分三部分进行：1.万古霉素阳离子脂质体纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架降解性、组织相容性检测将万古霉素阳离子脂质体n-HA/CS/KGM埋植在新西兰大白兔大腿内侧皮下组织内或浸泡于磷酸盐缓冲液中,分别于2、4、6、8、10、12、14及16周取出,通过组织病理学切片研究材料周围组织反应,利用扫描电镜检查材料的表面征象,准确称重以检测材料降解前后的重量。以了解万古霉素阳离子脂质体n-HA/CS/KGM在体内、体外的降解情况和组织相容性。2.慢性难治性骨髓炎动物模型制备与鉴定根据文献方法制备兔的慢性骨髓炎模型,模型确定后,给予尽可能彻底的清创及敏感抗生素治疗2w,再观察临床表现、大体观、X线表现以及行骨髓组织细菌培养、组织学观察,最后以组织学观察为基础,确定慢性难治性骨髓炎模型的建立。3.万古霉素阳离子脂质体复合纳米痉基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架治疗兔慢性难治性感染性骨缺损的实验研究取6月龄健康新西兰大白兔51只,体重1.5-3.0kg（均数±标准差,2.22±0.44Kg）,用金黄色葡萄球菌制备慢性难治性感染性胫骨骨缺损模型。将造模后4周存活的48只兔随机分为4组,每组12只。A组：清创后不做任何处理：B组：n-HA/CS/KGM空白支架组；C组：万古霉素n-HA/CS/KGM支架组；D组：万古霉素阳离子脂质体n-HA/CS/KGM支架组。清创后分别双侧骨缺损处植入相应支架,8周后行大体观察、骨缺损修复观察、X线片观察、组织学观察及细菌学检查。结果：1.万古霉素阳离子脂质体n-HA/CS/KGM材料在16周内可降解为细小颗粒,材料的体内、体外降解趋势相同,体内降解速度略快于体外降解。埋植材料周围皮下组织无脓肿形成和组织坏死发生,局部组织反应为轻微的炎症反应。2.33只动物中,10只局部出现软组织肿块,20只动物X线片提示局部软组织肿胀影、骨质增生、低密度空洞影；25只骨髓组织细菌培养阳性,21只组织学观察呈慢性炎症改变。3.造模4周后x线片显示明显骨质缺损、低密度阴影及软组织肿胀影,Norden评分均大于3分,平均得分（3.83±0.52）分。治疗后8周大体观察：C、D窦道已愈合,A、B组仍有窦道形成；肉眼观察评分C、D组显著优于A、B组（P<0.05）。骨缺损修复观察：D组骨缺损已修复,骨缺损最长径的测量结果显著优于其余3组（P<0.05）。X线片观察：C、D组可见新骨形成,A、B组可见骨膜反应及髓腔低密度影；Norden评分D组优于其余3组（P＜0.05）。组织学观察：HE染色示C、D组可见大量骨小梁形成,纤维增生,未见明显感染迹象,A、B组仍可见中性粒细胞积聚；Smeltzer评分C、D组显著优于A、B组（P＜0.05）。细菌学检查：D组阴性率显著高于其余3组（P<0.05）。结论：1.万古霉素阳离子脂质体nHA/CS/KGM材料组织相容性良好,降解时间适宜,适用于动物体内试验,可进一步研究开发。2.21只实验动物慢性难治性骨髓炎模型制备成功,证实此法可成功制备慢性难治性骨髓炎动物模型,成功率为56.8%。3.万古霉素阳离子脂质体n-HA/CS/KGM复合支架可很好地治疗兔慢性难治性感染性骨缺损,为临床上治疗慢性感染性骨缺损提供了新思路。

论文目录

  • 英文縮写简表
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 第一节 万古霉素阳离子脂质体纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架降解性、组织相容性检测
  • 材料与方法
  • 结果
  • 结论
  • 讨论
  • 参考文献
  • 第二节 慢性难治性骨髓炎动物模型制备与鉴定
  • 材料与方法
  • 结果
  • 结论
  • 讨论
  • 参考文献
  • 第三节 万古霉素阳离子脂质体复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖支架治疗兔慢性难治性感染性骨缺损的实验研究
  • 材料与方法
  • 结果
  • 结论
  • 讨论
  • 参考文献
  • 综述1
  • 参考文献
  • 综述2
  • 参考文献
  • 硕士研究生期间发表论文
  • 致谢

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