论文摘要
本研究在前人对杜鹃花组织培养研究的基础上,以牛皮杜鹃(Rhododendronchrysanthum Pall.)的种子通过无菌发芽获得无菌苗,选用无菌苗的茎段、叶片为中间繁殖体,通过正交实验设计并结合方差分析、多重比较,筛选出了牛皮杜鹃离体培养的最佳培养基配方,探讨了基本培养基、ZT、AC对牛皮杜鹃植株再生的影响,结果表明:(1)无菌发芽:通过对种子的发芽率和生长情况进行调查,发现牛皮杜鹃种子发芽率低,在培养基中加入2.00mg/L的GA3能明显的提高发芽率,并且使发芽时间提前,还能在一定程度上促进小苗的伸长生长。(2)无菌苗叶片初代培养:通过对无菌苗叶片诱导分化率进行调查,选出了适合牛皮杜鹃无菌苗叶片初代诱导的最佳组合为:WPM(培养基)+ZT 10mg/L+IBA 3mg/L。(3)无菌苗茎段初代培养:通过对无菌苗茎段诱导分化率进行调查,选出了适合牛皮杜鹃无菌苗茎段初代诱导的最佳组合为:WPM(培养基)+ZT 10mg/L+IBA 1mg/L。(4)继代增殖:继代增殖培养时,通过对苗的生长情况进行调查,发现ZT浓度的提高,有利于枝条发生数的增加,但细枝条增多,ZT浓度降低时,表现出枝条较为粗壮,叶色绿,所以牛皮杜鹃继代增殖培养过程中以附加1-3mg/L ZT较为合理。(5)试管内生根:通过对生根率和根数进行综合调查,可以得出,牛皮杜鹃最佳生根培养基配方为:WPM(培养基)+IBA 0.5mg/L+NAA 2.0mg/L+AC 1.0g/L。(6)炼苗移栽基质以泥炭土效果最好,移栽存活率可达78%。对野生牛皮杜鹃的根、茎、叶、花、果实、种子进行解剖结构观察研究,结果表明:(1)牛皮杜鹃根的结构多为次生结构,由次生维管组织和周皮两部分组成。(2)牛皮杜鹃的茎由表皮、皮层、维管柱三部分构成,皮层内分布着大量染色较深的异细胞。茎的表皮厚度、皮层厚度、韧皮部厚度和束中形成层厚度均随着海拔的升高而逐渐变小。(3)牛皮杜鹃的叶片为叶肉组织分化明显的异面叶,其结构是由表皮、叶肉和叶脉三部分组成的,栅栏组织发达。叶片的主脉维管束直径随着海拔的升高而逐渐降低,叶片平均厚度和栅海比值则随着海拔的升高而增大。(4)牛皮杜鹃的花是两性花,由花梗、花托、花萼、花冠、雄蕊群和雌蕊群组成。花萼和花瓣均为五片;雄蕊十,由花丝和花药组成;花粉为四合花粉,呈正四面体排列,花药成熟开裂方式为孔裂;子房上位,由五心皮合生而成;心皮上端发育有花柱,花柱开放型,具纵裂的花柱道;中轴胎座,子房五室,每室胚珠数目不等。(5)牛皮杜鹃的果实为蒴果,五室,中轴胎座;种子着生于胎座周围,每室内种子数不等,成熟时由室间开裂。(6)牛皮杜鹃的种子(?)面为长圆形,由种皮、胚和胚乳构成,种皮为黄褐色,(?)纵皱纹,两端有膜质狭翅;胚属于直立型,子叶两片,细小;胚乳细胞内含有极丰富的淀粉粒。