干扰素对HL-60细胞影响的研究

论文摘要

目的 研究干扰素（interferon,IFN）对人类早幼粒白血病细胞株HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响,为干扰素治疗急性白血病提供理论依据。 方法 取对数生长期的HL-60细胞株,随机分为一个对照组A组和五个不同实验组（B、C、D、E,F,即干扰素浓度分别为500U/ml、1000U/ml、2000U/ml、5000U/ml、10000U/ml）,培养48小时。采用MTT法检测HL-60细胞增殖性;Wright染色观察细胞的形态变化;单克隆抗体间接免疫荧光法测细胞表面标志CD13阳性率;吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）染色观察细胞凋亡。 结果1、当干扰素浓度为500U/ml时,MTT实验OD值与对照组无差异（P>0.05）。当干扰素浓度为1000U/ml时,OD值与对照组有差异（P<0.05）。当干扰素浓度为2000U/ml以上时,OD值与对照组有显著差异（P<0.01）,随浓度增加OD值降低。 2、Wright染色涂片发现,干扰素浓度为500U/ml时,细胞形态无改变。干扰素浓度为1000U/ml时细胞开始出现形态上的变化,在2000U/ml以上时明显,细胞核明显缩小,核仁消失,胞浆由少变多,核浆比缩小,核偏于一侧,有凹陷,分叶明显。 3、单克隆抗体免疫荧光法观察本组实验细胞表面标志CD13,不同浓度的干扰素作用48h后,500U/ml、1000U/ml、2000U/ml、5000U/ml、10000U/ml的干扰素组,CD13阳性细胞的表达率分别为61%、46%、39%、32%、29%,对照组为65%。浓度在1000U/ml以上时与对照组有差异（P<0.05）。 4、AO/EB染色计数100个细胞,500U/ml、1000U/ml、2000U/ml、5000U/ml、10000U/ml组阳性细胞数分别为50%、56%、59%、65%、71%,对照组为28%。浓度5000U/ml以上时,以晚期凋亡细胞为主;低于该浓度时,早期凋亡细胞为主。 结论 干扰素抑制HL-60细胞增殖,诱导HL-60细胞分化,同时可引起HL-60细胞凋亡。

论文目录

• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料、试剂和仪器
• 1.1.1 细胞
• 1.1.2 主要试剂
• 1.1.3 主要仪器设备
• 1.1.4 主要试剂的制备
• 1.2 实验方法及步骤
• 1.2.1 细胞培养
• 1.2.2 实验分组
• 1.2.3 细胞形态学观察
• 1.2.4 IFNα-2b对HL-60细胞增殖的作用-MTT法
• 1.2.5 IFNα-2b对HL-60细胞分化的作用-单克隆抗体间接免疫荧光法
• 1.2.6 IFNα-2b对HL-60细胞凋亡的影响
• 1.3 统计学处理
• 第二章 结果
• 1.1 干扰素对HL-60细胞的生长抑制影响
• 1.2 干扰素对HL-60细胞的诱导分化作用
• 1.3 干扰素对HL-60细胞凋亡的影响
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 附录
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明
• 综述