论文摘要
目的:通过研究沙利度胺对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLS）及外周血单个核细胞（PBMCs）的抑制作用,初步探讨沙利度胺治疗RA的可能机制,了解沙利度胺体外作用的最低浓度,为临床应用小剂量沙利度胺治疗RA提供实验依据,同时,观察小剂量沙利度胺治疗RA的临床疗效及安全性。方法:1.沙利度胺对类风湿关节炎作用的实验研究:分离RA患者FLS进行体外培养,MTT法检测不同浓度沙利度胺（0μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml）对FLS增殖的影响,ELISA法检测不同浓度沙利度胺（0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）对RA FLS分泌VEGF及TNF-α的影响。分离RA患者的PBMC加入不同浓度沙利度胺（0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）处理后,ELISA法检测沙利度胺对RA PBMCs分泌VEGF及TNF-α的影响。2.小剂量沙利度胺治疗类风湿关节炎的临床观察:将100例活动期RA患者随机分为对照组、治疗组A组、治疗组B组和治疗组C组,对照组予甲氨喋呤（MTX）10mg/w口服,来氟米特20mg/d口服,治疗组A组在对照组基础上加服沙利度胺50mg/d,治疗组B组在对照组基础上加服沙利度胺75mg/d,治疗组C组在对照组基础上加服沙利度胺100mg/d。分别于用药前及用药第6、12、18周记录各项观察指标,评估治疗效果,并对治疗过程中出现的不良反应进行比较。结果:1、沙利度胺在50～500μg/ml浓度范围内对RA FLS增殖有抑制作用（P<0.05）,呈剂量、时间依赖关系。2、沙利度胺在50～200μg/ml浓度范围内呈剂量、时间依赖性抑制RA FLS分泌VEGF及TNF-α（P<0.05）。3、沙利度胺在50～200μg/ml浓度范围内对RA PBMCs分泌VEGF及TNF-α均有抑制作用（P<0.05）,且呈剂量、时间依赖关系。4、治疗18周结束后共有77例完成试验,其中对照组23例,治疗组A组24例,治疗组B组22例,治疗组C组8例。将对照组、治疗组A组、治疗组B组完成实验者纳入疗效评估,治疗组C组因大多数患者不能耐受药物不良反应,完成试验病例数较少未纳入疗效评估,但纳入不良反应统计。5、治疗第6周、第12周、第18周分别对三组DAS28评分进行比较,差别均无统计学意义（P>0.05）;治疗第12周、第18周治疗组B组ESR、CRP水平较其余两组显著下降（P<0.05）。6、治疗18周后,对照组、治疗组A组与治疗组B组总有效率分别为78.3%、79.2%和86.4%,以治疗组B组有效率最高,但三组差异无统计学意义（P>0.05）。7、治疗过程中,对照组发生不良反应3例（13.0%）,治疗组A组发生不良反应4例（16.7%）,治疗组B组发生不良反应6例（25.0%）,三组比较,差别无统计学意义（P>0.05）。治疗组C组发生不良反应19例（79.2%）,明显高于其余三组,差别均有统计学意义（P<0.05）。结论:1、沙利度胺治疗RA作用机理可能与其抑制RA患者FLS的增殖,抑制FLS及PBMCs分泌VEGF、TNF-α,减少新生血管的形成、抑制炎症反应有关,且沙利度胺在体外较低浓度即起抑制作用,提示小剂量临床应用对RA治疗可能有一定疗效。2、在甲氨喋呤及来氟米特治疗基础上加用小剂量沙利度胺能够明显改善RA患者的实验室指标,控制炎症反应,并有增加疗效的趋势。3、小剂量沙利度胺治疗RA安全、耐受性较好,值得临床推广。4、小剂量沙利度胺治疗RA的长期疗效及安全性需要扩大样本量、延长观察时间进一步研究证实。