木霉颗粒剂ST-6的研制及其应用研究

论文摘要

木霉是重要的生防菌,在植物病害生物防治中具有重要的应用价值。本文针对西瓜、茄子、白术等浙江省重要经济作物的土传病害,开展了木霉菌的筛选,获得对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病病菌高效拮抗的目标菌株T-6,并进行了该菌的生物学特性、种类鉴定、固体培养条件等研究,研制出木霉颗粒菌剂ST-6,并对其田间应用技术和效果进行初步评价。主要研究结果如下:（1）木霉菌的分离筛选:用诱捕法分离160个土样中,有68份土样分离出木霉,共获得木霉菌株98个。我们从中选取有代表性木霉菌株13个,并与西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子和西兰花菌核病病菌进行离体拮抗作用测定,筛选出最有效的目标菌株T-6。对峙培养结果表明木霉菌T-6对白术白绢病菌、西兰花菌核病、西瓜枯萎病、茄子菌核病菌有很好的抑制作用。（2）对木霉菌T-6的生物学特性进行的研究,并进行种类鉴定。明确了木霉菌T-6的菌丝生长和孢子萌发最适温度为30℃;菌丝生长最适培养基为PDA;产孢最适培养基为OMA、偏酸条件下有利于该菌的生长和孢子的产生和萌发;明确其对不同碳源、氮源的利用情况。木霉菌T-6经鉴定为哈茨木霉（T.harzianumRifai）。（3）木霉生防颗粒菌剂ST-6的生产工艺的研究。经比较试验,选用直径0.2-0.4mm的碎米作为木霉ST-6固体培养载体,加水至含水量40-50%,灭菌后添加0.2%蔗糖、0.2%硝酸铵、0.1%KH2PO4,4%接种量接种,在65-90%湿度、变温（28℃～24℃～26℃）条件下发酵培养7-8天,待菌丝及孢子布满固体培养载体后,以0.1%粘结剂D或0.4%粘结剂A作用粘结剂,米糠粉或麸皮粉作为包衣粉均匀吸附与固体培养载体外面,包衣后摊开,用常温气流风干后包装即成产品。（4）木霉生防颗粒菌剂ST-6的保质期及常用杀菌剂对其的影响。经测定木霉生防颗粒菌剂ST-6可在干燥、避光的室内自然常温下贮存16个月以上。测定了多菌灵等6种常用杀菌剂对木霉T-6和颗粒剂ST-6的影响。结果表明多菌灵、使百克对木霉T-6抑制作用较强,Ec50分别为0.2521 mg·kg-1和0.03948mg·kg-1,福美双对木霉T-6影响较小,甲霜灵-锰锌对木霉没有影响。不同杀菌剂对木霉生防颗粒剂ST-6抑制作用不同。其中多菌灵、甲基托布津、使百克3天后对ST-6萌发率和孢子产生量影响较大,但7天后对ST-6孢子产生量影响不是很大,而万霉灵、甲霜灵-锰锌、福美双对ST-6萌发率和孢子产生量基木无影响。（5）木霉生防颗粒菌剂ST-6的应用效果。测定了木霉生防颗粒菌剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病等病害的防治技术和防治效果,木霉颗粒剂ST-6 3g/株对西瓜枯萎病的、白术白绢病、茄子菌核病的小区防治效果分达73.62%、77.05%、69.39%,大田试验对西瓜枯萎病的、白术白绢病,茄子菌核病防治效果分别达72.96%、67.49%、70.12%,增产分别达到7.89%、5.07%、2.98%。（6）木霉生防颗粒菌剂ST-6对作物的安全性和生长、产量的影响。施用该颗粒菌剂对西瓜、黄瓜、甜瓜、番茄、茄子、白术六种作物安全,并能使植株粗壮,病害发生减轻,产量增加3～15%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 木霉对植物病原真菌的拮抗机制
• 1.1 竞争作用
• 1.2 抗生作用
• 1.3 重寄生作用
• 1.4 诱导抗性
• 1.5 协同拮抗作用
• 2 木霉对植物病害的防治作用
• 2.1 木霉菌在土壤中的应用
• 2.1.1 土壤处理
• 2.1.2 沾根或灌根
• 2.1.3 种子处理
• 2.2 木霉菌对植物叶、果病害的防治
• 2.3 木霉与杀菌剂结合使用的防治作用
• 2.4 木霉菌对植物生长的促进作用
• 3 木霉菌生防制剂的研究
• 4 浙江省经济作物土传病害的发生与防治现状
• 4.1 西瓜枯萎病
• 4.2 白术白绢病和根腐病
• 4.3 茄子菌核病和西兰花菌核病
• 5 研究的目的和意义
• 第二章 高效拮抗木霉T-6的分离、鉴定及其生物学特性研究
• 1 材料与方法
• 1.1 高效拮抗木霉的分离、筛选及其鉴定
• 1.1.1 土样的采集
• 1.1.2 木霉的分离与纯化
• 1.1.3 木霉的筛选
• 1.2 木霉生防菌T-6的生物学特性
• 1.2.1 不同培养基对T-6菌株菌丝生长及分生孢子形成的影响
• 1.2.2 不同pH对T-6菌株菌丝生长及分生孢子形成的影响
• 1.2.3 不同pH对分生孢子萌发的影响
• 1.2.4 不同温度对菌丝生长及分生孢子形成的影响
• 1.2.5 不同温度对分生孢子萌发的影响
• 1.2.6 木霉菌T-6对碳源、氮源的利用
• 1.3 木霉生防菌T-6对病原真菌的拮抗作用研究
• 1.3.1 供试菌株
• 1.3.2 木霉生防菌T-6对西瓜枯萎病菌、白术白绢病菌、茄子菌核病菌、西兰花菌核病的拮抗作用
• 1.4 高效拮抗木霉的鉴定
• 2 结果与分析
• 2.1.高效拮抗木霉的分离和筛选
• 2.1.1 木霉菌株的诱捕和初筛
• 2.1.2 平皿对峙培养及拮抗菌株的初筛选
• 2.2 木霉生防菌ST-6的生物学特性
• 2.2.1 不同培养基菌落及分生孢子形成的影响
• 2.2.2 不同pH值对菌丝生长,分生孢子形成及其萌发的影响
• 2.2.3 不同温度对菌丝生长、分生孢子形成及其萌发的影响
• 2.2.4 不同碳源、氮源刘菌丝生长、分生孢子形成的影响
• 2.3 高效拮抗木霉T-6的鉴定
• 2.4 木霉菌T-6菌株对西瓜枯萎病菌、白术白绢病菌、茄子菌核病菌、西兰花菌核病菌的拮抗作用
• 2.4.1 拮抗作用机制的显微观察
• 2.4.2 对白绢病菌菌核的重寄生作用
• 3、结论
• 第三章 木霉颗粒剂ST-6的制备及其生产工艺研究
• 1 材料与方法
• 1.1 孢子量测定
• 1.2 木霉T-6菌株固体培养基的筛选
• 1.3 培养基含水量对碎米固体培养基颗粒成型的影响
• 1.4 碎米固体培养基固体发酵条件的研究
• 1.4.1 外加碳源对产孢量影响
• 1.4.2 外加氮源对产孢量影响
• 1.4.3 磷酸盐对产孢量影响
• 1.4.5 最佳接种量
• 1.4.6 温度对木霉产孢量的影响
• 1.4.7 装料量对木霉产孢量的影响
• 1.4.8 培养时间对木霉生长和产孢量的影响
• 1.5 木霉颗粒剂ST-6粘结剂和包衣粉的筛选与制备
• 1.5.1 粘结剂的筛选
• 1.5.2 不同粘结剂颗粒发酵载体的影响
• 1.5.3 不同包衣粉颗粒发酵载体的影响
• 1.6 木霉颗粒剂ST-6的研制生产工艺
• 1.7 木霉颗粒剂ST-6保质期测定
• 2、结果与分析
• 2.1 固体培养基的筛选
• 2.2 培养基含水量对碎米（直径0.2—0.4MM）固体培养基颗粒成型和产孢量的影响
• 2.3 碎米（直径0.2—0.4MM）固休培养基固体发酵条件的研究
• 2.3.1 外加碳源对产孢量影响
• 2.3.2 外加氮源对产孢量影响
• 2.3.3 磷酸盐对产孢量影响
• 2.3.4 最佳接种量
• 2.3.5 最佳温度
• 2.3.6 装料量对木霉产孢量的影响
• 2.3.7 培养时间对木霉菌丝生长和产孢量的影响
• 2.4 木霉颗粒剂ST-6粘结剂和包衣粉的筛选与制备
• 2.4.1 粘结剂的制备
• 2.4.2 不同粘结剂对固体培养基菌丝、孢子的影响
• 2.4.3 不同包衣剂对固体培养基菌丝、孢子的影响
• 2.5 木霉颗粒剂ST-6的生产工艺流程
• 2.6 木霉生防菌颗粒ST-6保质期测定分析
• 3、结论
• 第四章 木霉颗粒剂ST-6的应用技术与效果研究
• 1 材料与方法
• 1.1 六种杀菌剂对木霉生防菌T-6和颗粒菌剂ST-6的影响
• 1.2 颗粒剂ST-6田间施用方法及其防治效果
• 1.2.1 颗粒剂ST-6的田间施用方法
• 1.2.2 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病盆栽防治效果
• 1.2.3 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病小区防治效果
• 1.2.4 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病大田防治效果
• 1.3 颗粒剂ST-6对作物的安全性及增产作用
• 1.3.1 颗粒剂ST-6对作物安全性的测定
• 1.3.2 颗粒剂ST-6对作物促生长及产量的影响
• 2、结果与分析
• 2.1 杀菌剂对木霉生防菌ST-6和颗粒剂ST-6的影响
• 2.1.1 不同杀菌剂对木霉生防菌ST-6的影响
• 2.1.2 不同杀菌剂对木霉生防颗粒剂ST-6的影响
• 2.2 颗粒剂ST-6田间施用方法及其防治效果
• 2.2.1 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病盆栽防治效果
• 2.2.2 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病小区防治效果
• 2.2.3 颗粒剂ST-6对西瓜枯萎病、白术白绢病、茄子菌核病大田防治效果
• 2.3 颗粒剂ST-6对作物安全性
• 2.4 颗粒剂ST-6对作物促生长及产量的影响
• 三、结论
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表研究论文和获得的成果