论文摘要
心血管疾病泛指以心脏和血管异常为主的一组循环系统疾病,是危害人体健康最严重的疾病之一,在发达国家中列首位死因。自由基普遍存在于生物体内,是生命活动过程中的正常产物,但高浓度的自由基对人体和其它有机体有显著的损伤作用。目前,国内外研究表明人类的衰老及疾病如心血管疾病、糖尿病等都与自由基及氧化相关。硝苯地平是治疗心血管疾病的常用药物,在降低外周血管阻力、血压和心肌耗氧量的同时,还能扩张冠状动脉,缓解痉挛,增加供氧量,特别适用于变异型心绞痛和冠状动脉痉挛所致心绞痛的治疗,其临床疗效已充分肯定。但硝苯地平对人体的药物作用机制是否与清除体内自由基有关,是否具有抗氧化活性目前尚未见报导,本研究通过建立多种体外模型,检测硝苯地平清除自由基的能力及对正常大鼠体内抗氧化能力的影响,柬探讨硝苯地平的抗氧化活性。寻找一类既能降低血压,又能防止机体内过氧化损伤的药物将有益于延缓原发性高血压及其并发症的发展和改善患者的预后。目的：研究硝苯地平体外抗自由基作用及对大鼠抗氧化能力的影响,来探讨硝苯地平的抗氧化活性,为其在临床上新的药用途径提供依据。方法：体外实验：采用ABTS法和DPPH法测定硝苯地平捕获ABTS-和DPPH的能力；采用TRAP法衡量硝苯地平对AAPH引发的人血红细胞溶血的保护作用；采用H2O2诱导法测定硝苯地平对H2O2诱导的红细胞溶血的抑制作用：采用邻苯三酚自氧化法测定硝苯地平对超氧阴离子的清除作用。动物实验：采用分光光度法分别测定给药第7d、14d、21 d、28 d时大鼠血清及第28d肝组织匀浆中CAT、SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化,与对照组比较,研究硝苯地平对体内抗氧化酶活性的影响结果：体外实验结果：（1）硝苯地平对ABTS+的清除效果一般（IC50=240μM）,明显弱于Trolox （IC50=11.8μM）、Vc （IC50=8.73nM）;对DPPH的清除效果较弱（IC50=700μM）,明显弱于Trolox （IC50=15.7μM）、Vc（IC50=11.78μM）。（2）硝苯地平对AAPH诱导的红细胞溶血有显著的抑制作用,且存在明显的量效关系,浓度越高,抑制作用则越强,溶血滞后时间越长。（3）采用邻苯三酚自氧化法测定硝苯地平在体系中对自由基的清除作用,来衡量其抗氧化活性,表明硝苯地平为一种良好的超氧阴离子自由基清除剂。（4）H2O2诱导红细胞溶血实验结果显示相同浓度条件下硝苯地平对红细胞溶血的抑制率可达83.52%,高于标准抗氧化剂Vc说明硝苯地平具有很强的清除H2O2的能力。动物实验结果：（1）与对照组比较硝苯地平组大鼠血清CAT活性,在4个时间点的数值均高于对照组,但前21d没有明确的增减趋势,在第28d,CAT活力明显升高（P<0.01）。（2）硝苯地平组大鼠血清SOD活性与对照组相比无显著性差异。（3）与对照组比较,硝苯地平组大鼠血清GSH-Px活性,第7d和第28d硝苯地平组大鼠血清中的GSH-Px活性显著增高（P<0.01）,且第14d、21d、28d GSH-Px活性值与第7d的数值相比,有随着给药时间的延长各组GSH-Px值略有增高的趋势。（4）除第7d外,硝苯地平组大鼠血清中MDA含量均低于对照组。第21d,硝苯地平组MDA含量降低（P<0.05）,随着给药时间的延长,第28d, MDA含量明显降低（P<0.01）。（5）与对照组比较,硝苯地平组大鼠肝组织匀浆中SOD、和GSH-Px的活性明显升高（P<0.01）,MDA含量降低（P<0.05）,CAT活性无显著性差异（P>0.05）。结论：（1）硝苯地平清除ABTS-和DPPH·的能力明显弱于标准抗氧化剂Trolox、Vc,表明相对于标准抗氧化剂,硝苯地平只是一种温和的自由基清除剂。（2）硝苯地平对AAPH诱导的红细胞溶血有显著的抑制作用,说明硝苯地平可有效的抑制自由基引发的脂质过氧化。（3）硝苯地平对超氧阴离子自由基的清除能力强于Trolox,但弱于Vc;（4）硝苯地平对H2O2诱导的红细胞溶血有显著的抑制作用,强于Vc,且存在明显的量效关系,浓度越高,抑制作用则越强。（5）硝苯地平可显著增强大鼠血清中CAT、GSH-Px活性,降低MDA含量,及提高肝组织匀浆中SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量,显示出其具有增强体内抗氧化酶活性的功能。