论文摘要
硫酸锌(ZnSO4·7H2O)俗称皓矾,在医疗上用作收敛剂。在基础医学的研究领域中,硫酸锌主要作为诱导剂。如目前已阐明的对金属硫蛋白(MT)表达的调控。目的:探讨角朊细胞分离培养的方法;硫酸锌拮抗B段紫外线损伤效应的探讨。方法:取大鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶联合消化的方法获得单个细胞,通过贴壁和消化时间控制得到高纯度的角朊细胞。待细胞达到90%融合时,加入硫酸锌进行诱导后,用UVB进行照射,观察在体外培养条件下硫酸锌对UVB损伤作用的影响。结果:1.分离获得了高纯度贴壁生长的KC。细胞传代稳定,在体外连续传代培养3代,未发生形态学改变。2.传代KC(P2)后以0.001%硫酸锌诱导培养,然后用UVB进行照射,观察实验组和对照组差异进行抗氧化酶(SOD、GSH、GSH-px)和氧化损伤指标(MDA、OH-、O-2)的变化,结果显示两组差异性显著.结论:1.本实验通过对大鼠表皮KC进行分离、培养、纯化及体外扩增,并同时从细胞形态和生物学特性等方面进行观察和检测,联合应用中性蛋白酶和胰酶,分别采用贴壁培养法和组织块培养法,严格控制消化时间,可以获得纯度和活性较高的KC。2.硫酸锌诱导的KC具有保护性,同时可以拮抗UVB引起的氧化损伤。然而这种保护作用的机制还有待于进一步探讨。