消瘤汤治疗原发性肝癌的临床及实验研究

论文摘要

本课题从临床观察、动物体内抑瘤、体外实验（对人肝癌Bel-7402细胞增殖的影响MTT法、光镜下细胞形态观察）等三个方面对消瘤汤进行研究，旨在通过临床系统观察消瘤汤的临床抑瘤效果及其对原发性肝癌病人的生化指标的影响和对临床症状的改善情况；通过动物实验进一步研究消瘤汤对动物移植性肿瘤的抑瘤效果及药物血清对肝癌肿瘤细胞的抑制作用；结合临床观察和动物实验来初步探讨消瘤汤对肝癌肿瘤的抑制作用及其机理。临床观察的研究，收集2005年9月-2006年8月于华中科技大学同济医学院附属协和医院中医内科门诊及住院部就诊患者。选择符合2001年9月第八届全国肝癌学术会议正式通过的“原发性肝癌的临床诊断与分期标准”患者，依剔除标准筛选后，按门诊就诊及住院号码先后顺序，随机将55例患者分为消瘤汤煎剂400m1分次口服治疗组30例，5-氟尿嘧啶500mg加入5％Glucose 500ml内静脉滴注对照组25例。以临床症状（肝区疼痛、腹胀、纳差、乏力）的改善、AFP稳定率、AST、ALT、γ-GT有效率、瘤体稳定率、毒副作用、血常规为观察指标。结果表明，临床对比用药治疗3个月，治疗组较对照组在肝区疼痛、腹胀、纳差、乏力等临床症状缓解方面疗效显著（P＜0.01）；治疗组AFP稳定率（稳定％+下降％）为33133％，对照组AFP稳定率（稳定％+下降％）为30.43％，治疗组较对照组AFP在30～400μg／L范围及AFP＞400μg／L范围，两组间比较没有显著性差异（P＞0.05）；治疗组AST、ALT、γ-GT有效率（正常％+好转％）分别是35.71％、35.71％、20.69％，对照组AST、ALT、γ-GT有效率（正常％+好转％）分别是34.78％、40.91％、20.83％，治疗组较对照组AST、ALT、γ-GT治疗有效率没有显著性差异（P＞0.05）；治疗组瘤体稳定率（CR％+PR％+NC％）为13.3％，对照组瘤体稳定率（CR％+PR％+NC％）为16.0％，两组没有差异（P＞0.05）；治疗组未出现毒副作用，相反对患者的临床症状有明显的改善。而对照组25例患者都出现了不同程度的化疗毒副作用，如恶心、呕吐、腹泻、骨髓抑制等，其中白细胞减少者20例。提示消瘤汤可抑制部分患者肝细胞恶变，使肝细胞恶变后肝脏重获的合成胚胎蛋白的功能减弱或停滞，使增高的AFP趋于稳定或下降，瘤体增长被限制；减轻肝细胞受损程度，使AST、ALT活力下降，部分患者肝功能慢性损伤得到控制；能明显改善原发性肝癌患者的临床症状，提高患者生存质量，延长患者生命。动物体内抑瘤研究，采用直接接种荷瘤（S180腹水瘤）于小鼠皮下，制作肿瘤小鼠模型，随机分成5组，消瘤汤高剂量组、消瘤汤中剂量组、消瘤汤低剂量组、5-氟尿嘧啶组、生理盐水组，给药疗程14天。以处死后剥离的瘤体重量为观察指标。结果表明，消瘤汤中剂量组和5-氟尿嘧啶组较生理盐水组抑瘤效果明显增高（P＜0.05，P＜0.01）；5-氟尿嘧啶组较消瘤汤低剂量组抑瘤效果明显增高（P＜0.01）；消瘤汤高、低剂量与生理盐水组比较抑瘤效果无显著性差异（P＞0.05）；5-氟尿嘧啶组与消瘤汤高、中剂量比较抑瘤效果无显著性差异（P＞0.05）。提示消瘤汤可抑制瘤体的增长，疗效可能与药物浓度剂量有关。体外实验研究（对人肝癌Bel-7402细胞增殖的影响MTT法、光镜下细胞形态观察），采用SD大鼠连续给药10天制备大鼠含药血清，随机分成5组，消瘤汤高剂量组、消瘤汤中剂量组、消瘤汤低剂量组、5-氟尿嘧啶组、生理盐水组，干预时间96小时。以细胞生长抑制率、各组细胞形态观察为观察指标。结果表明，对人肝癌Bel-7402细胞增殖的影响MTT法：12.5％药物浓度加药96小时，消瘤汤高、中、低剂量组、5-氟尿嘧啶组较生理盐水组细胞生长抑制率明显增高（P＜0.01）；消瘤汤高、中剂量组与5-氟尿嘧啶组比较抑制率没有显著性差异（P＞0.05）；消瘤汤低剂量组较5-氟尿嘧啶组抑制率明显增高（P＜0.05）。25％药物浓度加药96小时，消瘤汤高、中剂量组、5-氟尿嘧啶组较生理盐水组细胞生长抑制率明显增高（P＜0.01）；消瘤汤低剂量组较生理盐水组抑制率明显增高（P＜0.05）；消瘤汤高、中、低剂量组与5-氟尿嘧啶组比较抑制率没有显著性差异（P＞0.05）。50％药物浓度加药96小时，消瘤汤高剂量组、5-氟尿嘧啶组较生理盐水组细胞生长抑制率明显增高（P＜0.01）；消瘤汤低剂量组较生理盐水抑制率也明显增高（P＜0.05）；消瘤汤中剂量组与生理盐水组抑制率无明显差异（P＞0.05）；消瘤汤高、低剂量组与5-氟尿嘧啶组比较抑制率没有显著性差异（P＞0.05）；5-氟尿嘧啶组较消瘤汤中剂量组抑制率明显增高（P＜0.05）。光镜下细胞形态观察：各浓度药物血清组均可见细胞形态不圆整，细胞核固缩，核膜破损，细胞膜结构损伤，细胞核裂解，且有凋亡小体出现，呈现明显的细胞凋亡形态，各浓度药物血清组均出现凋亡细胞；阳性对照组同样也出现明显的凋亡形态；空白对照组细胞则形态完整，核质分布均匀，无凋亡形态出现。提示消瘤汤能明显抑制人肝癌Bel-7402细胞的增殖，而且可以诱导肿瘤细胞的凋亡，其作用可能与药物浓度剂量有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略语
• 前言
• 第1章 临床研究
• 1.1 病例来源
• 1.2 研究方法
• 1.2.1 诊疗标准
• 1.2.2 资料与方法
• 1.3 结果
• 第2章 实验室研究
• 1 研究方案
• 2 研究方法
• 2.1 小鼠荷瘤（S180腹水瘤）实验
• 2.1.1 材料与方法
• 2.1.2 结果
• 2.2 体外抑瘤实验
• 2.2.1 消瘤汤对肝癌细胞 Bel-7402增殖的影响（MTT法）
• 2.2.1.1 材料与方法
• 2.2.1.2 结果
• 2.2.2 形态学检查（光学显微镜观察）
• 2.2.2.1 材料与方法
• 2.2.2.2 结果
• 第3章 讨论
• 3.1 立题依据
• 3.2 中医对肿瘤和肝癌的认识及近况
• 3.3 消瘤汤的处方论证
• 3.4 消瘤汤对临床病人的影响
• 3.5 消瘤汤对荷瘤（S180腹水瘤的）小鼠影响
• 3.6 消瘤汤对肝癌 Bel-7402细胞增殖的影响
• 第4章 结论
• 4.1 病机特点
• 4.2 组方特点
• 4.3 本研究证明
• 4.4 作用机理之一
• 4.5 作用机理之二
• 4.6 作用机理之三
• 4.7 本实验采用临床观察和实验室研究两种方法
• 参考文献
• 第5章 中西医结合治疗原发性肝癌进展概况（综述）
• 5.1 中医证型频次规律
• 5.2 治则及单味用药频次
• 5.3 临床治疗
• 5.4 实验室研究
• 参考文献
• 第6章 展望
• 附正常值
• 致谢