斑马鱼发育调控基因DRG1和DRG2的克隆、表达谱分析及功能研究

论文题目: 斑马鱼发育调控基因DRG1和DRG2的克隆、表达谱分析及功能研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 遗传学

作者: 魏东旺

导师: 薛京伦,姚纪花

关键词: 斑马鱼,发育调控蛋白,整胚原位杂交,过量表达

文献来源: 复旦大学

发表年度: 2005

论文摘要: (一) G蛋白是一类由许多调控分子组成的大家族,至少包括3个亚家族:异源三聚体G蛋白,如transducin,分子量较大;单聚体G蛋白,如Ras,分子量较小;以及参与蛋白合成的GTPase,如EF-Tu。G蛋白都可以结合GTP和GDP分子,在结合GTP后成为活性形式,参与细胞内许多重要的事件,如细胞骨架重排(Rho),蛋白翻译(EF-Tu),有丝分裂(Ras),受体介导的通讯(heterotrimetric G蛋白)等。发育调控蛋白DRG(Developmentally regulated GTP-binding protein)是近来发现的一类G蛋白,已经在许多物种中被克隆出来。它们均具有5个重要结构域G1-G5参与结合GTP,此外与其它G蛋白没有明显的相似之处。DRG在动物中的表达模式呈多样化,果蝇DRG在成体组织、胚胎和培养的细胞中表达水平基本相同。在爪蟾中,胚胎早期的DRG表达量较高,并且在脑中的表达明显高于其它器官组织。小鼠DRG mRNA在脑的含量也较高,而在心脏中没有表达,这表明DRG可能在脊椎动物中枢神经系统的发育中起作用。DRG的功能具体功能仍不清楚,但它们的高度保守性表明在细胞生长和分化中起着关键的作用。 在本文中,我们首先克隆了DRG1和DRG2基因的全序列,证实斑马鱼基因组也存在两个DRG同源基因。通过整胚原位杂交和RT-PCR技术来研究DRG1和DRG2在斑马鱼胚胎中的表达模式,DRG1和DRG2基因的表达模式极为相似,均为普遍性表达,从卵裂期开始,在囊胚期(30%epiboly)和体节期(10-somite)均有表达,一直持续到24小时以后。但在24小时之后,表达较为集中在眼睛、脑和躯干上,而在心、肾、肝等器官组织中未观察到表达。表明斑马鱼DRG可能在眼睛和脑的发育中起重要作用。通过RT-PCR初步显示,斑马鱼胚胎在发育到24h之前,DRG1和DRG2随着胚胎发育表达量逐渐增加。

论文目录:

摘要

Abstraet

缩写词

第一部分 DRG1和 DRGZ的克隆及表达谱分析

前言

材料与方法

结果与讨论

小结

参考文献

第二部分 DRG1的功能研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述

论文发表情况

致谢

发布时间: 2005-09-19

参考文献

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