黑灵芝元素形态、活性成分及其保健功能研究

论文摘要

灵芝为担子菌纲、多孔菌科（Polyporaceae）灵芝属（Ganoderma）真菌灵芝（Glucidum）和紫芝（Gjaponicum）的总称，作为药物已有悠久历史。随着人们对灵芝化学成分及其药理作用的深入研究，证实灵芝具有多种有效成分和广泛的生物学作用，对人类神经系统、呼吸系统、内分泌及代谢系统、心血管系统均有一定功效，还能提高机体免疫力、保肝解毒、降血糖、抗肿瘤、抗衰老，在医药临床、保健食品、化妆品等领域得到广泛应用。但国内外研究过的灵芝属真菌仅有赤芝（Glucidum）、紫芝（Gjaponicum）、树舌（Gapplanatum）、薄盖灵芝（Gcapense）、南方灵芝（Gaustrole）等5种，其中研究最多的是赤芝。迄今为止，尚未见有对黑灵芝进行系统研究的公开报道。 黑灵芝被称为灵芝中的极品，对人体保健具有的药用疗效，远比其它种类的灵芝为高。黑灵芝主要对肾脏机能有益，增强免疫功能，安眠醒脑，长期食用可调节体内多种机能，从而提高机体的整体素质和健康水平。为深入研究和开发黑灵芝资源，本文采用现代分离分析方法和生物技术手段，对江西赣州产黑灵芝进行了较为系统的研究，建立了一整套灵芝活性成分与功能实验的系统研究方法，所得结果可为黑灵芝高附加值产品的研究奠定相关理论和应用基础。现将主要研究结果归纳如下。 1．采用现代元素分析方法研究了黑灵芝中微量元素的含量及其溶出特性，比较了黑灵芝子实体及孢子粉、赤灵芝子实体及野生黑灵芝子实体中的元素含量，利用微波消解、ICP-MS同时测定了黑灵芝子实体和初步纯化多糖中微量元素及稀土元素的含量及形态分布。结果表明，黑灵芝子实体及孢子粉中Cu、Mn、Fe、Zn等元素的含量均高于赤灵芝子实体；黑灵芝酸性多糖中的微量元素及稀土元素的含量大多高于中性多糖；在江西黑灵芝及其多糖中含有痕量稀土元素Ce、Nd、Pr、Y。对黑灵芝样品元素测定的回收率在88.2％～110.6％。研究还发现，黑灵芝中微量元素在不同极性溶剂中具有不同的浸出率，绝大多数元素的溶出率随着溶剂极性增大而增大。初级形态分析参数计算结果表明，Cr、Co、Cd元素的浸出率最低，Zn、Fe、Cu和Mn的浸出率较高，Pb的浸出率最高，说明Pb比较容易溶出。大多数元素的头煎提取率T1＞二煎提取率T2，但T2值仍

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语注释
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 灵芝的国内外研究概况
• 1.2.1 灵芝的分类与分布
• 1.2.2 主要化学成分
• 1.2.2.1 三萜类
• 1.2.2.2 灵芝多糖
• 1.2.2.3 无机元素
• 1.2.2.4 其他化学成分
• 1.3 灵芝的生理活性研究
• 1.3.1 灵芝的药理功能
• 1.3.2 灵芝的临床应用研究
• 1.4 灵芝产品的开发与应用前景
• 1.4.1 灵芝产品
• 1.4.2 灵芝的开发前景
• 1.5 本文研究的主要内容、创新点和科学意义
• 1.5.1 主要研究内容
• 1.5.2 主要创新之处和科学意义
• 第二章 黑灵芝中元素的形态分析
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 材料与试剂
• 2.2.2 仪器设备
• 2.2.3 实验方法
• 2.2.3.1 悬浮态和可溶态的分离与测定
• 2.2.3.2 无机态和有机态的分离与测定
• 2.2.3.3 有效成分的提取（灵芝酸性多糖、中性多糖）
• 2.2.3.4 不同极性溶剂的浸出方法
• 2.2.3.5 微波消解方法
• 2.2.3.6 等离子体质谱仪（ICP-MS）测定条件
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 黑灵芝中元素的形态分析
• 2.3.1.1 方法学评价
• 2.3.1.2 标准曲线和检测限
• 2.3.1.3 黑灵芝元素总量的测定
• 2.3.1.4 不同品种灵芝中元素的含量
• 2.3.1.5 不同极性溶剂中微量元素的浸出率
• 2.3.1.6 水提液中微量元素的形态分析结果
• 2.3.1.7 各种微量元素的初级形态分析参数
• 2.3.1.8 黑灵芝多糖的提取及多糖中微量元素测定
• 2.3.2 黑灵芝中痕量稀土元素的形态分析
• 2.3.2.1 标准曲线和检测限
• 2.3.2.2 方法的准确度及标准样品分析
• 2.3.2.3 黑灵芝子实体及黑灵芝多糖中痕量稀土元素的含量
• 2.4 本章小结
• 第三章 黑灵芝三萜化合物的定量测定-分光光度法的建立
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要仪器及试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.2.1 对照品溶液的制备
• 3.2.2.2 分析方法
• 3.2.2.3 供试样品的制备方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 测定波长的选择
• 3.3.2 酸体系的选择
• 3.3.3 正交试验设计及结果
• 3.3.4 高氯酸用量的单因素试验验证
• 3.3.5 显色稳定性试验
• 3.3.6 标准曲线的绘制
• 3.3.7 样品测定
• 3.3.8 加标回收率试验
• 3.4 本章小结
• 第四章 黑灵芝三萜类化合物提取工艺的研究
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 材料与试剂
• 4.2.2 主要仪器设备
• 4.2.3 实验方法
• 4.2.4 黑灵芝三萜类化合物的定性反应
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 提取液中黑灵芝三萜类的初步鉴定实验
• 4.3.2 室温浸泡提取黑灵芝总三萜
• 4.3.2.1 泡浸时间、固液比及提取次数与浸出率的关系
• 4.3.2.2 不同溶剂室温浸泡浸出率比较
• 4.3.3 溶剂回流提取黑灵芝总三萜的工艺条件
• 4.3.3.1 不同溶剂热回流浸出率比较
• 4.3.3.2 实验设计
• 4.3.3.3 实验结果及数据处理
• 4.3.4 超声提取黑灵芝总三萜工艺优化
• 4.3.4.1 不同溶剂超声提取结果比较
• 4.3.4.2 均匀试验设计
• 4.3.4.3 实验结果与数据处理
• 4.3.5 密闭式微波萃取黑灵芝中总三萜化合物的工艺优化
• 4.3.5.1 温度对萃取率的影响
• 4.3.5.2 萃取时间对萃取率的影响
• 4.3.5.3 固液比对萃取率的影响
• 4.3.5.4 萃取溶剂对萃取率的影响
• 4.3.5.5 溶剂浓度对萃取率的影响
• 4.3.5.6 萃取级数对浸出率的影响
• 4.3.5.7 微波萃取条件的正交试验分析
• 2萃取法用于黑灵芝三萜类化合物的研究'>4.3.6 超临界CO₂萃取法用于黑灵芝三萜类化合物的研究
• 4.3.6.1 提取液分析
• 4.3.6.2 萃取压力对萃取率的影响
• 4.3.6.3 萃取温度与萃取率的关系
• 4.3.6.4 萃取时间对萃取率的影响
• 4.3.6.5 改性剂（夹带剂）
• 4.3.6.6 黑灵芝与赤灵芝超临界萃取结果比较
• 4.3.6.7 均匀实验设计与均匀设计结果和数据处理
• 4.3.7 不同提取工艺的比较
• 4.3.7.1 溶剂回流法与超声提取法的比较
• 4.3.7.2 室温振荡法与微波萃取法的比较
• 4.3.7.3 不同提取方法的比较
• 4.4 本章小节
• 第五章 黑灵芝中麦角甾醇的分离提取、分析方法研究
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 主要仪器与设备
• 5.2.2 药材与试剂
• 5.2.3 实验方法
• 5.2.3.1 麦角甾醇标准溶液的制备
• 5.2.3.2 分析方法
• 5.2.3.3 供试样品的制备方法
• 5.2.3.4 TLC法
• 5.2.3.5 HPLC法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 麦角甾醇紫外分光光度分析方法的建立
• 5.3.1.1 测定波长的选择
• 5.3.1.2 稳定性试验
• 5.3.1.3 标准曲线的绘制
• 5.3.1.4 精密度实验
• 5.3.1.5 不同方法提取结果比较
• 5.3.1.6 酸浓度对麦角甾醇提取含量的影响
• 5.3.1.7 萃取次数对提取率的影响
• 5.3.1.8 加标样品回收率测定
• 5.3.2 麦角甾醇提取工艺的优化
• 5.3.3 黑灵芝中麦角甾醇的TLC分析
• 5.3.4 黑灵芝中麦角甾醇的HPLC分析
• 5.3.4.1 流动相的选择
• 5.3.4.2 标准曲线的绘制
• 5.3.4.3 精密度实验
• 5.3.4.4 加标样品回收率测定
• 5.3.4.5 黑灵芝中麦角甾醇的测定
• 5.4 本章小结
• 第六章 黑灵芝子实体中活性成分的分离纯化及结构鉴定
• 6.1 引言
• 6.2 实验部分
• 6.2.1 材料与试剂
• 6.2.1.1 材料与试剂
• 6.2.1.2 主要仪器与设备
• 6.2.2 实验方法
• 6.2.2.1 黑灵芝三萜类化合物的分离纯化
• 6.2.2.2 薄层层析法
• 6.2.2.3 液相色谱
• 6.2.2.4 紫外扫描
• 6.2.2.5 红外光谱检测
• 6.2.2.6 核磁共振分析
• 6.2.2.7 质谱分析
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 TLC分离条件的选择
• 6.3.1.1 吸附剂的选择
• 6.3.1.2 展开剂的选择
• 6.3.1.3 显色剂的选择
• 6.3.2 硅胶柱柱层析分离纯化操作条件的选择
• 6.3.2.1 层析柱的选择
• 6.3.2.2 吸附剂的选择
• 6.3.2.3 洗脱剂的选择
• 6.3.3 分离纯化
• 6.3.3.1 硅胶柱柱层析分离纯化
• 6.3.3.2 凝胶柱纯化及淋洗曲线
• 6.3.4 结构鉴定
• 6.3.4.1 灵赤酸B甲酯（Methyl ganolucidate B）
• 6.3.4.2 赤芝酸A（Lucidenic acid A）
• 6.3.4.3 麦角甾醇（Ergosterol）
• 6.3.4.4 化合物Ⅲ的LC-MS质谱图分析
• 6.4 本章小结
• 第七章 黑灵芝提取物的抑菌和抗氧化活性研究
• 7.1 引言
• 7.2 主要实验仪器及试剂
• 7.2.1 材料与试剂
• 7.2.2 主要仪器
• 7.2.3 实验方法
• 7.2.3.1 抑菌实验样品的制备
• 7.2.3.2 菌悬液及抑菌滤纸片的制备
• 7.2.3.3 抑菌测定方法
• 7.2.3.4 抗氧化实验样品的制备
• 7.2.3.5 抗氧化活性的测定
• 7.3 结果与讨论
• 7.3.1 灵芝提取物对不同细菌的抑菌作用
• 7.3.2 最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 7.3.3 抗氧化实验样品的浸出率比较
• 7.3.4 不同溶剂提取物清除DPPH·自由基的能力
• 2^-·自由基的作用'>7.3.5 灵芝提取物抑制O₂^-·自由基的作用
• 7.3.6 与BHT和抗坏血酸的抗氧化能力的比较
• 7.4 本章小结
• 第八章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读博士学位以来论文及科研情况