沙枣化学物质基础及生物活性的研究

论文摘要

沙枣（Elaeagnus angustifolia L.）又名银柳、七里香、桂香柳等,是胡颓子科（Elaeagnaceae）胡颓子属（Elaeagnus）的落叶乔木或灌木,高4-15m,,主要分布在我国华北、西北等省区,且以西北荒漠、半荒漠地区为分布中心。沙枣不仅是防风固沙和水土保持的优良树种,而且沙枣果实可以食用,全株各部位皆有很高的利用价值,是一种集生态效益与经济效益于一体的重要资源植物。目前在我国被广泛应用于食品、药物、造纸、饲草、木材、家具等方面。国内外的文献表明,到现在为止,对沙枣成分及其生物活性考察、应用等还缺乏全面系统的分析。本论文主要对沙枣果实、树皮、木质部等各个部分粗提物及其不同萃取相的抗氧化性和抗菌活性进行了研究,并测定了其粗提物中挥发性成分和其有效部位的总酚、总黄酮其总单宁的含量。最终选择活性优秀的沙枣树皮进行了化学成分分离鉴定。将干燥恒重后粉碎的沙枣各部分,用95%乙醇溶液浸提,将提取液减压浓缩,得到水溶性粗提物（crude extract）,留出一部分粗提物,其余部分依次经过正己烷,二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取,得到各可溶性部分,将各部分冷冻干燥。抑菌实验结果表明,沙枣各部分不同溶剂提取物对4种供试菌均有一定的抑制作用,不同提取物对细菌抑制作用随着提取物的质量浓度增大而增强。抑菌能力由强到弱依次为：乙酸乙酯萃取相>二氯甲烷取相>粗提物>正丁醇萃取相>正己烷萃取相>水萃取相,其中尤其以乙酸乙酯萃取相的抑菌性能最强,对四种细菌都有抑制作用。采用以石油醚为溶剂的索氏提取法提取沙枣不同部位的挥发性成分,用气相-质谱联联用技术对化学成分进行分析,以峰面积归一化法测定其相对含量,研究表明：沙枣不同部位中含有大量的挥发性成分,且化学成分复杂,含量大。这也证实了胡颓子属植物中一般含挥发油较多,有较浓芳香气味,可作为天然香料。采用紫外吸光光度法对沙枣树各部位的总黄酮、总酚、总单宁含量进行了测定,研究表明沙枣树皮、木质部、果实各部分含有总黄酮（37.0mg/g、14.3mg/g、1.6mg/g）、总酚（51.7mg/g、27.8mg/g、50.7mg/g）、总单宁（36.1mg/g、27.4mg、45.0mg/g）。沙枣树皮乙酸乙酯可溶性部分在Paper TLC轴助下不断经过Sephadex LH-20凝胶色谱柱层析分离得到各单一化合物。运用现代波谱技术,如一维和二维核磁磁共振谱（NMR）、各种质谱（MS）鉴定单一化合物的结构。从沙枣树皮的乙酸乙酯可溶性部分中共分离得到8个化合物（1-8）：（+）-儿茶素（（+）-catechin）（1）、（-）-表儿茶素（（-）-epicatechin）（2）、（+）-棓儿茶素（（+）-gallocatechin）（3）、（-）-表桔儿茶素（（-）-epigallocatechin）（4）、咖啡峻（caffeic acid）（5）、木犀草素（luteolin）（6）、山奈酚（kaempferol）（7）、檞皮素（quercetin）（8）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 天然产物
• 1.2 胡颓子属植物形态特征
• 1.2.1 沙枣的植物形态特征
• 1.3 胡颓子属植物研究历史进展
• 1.4 胡颓子属植物的化学成分
• 1.4.1 挥发油类化合物
• 1.4.2 脂肪酸
• 1.4.3 生物碱
• 1.4.4 黄酮类成分
• 1.4.5 萜类化合物
• 1.4.6 氨基酸及微量元素
• 1.4.7 甾醇类化合物
• 1.4.8 其他成分
• 1.5 胡颓子属植物的生物活性
• 1.5.1 降血糖、降血脂、抗脂质氧化作用
• 1.5.2 平喘作用
• 1.5.3 免疫及抗癌作用
• 1.5.4 对结肠炎的作用
• 1.6 沙枣药理活性研究进展
• 1.6.1 抗肿瘤作用
• 1.6.2 抑菌性
• 1.6.3 抗氧化性
• 1.6.4 抗腹泻功效
• 1.6.5 消炎镇痛作用
• 1.6.7 免疫调节作用
• 1.6.8 其他作用
• 1.7 本论文的研究意义和内容
• 2 材料和方法
• 2.1 实验药品及仪器
• 2.1.1 实验药品
• 2.1.2 实验仪器
• 2.1.3 供试菌种
• 2.1.4 植物来源
• 2.2
• 2.2.1 减压抽提
• 2.2.2 分离
• 2.2.3 柱色谱
• 2.2.4 薄层色谱
• 2.3 仪器分析
• 2.3.1 核磁共振波谱分析
• 2.3.2 质谱分析
• 2.3.3 GC-MS测定其挥发性组成成分
• 2.4 沙枣各部分有效部位含量的测定
• 2.4.1 总黄酮含量的测定
• 2.4.2 总酚含量的测定
• 2.4.3 总单宁含量的测定
• 2.5 分离得到的单体化合物
• 2.6 生物活性的研究
• 2.6.1 清除DPPH能力的测定
• 2.6.2 清除羟自由基能力的测定
• 2.6.3 抑菌性的研究
• 3 结果与讨论
• 3.1 沙枣树皮、木质部、果实部分抽提物的得率
• 3.2 沙枣树皮、木质部、果实部分挥发性成分的鉴定
• 3.2.1 沙枣树皮挥发性成分的鉴定
• 3.2.2 沙枣木质部挥发性成分的鉴定
• 3.2.3 沙枣果实挥发性成分的鉴定
• 3.3 沙枣各部分总黄酮、总单宁、总酚含量
• 3.4 各单体化合物性质和图谱分析
• 3.5 各单体化合物物理性质和光谱数据
• 3.5.1 化合物1[（+）-儿茶素（（+）-catechin）]
• 3.5.2 化合物2[（-）-表儿茶素（（-）-epicatechin）]
• 3.5.3 化合物3[（+）-桔儿茶素（（+）-gallocatechin）]
• 3.5.4 化合物4[（-）-表桔儿茶素（（-）-epigallocatechin）]
• 3.5.5 化合物5[咖啡酸（caffeic acid）]
• 3.5.6 化合物6[木犀草素（luteolin）]
• 3.5.7 化合物7[山奈酚（kaempferol）]
• 3.5.8 化合物8[槲皮素（quercetin）]
• 3.6 沙枣各部分对DPPH·的清除作用
• 3.7 沙枣各部分对·OH的清除作用
• 3.8 沙枣各部分抑菌效果
• 4 结论
• 4.1 本论文的主要结论
• 4.2 本论文的创新之处
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 攻读学位期间发表的论文
• 8 致谢