高脂日粮诱导小鼠氧化应激及对脂代谢相关基因表达的影响

论文摘要

本文研究了高脂日粮与硫辛酸（lipoic acid,LA）对小鼠氧化应激、血脂代谢及相关基因表达的影响,为高脂膳食引发各种心脑血管疾病及LA作为抗氧化营养素提供理论依据。选取昆明种雌性小鼠40只,按体重随机均分成4组,在采食状态分别灌胃生理盐水、猪油、猪油+0.05%LA和猪油+0.1%LA各0.2mL,分别在灌胃后0 h、0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h及2.5h小鼠尾部取血测定血液的自由基水平。另选取40只雌性昆明种小鼠,按体重随机均分成4组,即对照组（饲喂正常日粮）、高脂日粮组（饲喂高脂日粮）、LA组（在高脂日粮中添加0.05%LA和在高脂日粮中添加0.1%LA）。6w后测定各组小鼠血液和消化系统各组织的自由基水平及抗氧化指标;测定小鼠血浆甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白胆固醇（ high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）的含量;测定血浆肝脂酶（hepatic lipase,HL）和脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）的活性;相对定量PCR技术检测肝脏肉碱棕榈酰转移酶1a（carnitine palmitoyltrans- ferase1a,Cpt1a）和载脂蛋白E（apolipoproteinE,ApoE）的mRNA表达。结果:相对于灌胃生理盐水组,灌胃猪油可显著增大小鼠血液中自由基的生成,在猪油中添加0.1%LA能显著降低各时间点小鼠血液的自由基水平。与对照组相比,饲喂高脂日粮可显著提高小鼠血液、肝脏、胰腺、胃、十二指肠、空肠及回肠的自由基水平,显著降低小鼠机体抗氧化能力,诱发机体营养性氧化应激;饲喂高脂日粮会导致小鼠血脂代谢紊乱,引发高脂血症;降低小鼠血浆肝脂酶及脂蛋白脂酶活性;与对照组相比,高脂日粮小鼠肝脏Cpt1a mRNA的表达显著下调、ApoE mRNA表达显著上调;添加0.05%LA对高脂日粮小鼠机体自由基水平的降低、抗氧化能力的提高及血脂代谢的调节作用不显著,添加0.1%LA可使高脂日粮小鼠血液及组织自由基水平、抗氧化能力及血脂代谢恢复到对照组水平。结论:摄入高脂日粮,增加小鼠脂类消化、吸收以及代谢过程中自由基的生成,降低机体抗氧化能力,抗氧化能力的变化影响了脂类的转运与代谢,使小鼠脂质代谢紊乱,在高脂日粮中添加适量的LA可有效清除小鼠消化系统的自由基,提高机体的抗氧化能力,调节血脂代谢,缓解营养性氧化应激。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 氧化应激与心脑血管疾病
• 1.3 营养与消化系统氧化应激
• 1.4 抗氧化剂－缓解氧化应激，维持机体抗氧化体系的平衡
• 1.4.1 生物体内的抗氧化系统
• 1.4.2 硫辛酸的抗氧化能力
• 1.4.3 LA 作为抗氧化剂在临床上的应用
• 1.5 研究意义及主要内容
• 第二章 高脂摄入对小鼠消化系统氧化应激的影响
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 实验动物
• 2.2.2 药品及试剂
• 2.2.3 主要仪器
• 2.2.4 饲料配方
• 2.2.5 灌胃高脂对正常采食小鼠血液自由基水平的影响
• 2.2.6 高脂日粮对小鼠消化系统氧化应激的影响
• 2.2.7 指标的测定
• 2.3 数据处理和统计分析
• 2.4 结果与分析
• 2.4.1 灌胃高脂对正常采食小鼠血液自由基水平的影响
• 2.4.2 高脂日粮对小鼠单位体积血液及消化系统单位组织自由基水平的影响
• 2.4.3 高脂日粮对小鼠消化系统各组织总自由基水平的影响
• 2.4.4 高脂日粮对小鼠消化系统各组织SOD 活性的影响
• 2.4.5 高脂日粮对小鼠消化系统各组织GSH-Px 活性的影响
• 2.4.6 高脂日粮对小鼠消化系统各组织CAT 活性的影响
• 2.4.7 高脂日粮对小鼠消化系统各组织T-AOC 的影响
• 2.4.8 高脂日粮对小鼠血浆抗氧化指标的影响
• 2.4.9 高脂日粮对小鼠血浆及肝脏MDA 含量的影响
• 2.5 讨论
• 2.5.1 灌胃高脂对正常采食小鼠血液自由基水平的影响
• 2.5.2 高脂日粮对小鼠消化系统自由基水平的影响
• 2.5.3 高脂日粮对小鼠机体抗氧化能力的影响
• 2.6 小结
• 第三章 硫辛酸对高脂日粮小鼠消化系统氧化应激的缓解作用
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 实验动物
• 3.2.2 药品及试剂
• 3.2.3 主要仪器
• 3.2.4 饲料配方
• 3.2.5 动物实验的设计
• 3.2.6 血样及组织样的采集
• 3.2.7 指标的测定
• 3.3 数据处理和统计分析
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 LA 对灌胃高脂小鼠血液自由基的影响
• 3.4.2 LA 对高脂日粮小鼠消化系统自由基的影响
• 3.4.3 LA 对高脂日粮小鼠消化系统各组织SOD 活性的影响
• 3.4.4 LA 对高脂日粮小鼠消化系统各组织GSH-Px 活性的影响
• 3.4.5 LA 对高脂日粮小鼠消化系统各组织CAT 活性的影响
• 3.4.6 LA 对高脂日粮小鼠消化系统各组织T-AOC 的影响
• 3.4.7 LA 对高脂日粮小鼠血浆抗氧化指标的影响
• 3.4.8 LA 对高脂日粮小鼠肝脏及血浆MDA 含量的影响
• 3.5 讨论
• 3.5.1 消化系统氧化应激对机体的影响
• 3.5.2 LA 对高脂日粮小鼠消化系统氧化应激的缓解作用
• 3.5.3 LA 缓解高脂日粮小鼠氧化应激的适宜添加剂量
• 3.6 小结
• 第四章 LA 对高脂日粮小鼠血脂代谢及相关基因表达的影响
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 药品及试剂
• 4.2.2 主要仪器
• 4.2.3 饲料配方
• 4.2.4 动物实验的设计
• 4.2.5 血样及组织样品采集
• 4.2.6 血脂及血浆脂酶活性的测定
• 4.2.7 肝脏Cpt1a 及ApoE mRNA 的相对定量表达
• 4.3 数据处理和统计分析
• 4.4 结果与分析
• 4.4.1 各组小鼠的体重变化
• 4.4.2 LA 对高脂日粮小鼠血脂的影响
• 4.4.3 LA 对高脂日粮小鼠血浆HL 和LPL 活性的影响
• 4.4.4 LA 对高脂日粮小鼠动脉粥样硬化指数（AI）的影响
• 4.4.5 LA 对高脂日粮小鼠肝脏Cpt1a 及ApoE 表达的影响
• 4.4.6 小鼠肝脏自由基水平与Cpt1a 及ApoE 表达的相关性分析
• 4.5 讨论
• 4.5.1 LA 对高脂日粮小鼠体脂、血脂代谢及血浆脂酶活性的影响
• 4.5.2 LA 对高脂日粮小鼠肝脏ApoE 表达的影响
• 4.5.3 LA 对高脂日粮小鼠肝脏Cpt1a 表达的影响
• 4.6 小结
• 论文主要结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的文章