负载HPV16E6/18E7基因树突状细胞疫苗的构建及其抗食管癌细胞的体外实验

论文摘要

目的:1、用脐血CD34+细胞在rhGM-CSF、rhTNF-α诱导下体外分化扩增树突状细胞（Dendritic Cell,DC）,检测其表面分子CD83的表达以及对T淋巴细胞增殖的影响。2、提取HPV16E6/18E7质粒,并将之转染树突细胞,构建负载HPV16E6/18E7基因的树突状细胞疫苗,检测其目的基因的表达及活化T淋巴细胞的作用。3、测定食管癌细胞EC-109的HPV类型,将负载HPV18E7基因的树突状细胞在体外行抗食管癌实验:观察E7-DC疫苗与T淋巴细胞作用,检测活化后CTL抗肿瘤的细胞毒活力。

论文目录

• 英文缩略词
• 摘要
• 前言
• 材料与方法
• 第一部分 人脐血树突状细胞的分离扩增
• 一、人脐血 CD34+干细胞的分离纯化
• 二、树突状细胞体外扩增培养
• 三、树突状细胞鉴定
• 第二部分 HPV16E6基因转染成熟的树突状细胞
• 一、pcDNA3.1-HPV16E6重组质粒的提取
• 二、HPV16E6基因转染树突状细胞
• 三、检测转染结果
• 第三部分 负载 HPV16E6/HPV18E7基因树突状细胞疫苗抗食管癌细胞体外实验
• 一、斑点杂交法检测 EC-109细胞 HPV病毒类型
• 二、抗食管癌细胞体外实验
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 致谢
• 综述
• 附录