针对EGFP的siRNA表达载体的构建、鉴定及哺乳动物细胞中NS5B的表达对RNAi效应的影响

针对EGFP的siRNA表达载体的构建、鉴定及哺乳动物细胞中NS5B的表达对RNAi效应的影响

论文摘要

RNA干涉(RNA imerference,RNAi),是双链RNA介导的、序列特异的转录后基因沉默效应,它通过双链RNA介导的靶序列特异性的降解从而抑制相应基因的表达。自1998年发现以来,特别是siRNA表达载体设计成功之后,RNAi作为一种高效特异的抑制基因表达的新技术,已被广泛应用于功能基因组学和基因治疗等多种研究中。在哺乳动物细胞中,是否也存在着沉默信号的放大作用,目前仍不甚清楚。 pSUPER siRNA表达载体是由RNA Polymerase Ⅲ类的H1启动子转录产生缺乏PolyA的小RNA,它有精确的转录起始位点和五个连续的胸腺嘧啶核苷酸(TTTTT)作为转录终止信号。以DNA为模板转录出的RNA先自身折叠形成小发夹状,在细胞内经加工后与化学合成的siRNA结构类似,能够发挥其抑制靶基因表达的作用。 报告基因增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescence Protein,

论文目录

  • 缩略语表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 文献回顾
  • 前言
  • 实验材料
  • 第一部分 针对EGFP的RNA干扰表达载体的构建和鉴定
  • 1.实验方法
  • 2.实验结果
  • 3.讨论
  • 第二部分 哺乳动物细胞中NS5B的表达对RNAi效应的影响
  • 1 实验方法
  • 2.实验结果
  • 3.讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 个人简历和研究成果
  • 致谢
  • 相关论文文献

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