论文摘要
酚氧化酶原（proPO）是对虾类体液免疫的特异性因子之一，在对虾免疫过程中具有十分重要的作用，建立proPO的体外表达系统对于深入研究对虾proPO参与免疫的过程及作用具重要意义。本研究将斑节对虾proPO基因克隆进原核表达载体pET-28a（+），在大肠杆菌中表达，SDS-PAGE和Western blot显示在78.5 kDa附近有一条特异性条带。采用低温诱导表达后可直接检测到酚氧化酶（PO）的活性，对表达后形成的包涵体进行变复性处理后也可检测到PO的活性。将proPO基因克隆进昆虫细胞表达载体pIZT／V5-His，转染草地贪夜蛾（Sf 9）细胞，在荧光显微镜下可观察到绿色荧光。经过ZeocinTM抗生素筛选后，转基因细胞阳性率约在70％以上。用PCR可在细胞中检测到相应的GFP和proPO序列；SDS-PAGE检测可在Sf9细胞中可以检测到一条分子量约为67 kDa的特异性条带，并且具有PO的酶活性，显示proPO在Sf9细胞中得到成功表达。为了建立pIZT／V5-His的Bm-N细胞表达系统，将pIZT／V5-His-proPO转染Bm-N纽胞，结果同样也检测到发绿色荧光的细胞，根据PCR检测和表达后PO活性测定结果，认为已成功建立了一个新的pIZT／V5-His的Bm-N细胞表达系统。
论文目录
相关论文文献
- [1].小金蝠蛾酚氧化酶原基因的克隆及表达分析[J]. 西北农业学报 2019(12)
- [2].茶树产多酚氧化酶内生真菌的筛选及其在速溶茶生产中的应用[J]. 中国茶叶加工 2019(04)
- [3].多酚氧化酶应用于生物学实验教学的实践探索[J]. 生物学教学 2020(01)
- [4].霍山石斛多酚氧化酶活力测定条件的优化[J]. 皖西学院学报 2020(02)
- [5].新疆沙枣叶提取物对春尺蠖多酚氧化酶的抑制作用[J]. 生物加工过程 2020(03)
- [6].凡纳滨对虾多酚氧化酶的纯化鉴定与生物信息学分析[J]. 广东海洋大学学报 2020(04)
- [7].可溶态和膜结合态马铃薯多酚氧化酶的性质对比[J]. 现代食品科技 2020(05)
- [8].烟草多酚氧化酶生物信息学分析[J]. 湖北农业科学 2020(08)
- [9].植物中多酚氧化酶基因研究进展[J]. 分子植物育种 2020(14)
- [10].多酚氧化酶的性质及其应用研究[J]. 农业科技与装备 2020(05)
- [11].茶叶多酚氧化酶同工酶热稳定性分析[J]. 湖北农业科学 2017(01)
- [12].富士苹果多酚氧化酶特性及褐变抑制研究[J]. 湖北农业科学 2017(06)
- [13].五龄期家蚕幼虫血淋巴酚氧化酶活性研究[J]. 现代农业科技 2017(08)
- [14].多酚氧化酶催化合成茶黄素研究[J]. 植物生理学报 2017(08)
- [15].Bacillus subtilis ZH168多酚氧化酶特性研究[J]. 农产品加工 2017(13)
- [16].多酚氧化酶对主要热带水果品质的影响[J]. 中国南方果树 2017(05)
- [17].生菜多酚氧化酶特性研究[J]. 黑龙江农业科学 2016(02)
- [18].昆虫免疫蛋白多酚氧化酶的研究进展[J]. 生命科学 2016(01)
- [19].蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性[J]. 食品工业科技 2016(06)
- [20].香蕉皮多酚氧化酶特性研究[J]. 现代园艺 2016(07)
- [21].双孢菇多酚氧化酶酶学特性研究[J]. 农业科技与信息 2016(01)
- [22].家蚕核型多角体病毒对家蚕酚氧化酶活性及其基因表达的影响[J]. 中国农学通报 2016(32)
- [23].红螯螯虾酚氧化酶原及其特性研究(英文)[J]. 水生生物学报 2015(01)
- [24].多酚氧化酶结构及褐变机理研究进展[J]. 食品研究与开发 2015(06)
- [25].论多酚氧化酶的开发及应用前景[J]. 北京农业 2015(14)
- [26].普洱茶固态发酵过程中多酚氧化酶酶学活性研究[J]. 食品工业科技 2013(21)
- [27].多酚氧化酶的研究进展[J]. 粮食与食品工业 2013(06)
- [28].双孢菇多酚氧化酶特性及抑制剂对同工酶的影响[J]. 食品科技 2013(12)
- [29].探究水涝胁迫下欧李过氧化氢与多酚氧化酶的变化[J]. 果树资源学报 2020(01)
- [30].多酚氧化酶的分离纯化及生理功能的研究进展[J]. 食品工业 2020(05)