HPLC同时检测多种非甾体抗炎药残留的研究

论文摘要

非甾体抗炎药（non-steroidal anti-inflammatory drugs,NASIDs）具有抗炎解热,缓解疼痛,治疗风湿性疾病的疗效。近年来,由于养殖业趋于集约化和大规模化发展,非甾体抗炎药已经广泛应用于养殖业中。这类药使用泛滥,使养殖周边的水体以及水体中的生物都受到了一定程度的污染。非甾体抗炎药会导致肠胃、肝肾,血液和神经系统副反应,全世界每天大约有3千万人使用这类药缓解病痛,其中有0.2%0.4%的患者致死。因此,许多国家和地区规定了非甾体类药物的最大残留量。目前国内针对非甾体抗炎药的检测主要是参照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准（SN/T 2190-2008）以及欧盟标准（2002/657/EC）,但还没有制定相应的国标,为了保障我国的动物源性食品出口贸易,保障消费者的身体健康,确保动物源性食品中非甾体抗炎药残留量在安全食用范围内,从而建立一种简单、快速、可靠、灵敏的检测方法是控制残留量的基础。目前对非甾体抗炎药残留检测的方法有气相色谱法、气相色谱质谱联用法、高效液相色谱法、高效液相色谱质谱联用法、毛细管电泳法等。本文针对非甾体抗炎药的性质,选取四种非甾体抗炎药进行研究,分别是:氟尼辛葡甲胺、美洛昔康、酮洛芬和双氯芬酸钠。采用酸化后的乙醇结合超声波微波辅助提取,并优化了净化条件,高效液相色谱法（HPLC）上样检测,建立了同时检测动物源性食品以及水生生物鲫鱼中4种非甾体抗炎药的残留检测方法,研究成果如下:1.获得提取4种非甾体抗炎药的最佳条件。以羊肉为实验材料,比较了酸化后的乙腈、甲醇和乙醇有机溶剂对4种非甾体抗炎药提取效果,结果表明酸化后的乙醇和乙腈的提取回收率较高,考虑到乙腈的毒性较大,对环境有害,所以本实验选取酸化乙醇作为提取剂,在此基础上,还研究了超声波、微波以及漩涡震荡对提取效果的影响,结果表明超声波和微波联用辅助提取的效果好。2.获得了净化提取样品的最佳条件。羊肉组织和鲫鱼组织的成分比较复杂,在超声波和微波的作用后释放出大量的极性（如氨基酸类）和非极性（如脂类）杂质,通过液-液萃取和固相萃取的方法使样品得到较好的净化。本实验采用的正己烷萃取了提取液中的非极性成分,研究了C18、硅藻土、氧化铝和硅胶为填料的固相萃取柱对4种非甾体抗炎药的净化效果。结果表明以硅藻土为填料的固相萃取柱对目标物保留效果较好。3.优化了色谱条件。色谱柱为Hypersil ODS C18柱,有报道采用乙腈- 0.1%甲酸（0.5 mmol/L乙酸铵）为流动相,实验显示,峰型较宽和拖尾现象,本实验对羊肉组织样品分析时进行了优化,选择乙腈-0.2%三乙胺水溶液（40:60,v/v,用磷酸调节pH到3.5）;流速为0.8 ml/min,紫外检测波长为255 nm;在对鲫鱼组织样品分析时流动相稍有调整为乙腈-0.1%三乙胺水溶液（60:40,v/v,用磷酸调节pH到3.5）,使样品分析时间缩短了10 min。4.建立了4种非甾体抗炎药的同时检测方法。采用高效液相色谱法（二级管阵列检测器）,同时检测出羊肉中氟尼辛葡甲胺、美洛昔康、酮洛芬和双氯芬酸钠的残留,最低检测限为510μg/kg,回收率为65.399.6%;在鲫鱼组织中的最低检测限为510μg/kg,回收率为72.593.8%。方法操作简单、快速、灵敏度高、特异性强,满足定性定量分析要求。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 1.1 非甾体抗炎药（NSAIDs）的简介
• 1.2 兽药残留分析技术的应用
• 1.2.1 样品前处理技术
• 1.2.2 分析检测技术
• 1.3 研究目标及意义
• 1.4 展望
• 第二章 超声波-微波辅助提取-高效液相色谱法同时检测羊肉组织中4 种非甾体抗炎药物残留
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 分析方法
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 检出限和定量限
• 2.3.2 回收率和精密度
• 2.3.3 定量标准曲线
• 2.3.4 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 鲫鱼中四种非甾体抗炎药残留的分析研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 高效液相色谱条件
• 3.2.3 标准曲线的配置
• 3.2.4 样品处理
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 检测方式的确定
• 3.3.2 定量标准曲线
• 3.3.3 提取条件优化
• 3.3.4 净化条件优化
• 3.3.5 色谱条件优化
• 3.3.6 检出限和定量限
• 3.3.7 添加回收率和精密度
• 3.4 小结
• 第四章 上海市南汇区牛、羊肉的非甾体抗炎药残留调查研究
• 4.1 引言
• 4.2 内容与方法
• 4.2.1 样品来源
• 4.2.2 种类及数量
• 4.2.3 检测项目
• 4.2.4 检测时间
• 4.2.5 仪器及试剂
• 4.2.6 检测方法
• 4.2.7 标准曲线
• 4.4 结果
• 4.5 讨论
• 4.6 结论
• 第五章 总结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 攻读硕士期间发表和待发表的论文