茶多酚对大鼠胃缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

论文摘要

茶叶在我国最早是作为药物应用的,后来成为了人们的日常必备饮品。茶叶主要成分——茶多酚（polyphenols of tea,PPT）具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗辐射等作用。在缺血再灌注损伤中,氧自由基的产生和血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）的分泌起着极其重要的作用。在缺血再灌注（Ischemia-Reperfusion,IR）损伤中,氧自由基的产生和VEGF的分泌起着极其重要的作用。缺血、缺氧引起细胞功能改变,细胞通透性增加,再灌注后产生大量氧自由基,直接损伤组织细胞;VEGF分泌增加,损伤血管内皮[1]。在胃肠缺血再灌注方面,国内外有大量的文献报导,但是目前对茶多酚在胃肠缺血再灌注损伤时对胃肠的直接保护作用和机制方面文献不多,报道很少。本实验拟通过检测茶多酚干预下大鼠血浆过氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、胃粘膜血管内皮细胞间连接,观察茶多酚抗氧化、清除自由基作用对胃肠血管内皮的保护,进一步检测胃粘膜血管内皮VEGF和与胃粘膜血管内皮生长关系密切的CD34变化情况,以及通过观察茶多酚干预情况下,缺血再灌注之胃粘膜毛细血管内皮超微结构的变化情况,探讨茶多酚对胃缺血再灌注的保护作用。方法:35只SD大鼠随机分为7组（n=5）,分别设立:空白对照组;假手术对照组;手术对照组;20mg/kg PPT组;40mg/kg PPT组;80mg/kg PPT组;160mg/kg PPT组。建立缺血再灌注大鼠模型,于建模成功后30min行再灌注,同时给予相应剂量的药物,分别于再灌注后1h、2h、6h、12h留取血浆标本,于再灌注12h留取胃体黏膜组织标本。①应用比色法测定法,测定各组实验大鼠给药前后,其血浆中MDA、SOD水平的变化;②应用免疫荧光化学染色法,同步观察各实验组反映胃粘膜内皮细胞间连接的VEGF及CD34的变化;③应用透射电镜的方法,同步观察各实验组胃粘膜中毛细血管内皮超微结构的变化。结果:①各给药组相应时间点的SOD含量明显高于手术对照组、假手术对照组和空白对照组,其中40mg/kg组最为显著。②20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg组相应时间点的MDA含量明显低于手术对照组、假手术对照组和空白对照组,其中80mg/kg组最为显著,160mg/kg组则略低于手术对照组、高于假手术对照组和空白对照组。③各给药组的胃黏膜内毛细血管内皮中CD34表达水平明显高于手术对照组,略低于假手术对照组和空白对照组。④各给药组的胃黏膜内毛细血管内皮中VEGF表达水平明显低于手术对照组,略高于假手术对照组和空白对照组。⑤予茶多酚治疗后,胃黏膜组织毛细血管内皮细胞超微结构的损伤可显著减轻。结论:茶多酚对因缺血再灌注导致损伤的胃黏膜具有保护作用,其主要作用途径可能是通过清除氧自由基和改善胃粘膜中血管内皮的修复实现的。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 1. 关于缺血再灌注损伤及其发生机制
• 2. 关于胃缺血再灌注损伤模型的建立及其可能机制探讨
• 3. 关于茶叶中的药效成份——茶多酚
• 4 关于 VEGF 和 CD34
• 实验材料
• 一、实验动物
• 二、主要试剂及抗体
• 三、主要仪器
• 实验一 茶多酚对胃黏膜缺血再灌注损伤的影响
• 1. 材料
• 药品、试剂、仪器:
• 2. 方法
• 2.1 动物分组
• 2.2 模型的制备
• 2.3 标本处理
• 2.4 统计学处理
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 实验二 茶多酚对胃缺血再灌注致黏膜毛细血管内皮超微结构损伤的保护作用
• 1. 材料
• 药品、试剂、仪器
• 2. 方法
• 2.1 动物分组
• 2.2 模型的制备
• 2.3 留取标本
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢