高压氧对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及其机制的实验研究

高压氧对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及其机制的实验研究

论文摘要

目的通过建立大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)模型,研究肾缺血再灌注过程中组织细胞凋亡的变化以及高压氧(HBO)处理对细胞凋亡的影响。深入探讨高压氧对肾IRI的作用及其机制,为临床应用HBO防治肾IRI提供理论依据。方法成年健康的Wistar大鼠60只,随机分为4大组,即正常对照组(n=6)、假手术组(n=18)、肾缺血再灌注组(IR组,n=18)和肾缺血再灌注+HBO治疗组(HBO治疗组,n=18)。后面三组又按再灌注后1 h、3 h和5 h各分为3个亚组,每个亚组大鼠6只。各组均先切除右肾,取左肾研究。正常对照组切除右肾后立即切取左肾备用。假手术组不阻断左肾动脉,肾IR组和HBO治疗组则采用钳夹肾动脉法建立左肾缺血再灌注损伤模型。HBO治疗组:在肾缺血再灌注后0 h、2h和4h时分别将大鼠置于动物实验用高压氧舱内,高压氧治疗1h之后,治疗压力为2 ATA(0.1 MPa),舱内氧浓度在98%以上。各组分别于再灌注后1 h、3 h和5h时检测血中Scr、BUN、MDA和TNF-α的含量,并取左肾组织用于石蜡切片和HE染色、流式细胞术(FCM)行Amnnexin V/PI双染法检测细胞凋亡以及电镜检查。结果①在IR组,血中BUN、Scr、MDA和TNF-α的含量显著高于同时点正常对照组和假手术组(P<0.05);在HBO治疗组,上述指标在术后不同时点的含量均较IR组明显降低(P<0.05)。②FCM结果显示,在正常对照组和假手术组肾组织中仅偶见细胞凋亡;而在IR组肾组织中可见明显细胞凋亡,而HBO治疗组细胞凋亡显著低于同期IR组(P<0.05)。③肾组织中细胞凋亡与血中BUN、Scr、MDA和TNF-α值呈显著正相关(P<0.05)。④肾组织病理变化:在正常对照组和假手术组,肾组织结构正常;在IR组,突出表现为肾小管上皮细胞空泡样变性、坏死和崩解,并且随再灌注时间的延长而加重;HBO治疗后肾小球毛细血管充血减轻,肾小管上皮细胞空泡样变性也明显减轻、细胞结构基本趋于正常。⑤肾组织超微结构的变化:在HBO治疗组:在治疗1 h时,可见少量内质网扩张和胞内致密物,线粒体基本正常;在3 h时,仍有少量内质网扩张,但此时线粒体出现轻度肿胀;在5 h时,肾小管上皮细胞内出现大小不等的空泡。结论①肾缺血再灌注后,血中氧自由基和促炎症因子的大量产生可促进肾组织细胞凋亡,从而加重肾损伤;②肾缺血再灌注后,肾组织大量细胞凋亡是导致肾功能进一步损害的重要原因。③HBO抑制氧自由基和促炎症因子的产生,以及抑制组织细胞凋亡是HBO在肾缺血再灌注损伤过程中发挥肾保护效应的重要机制。④早期HBO治疗对减轻肾缺血再灌注损伤进而保护肾功能更为有利。

论文目录

  • 1 高压氧对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及其机制的实验研究
  • 1.1 缩略词表
  • 1.2 中文摘要
  • 1.3 英文摘要
  • 1.4 前言
  • 1.5 材料与方法
  • 1.6 结果
  • 1.7 讨论
  • 1.8 结论
  • 1.9 参考文献
  • 2 综述
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 附录
  • 相关论文文献

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