导读:本文包含了睾酮和双氢睾酮论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:阿尔茨海默症,双氢睾酮,β淀粉样蛋白,突触
睾酮和双氢睾酮论文文献综述
段立洁,王子高,祖恒兵[1]（2019）在《双氢睾酮对Aβ_(1-42)诱导的突触损害的保护作用》一文中研究指出目的:探讨双氢睾酮(DHT)对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞突触损害的影响及机制。方法:本研究分为对照组、Aβ_(1-42)组、DHT组及Aβ_(1-42)+DHT组,以Aβ_(1-42)处理SH-SY5Y细胞建立突触损害细胞模型,予DHT预处理,利用Western Blot及免疫荧光检测突触后致密区蛋白95(PSD-95)、Homer-1蛋白的表达变化,并采用磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路阻断剂LY294002观察PI3K/Akt信号通路在DHT突触保护过程中的作用。结果:Aβ_(1-42)可剂量依赖地下调SH-SY5Y细胞PSD-95、Homer-1蛋白的表达。而DHT预处理则可显着增加Aβ_(1-42)处理的SH-SY5Y细胞PSD-95、Homer-1的表达,该效应可被PI3K/Akt特异抑制剂LY294002所逆转。结论:DHT可通过激活PI3K/Akt信号通路逆转Aβ_(1-42)诱导的突触损害。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2019年05期）
杨磊,童宇,苗帅,周任远[2]（2019）在《双氢睾酮在高糖诱导的BV-2小胶质细胞炎症中的神经保护机制研究》一文中研究指出目的:年龄相关的雄激素水平降低是老年男性迟发性性腺功能减退症的重要病因,患者除了表现性功能低下、代谢综合症等系统性症状外,往往伴随认知减退、焦虑等中枢神经系统异常,提示雄激素影响认知功能,但机制未完全阐明。脑内高糖状态是糖尿病脑病、阿尔兹海默(本文来源于《首届男性大健康中西医协同创新论坛暨第叁届全国中西医结合男科青年学术论坛论文集》期刊2019-09-06）
包家娟[3]（2019）在《双氢睾酮梯度浓度变化对人毛乳头细胞及Wnt、凋亡通路的影响》一文中研究指出目的:观察不同浓度双氢睾酮对体外培养人毛乳头细胞生长、增殖、凋亡以及Wnt转导通路、凋亡通路的相关信号分子的影响,初步阐明双氢睾酮与人毛乳头细胞生长发育的相关性及作用机制,为雄激素性秃发防治新方案、新方法的设计提供科学依据。方法:设置空白对照组及0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml浓度双氢睾酮组,分别与人毛乳头细胞共培养,α-SMA免疫荧光染色鉴定毛乳头细胞;MTT法检测人毛乳头细胞增殖情况;流式细胞计数法测定其细胞凋亡情况;提取人毛乳头细胞RNA,行RNA-Seq检测Wnt、凋亡通路基因的表达量;采用SPSS23.0软件分析数据,计量资料的组间差异采用单因素方差分析,LSD法对空白对照组和各个实验组的上述结果分别进行比较,统计变量以x±s表示。结果:(1)免疫荧光鉴定毛乳头细胞:红色是细胞质染色,蓝色是细胞核染色,细胞呈梭形,部分多角形,鉴定为毛乳头细胞,镜下可见对照组和0.1ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml DHT组的毛乳头细胞较稀疏,1ng/mlDHT组和10ng/mlDHT组密度明显变大,10ng/mlDHT组细胞最为密集,呈旋涡状凝集生长。(2)MTT法检测双氢睾酮对毛乳头细胞增殖的影响:与空白对照组比较,0.1ng/ml双氢睾酮对毛乳头细胞无促进增殖的作用(P﹥0.05),1ng/ml、10ng/ml双氢睾酮促进毛乳头细胞增殖(P﹤0.01、P﹤0.01)。100ng/ml双氢睾酮对毛乳头细胞的增殖无抑制作用(P﹥0.05),1000ng/ml双氢睾酮抑制毛乳头细胞增殖(P﹤0.05)。(3)流式细胞计数检测双氢睾酮对毛乳头细胞凋亡的影响:DHT浓度为0.1ng/ml、1ng/ml、100ng/ml时,双氢睾酮不会促进DHPCs凋亡活动(P﹥0.05)。1000ng/ml双氢睾酮可促进DPCs的凋亡(P﹤0.01)。(4)RNA-Seq检测双氢睾酮对Wnt通路的影响:低浓度DHT(﹤10ng/ml),Wnt10b、LEF1基因表达上调,Axin2、GSK-3β、DKK-1基因表达下调;高浓度DHT(﹥100ng/ml)时,Wnt10b、LEF1基因表达下调,Axin2、GSK-3β、DKK-1基因表达上调。RNA-Seq检测双氢睾酮对凋亡通路的影响:低浓度DHT(﹤10ng/ml),Bcl-2基因表达上调,Bax、Fas基因表达下调;高浓度DHT(﹥100ng/ml)时,Bcl-2基因表达下调,Bax、Fas基因表达上调。结论:1、一定浓度(1ng/ml、10ng/ml)的双氢睾酮促进毛乳头细胞增殖,而高浓度(1000ng/ml)双氢睾酮则抑制毛乳头细胞增殖并促进毛乳头细胞凋亡。该梯度浓度变化的意义对指导临床用药具有重要作用。2、不同浓度的双氢睾酮对Wnt通路、凋亡通路中的信号因子表现为上调或下调,从而影响人毛乳头细胞的增殖和凋亡,该梯度浓度变化的意义对治疗雄激素性脱发新方案的设计具有参考意义。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
杜鹃[4]（2018）在《CD147在双氢睾酮抗Aβ_(42)诱发SH-SY5Y细胞损伤中的作用》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种与年龄紧密相关的神经系统退行性疾病,临床上以记忆衰退和认知障碍为症状,病理上以脑内淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积、神经纤维缠结形成、神经元丢失等为特征。AD包括家族性和散发性两种,研究表明其病理机制可能与多种因素相关:Aβ沉积、离子通道、钙代谢紊乱、血管性异常、tau蛋白异常和氧化应激等。随着研究的深入发现Aβ在AD的发病进程中有着重要作用,认为Aβ的代谢异常打破了其生成与清除间的平衡关系,引发Aβ沉积。在Aβ生成与清除的动态过程中,多种酶类起到了关键作用,包括生成相关的β-、γ-分泌酶和降解相关的脑啡肽酶(Neprilysin,NEP)、胰岛素降解酶(Insulin degrading enzyme,IDE)、基质金属酶2/9(Matrix metalloproteinase2/9,MMP 2/9)等,共同维持着Aβ含量的平衡状态。有研究提示,睾酮下降可能是AD的一个危险因素,在AD之前或AD的早期就有可能出现。前瞻性研究中将AD的诊断与血睾酮水平的变化进行比较,对于首次临床诊断正常的男性调查对象随访4-37年(平均19年),最终研究结果显示,患AD的调查对象水平下降,而且其下降先于AD诊断5-10年,表明雄激素下降发生在AD的临床症状之前。Rosario等尸检发现,在50-97岁的男性中脑组织的睾酮水平随年龄下降,AD患者下降的程度显着高于正常人。轻度神经病理改变的患者脑组织中睾酮水平低于AD最早期的患者,说明睾酮下降发生在病理改变之前,并且可能促进病程的进展,年龄相关的雄激素下降是AD的危险因素。雄激素在AD发生发展中发挥作用主要通过以下叁种途径:(1)雄激素受体(Androgen receptor,AR)通路。在下丘脑、海马、颞叶皮质中均存在雄激素受体,在5α-还原酶的作用下睾酮可转变为有生物效能的雄激素-双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)。睾酮和DHT都能结合雄激素受体发挥作用。(2)雌激素受体通路。睾酮作为一种激素原,在芳香化酶的作用下转变为17β-雌二醇,后者与雌激素受体结合,间接影响AD的发生发展。(3)促性腺激素通路。雄激素是下丘脑-垂体-性腺轴中的重要激素之一,雄激素水平的下降通过负反馈调节引起该轴中其他激素水平的变化。由此引起的黄体生成素和卵泡刺激素下降可能与AD相关。雄激素在AD发生发展中可能的作用机制,调节Aβ的聚集、降低tau磷酸化、增加突触可塑性、减少氧化性应激、调节有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路、增加神经生长因子的表达、抑制炎症反应。对抗雄激素治疗的前列腺癌患者随访发现,在轻度神经病理改变的男性AD患者中,血清中睾酮、雌二醇大幅度降低,而Aβ水平显著升高,脑组织内Aβ与睾酮水平成反比。如前面提及,雄激素可以通过直接的雄激素受体通路或者间接的雌激素受体通路调节Aβ水平。睾酮主要通过减少Aβ的产生和增加Aβ的清除两方面降低Aβ水平。Aβ前体蛋白(Amyloid precursor protein,APP)主要有两个相互竞争的裂解途径:APP在β-裂解酶和γ-分泌酶的作用下转化为Aβ;通过α-分泌酶不产生淀粉样变,阻止Aβ的产生。睾酮可调节原代大脑皮质神经元内的APP,促进非淀粉样变的APP片段的分泌减少Aβ的产生。早老素(Presenilin,PS)是γ-分泌酶复合体的主要组成部分,去势雄性小鼠补充雄激素后PS1/2水平均升高,雄激素可能通过上调PS,增加γ-分泌酶的数量或者活性,进而减少Aβ的产生。Aβ可在Aβ降解酶类的作用下分解为较小的分子肽类而被清除出体外,而降解酶功能的异常可能会促进AD的发生。目前研究发现的主要降解酶类有NEP、IDE、MMPs。雄激素下降会导致NEP水平降低以及Aβ水平升高,DHT替代治疗可恢复NEP和Aβ水平,故NEP在雄激素调节Aβ中发挥一定作用。雄激素还可能通过调节甲状腺素运载蛋白的水平,影响Aβ的清除。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(Extracellular matrix metalloproteinase inducer,CD147)为I型跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族,能够刺激肿瘤细胞中的成纤维细胞分泌MMPs,进而导致细胞基底膜和间质成分降解,从而在肿瘤浸润和转移过程中起到重要作用。但是近年来,有研究报道发现CD147参与AD相关Aβ的生成与调解,但其具体分子机制仍不十分明确。有研究认为,CD147是γ-分泌酶复合体的又一个亚基,参与负向调节APP的产生Aβ,又有研究表明CD147可参与到Aβ的清除降解。第一部分双氢睾酮对SH-SY5Y细胞中CD147表达的调节作用目的:以SH-SY5Y细胞为研究对象,运用免疫荧光、Western blot观察双氢睾酮(DHT)对CD147蛋白表达的影响作用,以及经典的雄激素核受体(AR)抑制剂氟他胺(Flutamide,F)能否阻断DHT介导的CD147蛋白表达上调的作用。进一步利用Chip技术证明CD147基因启动子区存在AR结合位点。方法:1.双氢睾酮对SH-SY5Y细胞中CD147表达的剂效性实验实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(0n M)、1 n M处理组(1 n M)、10 n M处理组(10 n M)、100 n M处理组(100n M),对照组给予等量DMSO处理,作用6 h后提取细胞蛋白进行Western blot检测,观察不同剂量DHT对CD147蛋白表达的影响。2.免疫细胞荧光染色检测氟他胺预处理对双氢睾酮影响CD147表达的作用实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(Con)、氟他胺+双氢睾酮组(F+DHT)、双氢睾酮组(DHT)。根据第一部分实验结果确定F+DHT组、DHT组的DHT给药方式为100 n M、6 h。氟他胺预处理为10μM、1 h。作用完毕后,免疫细胞荧光染色。激光共聚焦采集图像,计算平均荧光强度,分析在DHT作用下,CD147蛋白表达变化。3.Western blot实验检测氟他胺预处理对双氢睾酮影响CD147表达的作用实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(Con)、氟他胺+双氢睾酮组(F+DHT)、双氢睾酮组(DHT)。根据第一部分实验结果确定F+DHT组、DHT组给药方式为100 n M、6 h。氟他胺预处理时间为1 h。作用完毕后,提取细胞蛋白进行Western blot检测,Odyssey红外成像系统显影成像,以GAPDH的表达做为内参,测定各组CD147蛋白的相对表达水平。4.染色质共沉淀实验检测CD147启动子区雄激素受体结合位点实验选用融合度达80-90%的SH-SY5Y细胞,随机分为空白组(Blank),Ig G组(Ig G),阳性对照组(Input)和雄激素受体组(AR)。AR组加入AR特异性抗体,Ig G加入AR抗体同源性Ig G,Input组加入试剂盒中阳性对照抗体,Blank组加入无菌水。通过交联和裂解、超声处理断裂DNA、交联蛋白/DNA的免疫沉淀、蛋白/DNA复合物的洗脱、蛋白/DNA复合物与游离DNA的反交联、DNA纯化、Realtime-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测CD147启动子区是否存在雄激素受体结合位点,产物测序。结果:1.双氢睾酮对SH-SY5Y细胞中CD147表达的剂效性实验不同剂量的DHT作用于SH-SY5Y细胞6 h,CD147蛋白条带光密度的相对表达值分别为0 n M组0.26±0.02、1 n M组0.27±0.01、10 n M组0.31±0.01、100 n M 0.35±0.02。以100 n M组CD147表达最多,较其他叁组均明显升高(P<0.05);其次为10 n M组,较1 n M和0 n M组均有升高(P<0.05);1 n M组与0 n M组间无明显变化。2.氟他胺预处理对双氢睾酮影响CD147表达的作用CD147的免疫细胞荧光染色结果显示:与Con组(0.046±0.007)相比,F+DHT组(0.054±0.003)的平均荧光强度略增加,DHT组(0.069±0.005)荧光强度明显增加(P<0.05);与DHT组(0.069±0.005)相比,F+DHT组(0.054±0.003)荧光强度有所降低(P<0.05)。3.氟他胺预处理对双氢睾酮影响CD147表达的作用CD147的Western blot结果显示:与Con组(0.54±0.02)相比,F+DHT(0.60±0.04)组有所升高,差异有统计学意义(P<0.05),DHT组(0.67±0.04)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与DHT组(0.67±0.04)相比,F+DHT组(0.60±0.04)有所下降(P<0.05)。各组条带均相对于内参GAPDH的光密度值作对比。4.CD147启动子区雄激素受体结合位点的检测DNA断裂片段大小在200-1000bp范围内,可用于后续实验。Realtime-PCR结果显示:Input组最早出现扩增高峰,Ct值为24.93±0.09,其次为AR组27.32±0.07,Ig G组30.51±0.24,Blank组43.13±4.00。琼脂糖凝胶电泳显示:Input组条带最亮IOD值为50645±7550.64,其次为AR组27042±7683.61,Ig G组13692±1886.75,Blank组未显示出条带。扩增产物经测序与预期结合碱基序列AAGGACGTTCTGACC一致。第二部分CD147对Aβ42诱发SH-SY5Y细胞损伤的调节作用目的:以SH-SY5Y细胞为研究对象,通过感染LV-BSG-RNAi慢病毒干扰CD147蛋白表达并给予外源性Aβ42造成细胞损伤后,检测细胞活力、形态、凋亡相关蛋白的表达变化,并观察细胞培养基上清中Aβ42的含量变化。探讨CD147与Aβ42清除以及细胞损伤之间的关系。方法:1.Aβ42对SH-SY5Y细胞活力的影响作用实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(0μM)、1μM Aβ42处理组(1μM)、10μM Aβ42处理组(10μM)、20μM Aβ42处理组(20μM)、40μM处理组(40μM)。加入含不同浓度的Aβ42无血清培养基100μl,对照组加入等量PBS,每个浓度设置3个平行复孔,培养24 h后每孔中加入MTS试剂盒中检测试剂20μl,37℃孵育2 h。Infinite200酶标仪490 nm检测吸光度值,观察Aβ42不同浓度作用对细胞活力的影响变化。2.慢病毒LV-BSG-RNAi感染SH-SY5Y细胞效率的检测实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(Con)、干扰组(RNAi)。对照组加入阴性对照Con077慢病毒(1E+9 TU/ml),干扰组加入LV-BSG-RNAi慢病毒(8E+8 TU/ML)。感染12 h后更换常规培养基,37℃5%CO2培养箱中培养,感染72 h后倒置显微镜观察感染效率。Western blot和RT-PCR实验检测干扰CD147表达效率。3.干扰CD147表达对SH-SY5Y细胞外Aβ42清除的作用实验选用感染3 d后细胞,随机分为对照组(Con)、对照+Aβ42组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi)、干扰+Aβ42组(RNAi+Aβ42)。Aβ42选取实验一中确定的最低有效作用浓度10μM,作用24 h。收集细胞上清液,Elisa实验检测细胞上清液中Aβ42的变化。4.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞活力的作用实验选用感染3 d后细胞,随机分为对照组(Con)、对照+Aβ42组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi)、干扰+Aβ42组(RNAi+Aβ42)。含10μM Aβ42无血清培养基作用24 h后每孔中加入MTS试剂盒中检测试剂20μl,37℃孵育2 h。Infinite200酶标仪490 nm检测吸光度值,观察不同组间细胞活力的变化。5.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞形态的作用实验选用感染3 d后细胞,随机分为对照组(Con)、对照+Aβ42组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi)、干扰+Aβ42组(RNAi+Aβ42)。10μM Aβ42作用24h后倒置显微镜观察细胞形态变化。6.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞胞核形态的作用实验选用感染3 d后细胞,随机分为对照组(Con)、对照+Aβ42组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi)、干扰+Aβ42组(RNAi+Aβ42)。10μM Aβ42作用24 h后,Hoechst 33258染色,倒置荧光显微镜观察细胞核形态变化。7.干扰CD147表达对Aβ42调节SH-SY5Y细胞凋亡相关蛋白的作用实验选用感染3 d后细胞,随机分为对照组(Con)、对照+Aβ42组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi)、干扰+Aβ42组(RNAi+Aβ42)。10μM Aβ42作用24 h后Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:1.Aβ42对SH-SY5Y细胞活力的影响作用MTS检测细胞活力结果显示,Aβ42作用24 h可剂量依赖性引起SH-SY5Y细胞活力降低,与对照组吸光度值0.80±0.04相比,1μM组0.75±0.08未有明显改变,其余各组10μM组0.61±0.01、20μM组0.59±0.01、40μM组0.48±0.01均存在显着性降低(P<0.05)。后续相关实验均选取10μM Aβ42作用24 h。2.慢病毒LV-BSG-RNAi感染SH-SY5Y细胞效率的检测慢病毒LV-BSG-RNAi在感染后3 d,感染率可达80%以上;RT-PCR检测结果显示,与Con组相比RNAi组CD147的m RNA水平降低了65.60±4.26%(P<0.01);Western blot检测结果显示,与Con组相比RNAi组CD147的蛋白水平降低了73.62±6.31%(P<0.01)。后续相关实验均选取慢病毒感染3 d。3.干扰CD147表达对SH-SY5Y细胞外Aβ42清除的影响作用Elisa检测培养基上清中Aβ42含量结果显示:Con组与RNAi组未加入外源性Aβ42,上清中Aβ42含量较低,分别为8.67±2.02、8.92±1.48(pg/ml),两组间无明显变化;Con+Aβ42组和RNAi+Aβ42组加入了外源性Aβ42,上清中Aβ42含量较高,与Con+Aβ42组72.94±4.64相比,RNAi+Aβ42组92.48±6.29明显增高(P<0.05)。4.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞活力的影响作用MTS检测细胞活力结果显示:与Con组(0.77±0.05)相比,Con+Aβ42组(0.57±0.06)、RNAi+Aβ42组(0.39±0.03)细胞活力明显下降(P<0.01),RNAi组(0.72±0.03)无明显变化;与RNAi组(0.72±0.03)相比,Con+Aβ42组(0.57±0.06)、RNAi+Aβ42组(0.39±0.03)细胞活力明显下降(P<0.01);与Con+Aβ42组(0.57±0.06)相比,RNAi+Aβ42组(0.39±0.03)细胞活力明显下降(P<0.01)。5.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞形态的作用Con组细胞多呈梭形、叁角形,胞体较大、胞浆饱满,突起交织;RNAi组细胞大部分呈梭形、叁角形,部分细胞胞体变圆,突起变短;10μM Aβ42作用24 h后,Con+Aβ42组部分细胞胞体回缩,失去折光性,胞质内出现颗粒,突起变细;10μM Aβ42作用24 h后,RNAi+Aβ42组大部分胞体回缩聚集、呈近圆形或不规则形,失去折光性,胞质内出现颗粒,突起变短变细,部分细胞碎片。6.干扰CD147表达对Aβ42损伤SH-SY5Y细胞胞核形态的作用Hoechst33258染色显示,Con组细胞核大,呈椭圆状,染色均一;Con+Aβ42组大部分细胞核呈椭圆状,染色均一,部分固缩;RNAi组大部分细胞核呈椭圆状,染色均一,部分细胞核碎裂、固缩;相对于RNAi组,RNAi+Aβ42组固缩细胞核多于RNAi组。7.干扰CD147表达对Aβ42调节SH-SY5Y细胞凋亡相关蛋白的作用CD147的Western blot实验结果显示:与Con组(0.82±0.05)相比,RNAi组(0.23±0.02)、RNAi+Aβ42组(0.21±0.05)CD147明显减少(P<0.01),Con+Aβ42组(0.89±0.06)CD147无明显变化;RNAi组(0.23±0.02)与RNAi+Aβ42组(0.21±0.05)间无明显变化;与Con+Aβ42组(0.89±0.06)相比,RNAi+Aβ42组(0.21±0.05)CD147明显减少(P<0.01)。Bax的Western blot实验结果显示:与Con组(1.57±0.12)相比,RNAi组(1.97±0.34)、Con+Aβ42组(1.83±0.19)、RNAi+Aβ42组(2.32±0.20)Bax表达水平均增加,以RNAi+Aβ42组(2.32±0.20)最高(P<0.01);与RNAi组(1.97±0.34)相比,Con+Aβ42组(1.83±0.19)无明显变化,RNAi+Aβ42组(2.32±0.20)明显升高(P<0.01);与Con+Aβ42组(1.83±0.19)相比,RNAi+Aβ42组(2.32±0.20)明显升高(P<0.01)。Bcl-2的Western blot实验结果显示:与Con组(0.84±0.02)相比,RNAi组(0.66±0.02)、Con+Aβ42组(0.64±0.03)、RNAi+Aβ42组(0.33±0.02)Bcl-2表达水平均降低,以RNAi+Aβ42组(0.33±0.02)最低(P<0.01);与RNAi组(0.66±0.02)相比,Con+Aβ42组(0.64±0.03)无明显变化,RNAi+Aβ42组(0.33±0.02)明显降低(P<0.01);与Con+Aβ42组(0.64±0.03)相比,RNAi+Aβ42组(0.33±0.02)明显降低(P<0.01)。第叁部分CD147参与双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞的调节作用目的:以SH-SY5Y细胞为研究对象,通过感染LV-BSG-RNAi慢病毒干扰CD147蛋白表达,并预先给予DHT孵育后加入外源性Aβ42,检测细胞活力、形态、凋亡相关蛋白的表达变化,并观察细胞培养基上清中Aβ42的含量变化。探讨CD147在DHT抗Aβ42诱发细胞损伤中的作用。方法:1.干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞活力的作用实验选用融合度达60-70%的SH-SY5Y细胞,随机分为对照组(Con+Aβ42)、干扰组(RNAi+Aβ42)、对照+DHT组(Con+DHT+Aβ42)、干扰+DHT组(RNAi+DHT+Aβ42)。对照组加入阴性对照Con077慢病毒(1E+9 TU/ml),干扰组加入LV-BSG-RNAi慢病毒(8E+8 TU/ML)。感染3 d后,对照+DHT组、干扰+DHT组更换含100 n M DHT的无血清培养基,对照组、干扰组更换含等量DMSO的无血清培养基,作用6 h后各组均更换含10μM Aβ42无血清培养基作用24 h。酶标仪490 n M处检测细胞活力。2.Elisa检测干扰CD147表达对双氢睾酮调节SH-SY5Y细胞清除Aβ42的作用实验分组和给药方式同实验1。Elisa检测培养基中Aβ42的含量。3.光镜观察干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞形态的作用实验分组和给药方式同实验1。光镜观察SH-SY5Y细胞形态。4.荧光显微镜观察干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞胞核的作用实验分组和给药方式同实验1。荧光显微镜观察SH-SY5Y细胞胞核形态。5.Western blot检测干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞过程中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的作用实验分组和给药方式同实验1。Western blot检测干凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的水平。结果:1.干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞活力的作用MTS结果显示:与Con+Aβ42组(0.49±0.03)相比,RNAi+Aβ42组(0.34±0.02)明显降低(P<0.05),Con+DHT+Aβ42组(0.63±0.03)和RNAi+DHT+Aβ42组(0.56±0.03)有所增加(P<0.05);与RNAi+Aβ42组(0.34±0.02)相比,Con+DHT+Aβ42组(0.63±0.03)和RNAi+DHT+Aβ42组(0.56±0.03)明显升高(P<0.05);与Con+DHT+Aβ42组(0.63±0.03)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(0.56±0.03)有所下降减少(P<0.05)。2.干扰CD147表达对双氢睾酮调节Aβ42清除的作用Elisa结果显示:与Con+Aβ42组(65.40±4.16)相比,RNAi+Aβ42组(89.48±3.40)明显增高(P<0.01),Con+DHT+Aβ42组(35.37±4.32)和RNAi+DHT+Aβ42组(53.13±2.34)明显降低(P<0.01);与RNAi+Aβ42组(89.48±3.40)相比,Con+DHT+Aβ42组(35.37±4.32)和RNAi+DHT+Aβ42组(53.13±2.34)明显降低(P<0.01);与Con+DHT+Aβ42组(35.37±4.32)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(53.13±2.34)明显升高(P<0.01)。3.干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞形态的作用Con+Aβ42组部分细胞胞体回缩,失去折光性,胞质内出现颗粒,突起变细;RNAi+Aβ42组大部分胞体回缩聚集、呈近圆形或不规则形,失去折光性,胞质内出现颗粒,突起变细,部分细胞碎片;Con+DHT+Aβ42组细胞大部分呈梭形、叁角形,部分细胞胞体变圆回缩;RNAi+DHT+Aβ42组大部分胞体回缩变小、呈近圆形或不规则形,突起变细。4.干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞胞核的作用Hoechst33258染色显示,Con+Aβ42组细胞核部分缩小,染色质断裂,RNAi组核凝集显着增多,荧光强度逐渐增加;相对于Con+Aβ42组,预处理DHT后Con+DHT+Aβ42组核聚集减少;相对于RNAi+Aβ42组,预处理DHT后RNAi+DHT+Aβ42说核聚集略有减少,但仍多于Con+DHT+Aβ42组(图4)。5.干扰CD147表达对双氢睾酮抗Aβ42损伤SH-SY5Y细胞过程中凋亡相关蛋白的作用CD147的Western blot实验结果显示:与Con+Aβ42组(1.21±0.13)相比,RNAi+Aβ42组(0.40±0.07)、RNAi+DHT+Aβ42组(0.40±0.03)CD147明显减少(P<0.01),Con+DHT+Aβ42组(1.68±0.05)CD147有所增加(P<0.05);RNAi+Aβ42组(0.40±0.07)与RNAi+DHT+Aβ42组(0.40±0.03)间无明显变化;与Con+DHT+Aβ42组相比,RNAi+DHT+Aβ42组CD147明显减少(P<0.01)。Bax的Western blot实验结果显示:与Con+Aβ42组(0.41±0.04)相比,RNAi+Aβ42组(0.48±0.03)Bax表达水平升高(P<0.05),Con+DHT+Aβ42组(0.26±0.02)和RNAi+DHT+Aβ42组(0.34±0.03)Bax表达水平均降低(P<0.05);与RNAi+Aβ42组(0.48±0.03)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(0.34±0.03)Bax表达水平降低(P<0.05);与Con+DHT+Aβ42组(0.26±0.02)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(0.34±0.03)明显升高(P<0.05)。Bcl-2的Western blot实验结果显示:与Con+Aβ42组(0.91±0.02)相比,RNAi+Aβ42组(0.63±0.05)和RNAi+DHT+Aβ42组(0.77±0.05)Bcl-2表达水平降低(P<0.01),Con+DHT+Aβ42组(1.08±0.12)表达水平均升高(P<0.01);与RNAi+Aβ42组(0.63±0.05)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(0.77±0.05)Bcl-2表达水平升高(P<0.01);与Con+DHT+Aβ42组(1.08±0.12)相比,RNAi+DHT+Aβ42组(0.77±0.05)明显降低(P<0.01)。结论:1.双氢睾酮可以剂量依赖性引起SH-SY5Y细胞中CD147蛋白表达的增加,该作用可以部分被氟他胺所阻断。CD147基因DNA启动子区存在雄激素受体结合位点,说明双氢睾酮可能通过基因组途径促进SH-SY5Y细胞中CD147的表达。2.干扰CD147表达能够加剧Aβ42对SH-SY5Y细胞的毒性作用,进一步降低细胞活力、影响细胞形态、降低胞外Aβ42的清除、增加促凋亡蛋白Bax的表达、降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。提示CD147减少可能通过凋亡途径增加Aβ42作用下细胞的损伤。3.干扰CD147表达能够阻碍双氢睾酮抗Aβ42诱导SH-SY5Y细胞损伤,进一步降低细胞活力、影响细胞形态、降低胞外Aβ42的清除、增加促凋亡蛋白Bax的表达、降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。提示CD147减少可能通过凋亡途径阻碍双氢睾酮抗Aβ42诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-04-01）
王莹,李文媛,尹国华,李智刚,金在顺[5]（2018）在《二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响》一文中研究指出目的探讨二氢睾酮(DHT)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架移植坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体Trk B的表达和功能恢复的影响。方法 30只成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和DHT+ADSC组。坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经运动功能的恢复,Western印迹检测神经移植体内BDNF及其受体Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突表达,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,DHT+ADSC组神经移植体内BDNF和Trk B蛋白相对表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显着增高(P<0.05)。与ANA组比较,ADSC组和DHT+ADSC组电生理波幅明显增高、神经传导速度明显增快、延迟期明显缩短、胫前肌湿重比率明显增高,其中DHT+ADSC组神经恢复作用显着优于ADSC组(P<0.05),而且DHT+ADSC组SFI明显高于ANA组和ADSC组(P<0.05)。结论 DHT联合ADSC移植对小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与促进神经移植体内BDNF及其受体Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2018年06期）
王海东[6]（2018）在《双氢睾酮对Aβ降解酶NEP、CD147表达的影响》一文中研究指出目的:以大鼠海马组织及SH-SY5Y细胞为研究对象,通过免疫组织化学、Western blot、RT-PCR技术,观察去势、雄激素补充、细胞补充雄激素培养对NEP、CD147表达的影响。探讨雄激素在Aβ清除中的作用机制。方法:1自然衰老雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠海马内NEP、CD147的蛋白表达实验选用3月龄及20月龄健康雄性SD大鼠各5只,分3月龄组(3m)和20月龄组(20 m)。10%水合氯醛麻醉断头取脑,冰上快速剥离海马组织至于RIPA裂解液内,超声破碎后低温离心取上清。BCA法测定蛋白浓度、组织变性。SDS-聚丙烯酸氨凝胶电泳、转膜、孵育抗体。Odyssey红外激光扫描成像系统显影,以GAPDH为内参,测定两组蛋白相对表达水平。2去势及DHT补充对SD雄性大鼠海马组织中NEP、CD147表达的影响实验选用3月龄健康雄性SD大鼠72只,随机分假手术组(Sham组),去势组(GDX组)和去势+DHT补充治疗组(DHT)组,每组24只。DHT组及GDX组行去势手术,Sham组保留睾丸,3 d后DHT组大鼠给予腹腔注射DHT(5 ug/ul,注射剂量500 ug/kg.d),GDX组和Sham组给予等量玉米油腹腔注射。连续给药30 d。2.1 Elisa法检测血清DHT水平每组取12只SD大鼠,麻醉后断头取血静置后,3000 rpm 20 min离心取上清,-20℃保存待测,采用Elisa法检测血清DHT水平。剥离后海马组织取一侧放入EP管内置于液氮中备用。另一侧于超声粉碎机内粉碎,冰置5 min后,低温高速离心机分离,取上清约300 ul,备用。2.2 Western blot检测海马组织中雄激素受体(AR)、NEP、CD147的蛋白表达将2.1中一侧海马组织进行Western blot检测,分别孵育AR、NEP、CD147一抗,以GAPDH为内参测定各组中AR、NEP、CD147的相对表达水平。2.3 RT-PCR检测海马组织中NEP、CD147的mRNA表达将2.1中另一半海马组织进行RNA提取、反转录、聚合酶链式反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳,紫外线成像系统检测,以β-actin为内参测定两组RNA中NEP、CD147的相对表达水平。2.4免疫组织化学方法检测海马组织中NEP、CD147的表达每组取12只SD大鼠,麻醉后经心灌注多聚甲醛,断头取脑,选取视交叉至上丘节段脑组织进行石蜡切片,免疫组织化学染色分别孵育NEP、CD147一抗,DAB显色。正置显微镜下观察照相,观察阳性表达部位,测定平均光密度值(AOI)。3 DHT对SH-SY5Y细胞中NEP、CD147表达的影响DMEM-F12培养基、37℃、5%CO_2条件下培养SH-SY5Y细胞。随机分为对照组(Con组)及DHT干预组(DHT组),DHT组给予100 nM DHT作用12 h,对照组给予等量DMSO。利用免疫细胞荧光染色观察NEP、CD147在SH-SY5Y细胞中的表达及定位;RT-PCR和Western blot检测NEP、CD147的RNA和蛋白表达变化。结果:1.自然衰老雄性SD大鼠海马内NEP、CD147的蛋白检测结果NEP的Western blot结果显示:与3月龄组(0.54±0.04)相比,20月龄组(0.35±0.07)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的Western blot结果显示:与3月龄组(0.90±0.09)相比,20月龄组(0.59±0.12)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.去势及DHT补充对SD雄性大鼠海马组织中NEP、CD147表达的影响2.1血清DHT的Elisa结果与Sham组(845.89±81.26)相比,GDX组(47.89±7.47)血清DHT水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与GDX组(47.89±7.47)相比,DHT组(688.83±83.07)显着性升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.2 Western blot检测AR、NEP、CD147蛋白结果AR的Western blot检测结果显示:与Sham组(1.13±0.04)相比,GDX组(0.63±0.10)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.63±0.10)相比,DHT组(0.99±0.13)有所增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。NEP的Western blot检测结果显示:与Sham组(0.92±0.13)相比,GDX组(0.59±0.12)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.59±0.12)相比,DHT组(0.72±0.09)有所增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的Western blot结果显示:与Sham组(2.41±0.62)相比,GDX组(1.51±0.30)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(1.51±0.30)相比,DHT组2.04±0.29)有所升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.3 RT-PCR检测NEP、CD147的mRNA结果NEP的RT-PCR结果显示:与Sham组(0.78±0.08)相比,GDX组(0.50±0.09)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.50±0.09)相比,DHT组(0.63±0.07)有所升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的RT-PCR结果显示:与Sham组(0.70±0.09)相比,GDX组(0.41±0.08)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.41±0.08)相比,DHT组(0.65±0.06)有所升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.4免疫组织化学染色结果NEP染色结果:镜下观察可见海马CA1区、CA3区和齿状回弱表达NEP,在海马CA4区NEP阳性细胞表达显着增加,主要位于胞浆和轴突。CD147染色结果:镜下观察可见海马CA1区、CA3区、CA4区及齿状回均表达CD147,阳性反应部位主要位于胞浆、胞膜。NEP光密度值分析结果:(1)CA1区,与Sham组(0.098±0.010)相比,GDX组(0.081±0.006)的表达随有所降低,但无统计学差异(P>0.05);与GDX组(0.081±0.006)相比,DHT组(0.089±0.009)略有升高,但无统计学差差异(P>0.05)。(2)CA3区,与Sham(0.118±0.013)组相比,GDX组(0.076±0.011)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.076±0.011)相比,DHT组(0.086±0.012)有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。(3)CA4区,与Sham组(0.203±0.013)相比,GDX组(0.120±0.011)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.120±0.011)相比,DHT组(0.192±0.013)的蛋白水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147光密度值分析结果:(1)CA1区,与Sham组(0.248±0.017)相比,GDX组(0.197±0.012)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.197±0.012)相比,DHT组(0.236±0.017)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)CA3区,与Sham组(0.220±0.035)相比,GDX组(0.137±0.020)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.137±0.020)相比,DHT组(0.160±0.022)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)CA4区,与Sham组(0.189±0.013)相比,GDX组(0.145±0.012)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.145±0.012)相比,DHT组(0.155±0.011)有所升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.DHT对SH-SY5Y细胞中NEP、CD147表达的影响3.1 Western blot结果NEP的Western blot结果显示:与Con组(0.47±0.07)相比,DHT组(0.76±0.06)的蛋白水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的Western blot结果显示:与Con组(1.39±0.07)相比,DHT组(2.27±0.24)的蛋白水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.2 RT-PCR结果NEP的结果显示:与Con组(0.80±0.04)相比,DHT组(0.91±0.04)水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的结果显示:与Con组(1.05±0.05)相比,DHT组(1.41±0.06)水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.3免疫细胞荧光染色结果NEP的免疫细胞荧光化学染色结果显示:NEP在胞浆及轴突上表达;与Con组(0.145±0.015)相比,DHT组(0.250±0.045)表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的免疫细胞荧光化学染色结果显示:CD147在胞浆、胞膜及轴突上表达;与Con组(0.145±0.033)相比,DHT组(0.253±0.059)表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.雄性衰老SD大鼠海马组织中NEP、CD147蛋白表达水平降低。2.雄性SD大鼠去势后海马组织中AR、NEP和CD147表达水平降低,给予DHT补充治疗后,AR、NEP和CD147表达水平增加。3.DHT能增加SH-SY5Y细胞中NEP和CD147的表达。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-03-01）
王霞,魏荣芳,黄蔓旎,熊春萍,刘经纬[7]（2017）在《男性雄激素性脱发患者血清双氢睾酮水平的检测及治疗效果评估》一文中研究指出目的:探讨不同程度男性雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)患者的血清双氢睾酮(DHT)水平的差异,评价非那雄胺联合外用5%米诺地尔治疗男性AGA患者的疗效及研究影响AGA治疗效果的相关因素。方法:收集202例我院脱发专科门诊男性AGA患者及262例对照组,检测血清DHT水平,给予非那雄胺1 mg/d联合外用5%米诺地尔治疗,定期检测AGA患者DHT水平变化并进行疗效及相关性评估。结果:不同脱发程度患者的血清DHT水平之间差异无统计学意义。治疗3个月后患者血清DHT水平明显降低,定期随访患者中,发现疗效与患者年龄、治疗时间、脱发严重程度呈一定相关性,与家族史无明显相关性(P>0.05)。结论:DHT与男性AGA的发病密切相关,但患者血清DHT水平对脱发程度的影响较小。非那雄胺1 mg/d联合外用5%米诺地尔治疗男性AGA疗效肯定。患者早期就诊、坚持长期治疗可以起到良好的治疗效果。(本文来源于《广州医科大学学报》期刊2017年06期）
金石,元奎昌,李梦京,金铉顺[8]（2017）在《双氢睾酮诱导的多囊卵巢综合症合并动脉粥样硬化大鼠模型的建立》一文中研究指出目的建立多囊卵巢综合症(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)合并动脉粥样硬化(AS)大鼠模型。方法通过高脂饲料喂养长期颈后皮下埋置双氢睾酮(DHT)大鼠的方式建立PCOS合并AS大鼠模型,证明此模型不仅具有与PCOS类似的代谢异常;还合并了血脂增高、动脉光镜病理形态改变等动脉粥样硬化性改变。结果 DHT埋置组食物摄取量、体重、生殖激素水平、卵巢滤泡、血脂、血糖及胰岛素水平的变化符合PCOS代谢方面变化;笔者给PCOS大鼠(DHT埋置组)模型给于高脂饲料,而且于造模后12周,管壁明显增厚,内膜明显增厚,16周内皮细胞损伤脱落,深层胶原纤维暴露,有单核细胞黏附,可见动脉粥样硬化斑块。结论通过高脂饲料喂养DHT诱导的PCOS大鼠,建立PCOS合并AS大鼠模型,再现了人类的典型临床症状及病理特征,是研究多囊卵巢综合症合并动脉粥样硬化可行的动物模型。(本文来源于《中国解剖学会第六届全国解剖学技术学术会议论文汇编》期刊2017-08-07）
姜晓彤[9]（2017）在《CMKLR1基因缺失对双氢睾酮诱导雄性小鼠骨形成的影响》一文中研究指出骨质疏松症(Osteoporosis)是一种常见的骨代谢性疾病,随着社会的老龄化,该病的患病率正日益上升,严重影响着人类的健康。由于老年男性骨质疏松发病率的提高,雄激素对骨的作用机制成为人们关注的热点。成骨细胞、破骨细胞、骨细胞、骨髓间充质干细胞表面均有雄激素受体,雄激素对成骨细胞的调控是直接通过成骨细胞上的雄激素受体实现的。骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)是可以向不同类型的细胞发生转化的,其转化命运由细胞外信号分子调控。其中,细胞因子Chemerin其受体之一CMKLR1能够介导免疫、炎症、代谢、生殖及癌症方面的疾病。Chemerin与其受体CMKLR1协调作用可以促进骨髓间充质干细胞向脂肪细胞转化,而CMKLR1介导的信号通路在骨形成中的作用至今没有报道,本文主要阐释了双氢睾酮与CMKLR1信号通路对骨形成的影响。为了阐明DHT/CMKLR1信号通路对小鼠体骨髓间充质干细胞分化能力的影响以及对小鼠骨组织代谢的影响,本课题主要从体内试验和体外试验进行了探究。对于体内试验,我们对出生25天的C57雌鼠进行了分组,分为对照组、DHT组和DHT+α-NETA组,每组5只,处理21天后取股骨和胫骨进行骨组织micro-CT扫描分析,检测骨矿物质密度、骨小梁数和骨体积分数;用荧光定量的方法检测骨形成相关因子ALP、Runx2和Col1a2的表达,探究CMKLR1被拮抗后DHT对骨代谢的调控。对于体外试验主要是分离培养CMKLR1基因敲除鼠和野生型雄鼠的BMSCs,在DHT的诱导下观察BMSCs的成骨分化能力。并通过在野生型小鼠的BMSCs中添加CMKLR1的拮抗剂α-NETA及通过瞬时转染CMKLR1 siRNA来沉默CMKLR1,降低CMKLR1与Chemerin的结合,观察BMSCs的分化,通过碱性磷酸酶染色的方法检测ALP的活性,通过茜素红染色的方法检测钙结节的形成情况,通过荧光定量的方法检测成骨相关基因ALP、Runx2和Osterix表达的变化,用Western blot的方法检测Runx蛋白的变化。结果表明,在体内试验中DHT增加了骨密度、骨小梁数和骨体积分数,骨形成相关因子ALP、Runx2和Col1a2的表达也都上调;注射α-NETA后,各项指标都有所下降。体外培养诱导BMSCs的试验也显示,CMKLR1缺失后碱性磷酸酶的活性降低,钙结节形成减少,成骨相关基因的表达和Runx2蛋白都下调。因此,DHT可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,并促进成骨细胞的矿化,CMKLR1基因缺失则会抑制DHT对骨髓间充质干细胞的成骨分化作用,可能是通过调节成骨分化相关的maker基因Runx2、ALP等实现的,CMKLR1基因缺失,Chemerin/CMKLR1信号通路受到抑制,影响了雄激素对骨代谢的作用。(本文来源于《山东农业大学》期刊2017-04-28）
经华[10]（2017）在《Cx43在小鼠卵巢中的表达及黄体生成素和双氢睾酮对小鼠卵巢和大鼠颗粒细胞Cx43表达的影响》一文中研究指出缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)是哺乳动物卵巢卵泡颗粒细胞间表达最多的一种缝隙连接蛋白,在卵泡发育、卵母细胞生长等环节中发挥重要作用。卵泡颗粒细胞Cx43的表达受促性腺激素的调节,已经发现卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)可促进发育卵泡颗粒细胞Cx43的表达,加强颗粒细胞之间的缝隙连接。黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)是否具有促进Cx43表达的作用以及具体的作用机理,尚未明确。此外,雄激素在卵泡发育和女性生育调节过程中同样发挥重要作用,而雄激素对颗粒细胞Cx43表达的影响亦不明确。本研究以不同发育阶段的雌性C57小鼠和卵巢以及原代培养的大鼠颗粒细胞为材料,应用形态学,细胞生物学和分子生物学方法,研究小鼠生长发育过程中卵巢Cx43表达的模式,以及LH和双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)对小鼠卵巢和大鼠颗粒细胞Cx43表达的影响及可能的机理。实验结果显示,在小鼠卵巢中,Cx43表达于卵巢颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。随卵泡发育,颗粒细胞数量的增加,Cx43及LHR的表达明显增强。使用不同浓度的LH及DHT体外孵育小鼠卵巢,发现LH及DHT均可促进小鼠卵巢Cx43的表达。对于原代培养21d大鼠颗粒细胞,Cx43表达于颗粒细胞胞质和部分细胞膜上。LH和Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl均可增加颗粒细胞Cx43的表达,而使用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535,可减少LH诱导的Cx43表达。同样,使用DHT和Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl均可增加颗粒细胞Cx43的表达,使用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535后,可减少DHT诱导的Cx43表达。综上所述,我们得到如下结论:(1)小鼠自然生长状态下,随卵泡发育,颗粒细胞数量增加,Cx43及LHR表达明显增强;LH可能通过LHR调控卵泡颗粒细胞Cx43的表达。(2)适合浓度LH和DHT体外干预小鼠卵巢组织,可促进卵泡颗粒细胞Cx43表达,说明LH和DHT是Cx43表达的调控因素。(3)LH和DHT均可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进颗粒细胞Cx43表达。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2017-03-01）
睾酮和双氢睾酮论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:年龄相关的雄激素水平降低是老年男性迟发性性腺功能减退症的重要病因,患者除了表现性功能低下、代谢综合症等系统性症状外,往往伴随认知减退、焦虑等中枢神经系统异常,提示雄激素影响认知功能,但机制未完全阐明。脑内高糖状态是糖尿病脑病、阿尔兹海默
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
睾酮和双氢睾酮论文参考文献
[1].段立洁,王子高,祖恒兵.双氢睾酮对Aβ_(1-42)诱导的突触损害的保护作用[J].神经解剖学杂志.2019
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[3].包家娟.双氢睾酮梯度浓度变化对人毛乳头细胞及Wnt、凋亡通路的影响[D].广西医科大学.2019
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[5].王莹,李文媛,尹国华,李智刚,金在顺.二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响[J].中国老年学杂志.2018
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[7].王霞,魏荣芳,黄蔓旎,熊春萍,刘经纬.男性雄激素性脱发患者血清双氢睾酮水平的检测及治疗效果评估[J].广州医科大学学报.2017
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[10].经华.Cx43在小鼠卵巢中的表达及黄体生成素和双氢睾酮对小鼠卵巢和大鼠颗粒细胞Cx43表达的影响[D].宁夏医科大学.2017