NM23-M1基因的原核表达、抗体制备及其生物学活性的初步研究

论文摘要

近年,随着细胞生物学、分子肿瘤学、实验胚胎学、实验肿瘤学以及免疫胚胎学的发展,对胚胎发育与肿瘤形成的对比研究不断深入。大量的实验研究发现,在胚胎发育与肿瘤形成之间存在着诸多相似之处。这主要表现在肿瘤细胞与早期胚胎细胞均为发育学上的“年轻”细胞,拥有强大的生命力和旺盛的增殖与生长能力,有许多相同的基因表达（癌基因/抑癌基因、异位激素、异位同功酶、胚胎抗原等）,相似的血管形成和免疫逃逸机制,特别是肿瘤细胞侵袭与胚胎植入（滋养层细胞侵袭子宫内膜）,两者均具有活跃的侵袭细胞外基质能力。 虽然 nm23 基因是一个肿瘤转移抑制基因,但是其相关蛋白 NDPK 是一种广泛存在于细胞浆和细胞膜的多功能酶,具有复杂生物学功能。由此推断该基因在胚胎植入过程中可能也具有重要作用。 目 的: 本研究拟通过构建 nm23-M1 基因原核表达载体,制备抗 nm23-M1 多克隆抗体,并进一步对其在胚胎植入过程中的作用作初步的探讨。 方 法: 1.提取小鼠组织中的总 RNA,运用 RT-PCR 方法和基因克隆技术获得 nm23-M1 基因片段,将目的片段转入质粒载体 pQE30,构建pQE30/nm23-M1 重组子,用酶切和双向 DNA 测序进行鉴定。 2.把阳性重组子转入大肠杆菌表达宿主菌 SG13009 中,并对表达蛋白进行鉴定。用表达的重组蛋白免疫新西兰兔,获得抗 nm23-M1 抗体。 3.利用不同剂量的纯化的抗 nm23-M1 抗体对妊娠第 2 天（D2）的

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文 NM23-M1 基因原核表达，抗体制备及其活性的初步研究
• 前言
• 第一部分 NM23-M1 基因原核表达载体的构建、克隆及鉴定
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二部分 NM23-M1 基因在大肠杆菌中的高效表达及重组蛋白多克隆抗体的制备纯化
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 NM23-M1 基因在胚泡着床中的生物学效应的初步研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 参考文献
• 全文小结
• 文献综述 nm23 基因及其相关蛋白的生物学功用
• 附录
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 攻读硕士学位期间学术交流