复方芪竭膏对大鼠创伤模型愈合影响的实验研究

复方芪竭膏对大鼠创伤模型愈合影响的实验研究

论文摘要

目的:观察复方芪竭膏在大鼠创口皮肤愈合过程中的作用,探讨其促进创面愈合的作用机理。方法:建立大鼠创伤模型后分为3组,模型组(Model组),京万红阳性对照组(Control, JWH组),观察组复方芪竭膏组(CQJC组)各24只。各创面分别外敷各组油膏0.1 g:每日定时换药2次,单笼喂养。于造模后第3、7、10、14天观察记录创面局部的愈合情况并取材,记录完全愈合时间及造模后30天瘢痕面积。采用HE染色观察组织形态学变化、PCNA染色法观察各组大鼠创面肉芽组织中成纤维细胞数;CD31染色法观察各组大鼠创面肉芽组织中新生毛细血管数;采用SP免疫组化法测定肉芽组织中EGF、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Fn、Collagen—Ⅲ、EGFR含量;按照SP免疫组化法检测创面溶菌酶;采用TUNEL法作创面肉芽组织原位细胞凋亡检测。用图像分析仪及分析软件系统分析各组图像。实验所得数据均采用x±s表示,所有结果采用SPSS16.0统计软件进行统计学处理。结果:复方芪竭膏组各观察时间点创面愈合率、创面愈合时间、创面新生肉芽组织厚度、愈后瘢痕面积等指标均优于模型组;复方芪竭膏组和京万红组大鼠创面肉芽组织中新生毛细血管数、成纤维细胞数在术后第3、7、10天均较模型组明显增多(P<0.01)。复方芪竭膏组的EGF、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Fn、Collagen—Ⅲ、EGFR含量优于模型组和京万红组。复方芪竭膏组创面溶菌酶含量优于其他各组。在换药的第3、7d使用复方芪竭膏时,创面凋亡细胞明显增加,此后逐渐恢复至正常水平。结论:复方芪竭膏能够促进大鼠皮肤切口创面的愈合,减少瘢痕面积,提高愈合质量。其机制可能与早期促进新生毛细血管和成纤维细胞的增殖,促进了创面肉芽组织的生长,从而促进创面愈合。通过提高EGF、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Fn、Collagen—Ⅲ、EGFR的含量来提高胶原蛋白的含量以促进创面愈合。同时复方芪竭膏提高创面吞噬细胞溶菌酶含量、诱导细胞的主动凋亡可能有利于创伤早期创面的清创作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略词表
  • 目录
  • 序言
  • 第一章 复方芪竭膏对大鼠皮肤切口创面愈合的疗效观察
  • 1.引言
  • 2.材料和方法
  • 2.1 仪器、试剂
  • 2.2 实验用药物与制备
  • 2.3 实验动物
  • 2.3.1 实验动物分组
  • 2.3.2 实验动物模型的制备
  • 2.3.3 给药方法
  • 2.4 观察指标及检测方法
  • 2.4.1 大体观察
  • 2.4.2 局部观察
  • 2.4.3 组织学观察
  • 2.5 统计方法
  • 3.结果
  • 3.1 大体观察
  • 3.2 组织学HE描述
  • 3.3 创面愈合率比较
  • 3.4 创面愈合后瘢痕面积的比较
  • 3.5 创面愈合时间比较
  • 3.6 各组创面新生肉芽组织厚度的比较
  • 3.7 各组创面新生肉芽组织成纤维细胞数的比较
  • 3.8 各组创面新生肉芽组织毛细血管数的比较
  • 4.讨论
  • 4.1 中医学对创面愈合的病因病机认识
  • 4.2 中医学对创面愈合的外治疗法认识
  • 4.3 复方芪竭膏方解
  • 4.4 中医药在创伤愈合研究中的动物模型选择
  • 4.4.1 动物模型的选择原则
  • 4.4.2 创伤修复动物模型的建立
  • 4.4.3 在创伤愈合研究中的中医药动物模型选择
  • 4.5 创伤愈合的评价指标
  • 4.6 组织病理学分析
  • 4.7 血管再生
  • 5.结论
  • 第二章 复方芪竭膏对大鼠局部创面免疫调节作用的影响
  • 1.引言
  • 2.材料和方法
  • 2.1 动物及分组
  • 2.2 模型制备
  • 2.3 实验用受试药物加工、给药方法
  • 2.4 取材
  • 2.5 主要仪器
  • 1、Collagen-Ⅰ、Fn、Collagen—Ⅲ、EGFR含量的表达'>2.6 用S-P法测定EGF、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Fn、Collagen—Ⅲ、EGFR含量的表达
  • 2.7 统计学处理
  • 3.结果
  • 4.讨论
  • 5.结论
  • 第三章 复方芪竭膏对大鼠皮肤切口创面溶菌酶的影响
  • 1.引言
  • 2.材料和方法
  • 2.1 动物及分组
  • 2.2 实验动物模型制备
  • 2.3 实验用受试药物加工、给药方法
  • 2.4 取材
  • 2.5 主要仪器
  • 2.6 用S-P法测定溶菌酶(Lysozyme)的表达
  • 2.7 统计方法
  • 3.结果
  • 4.讨论
  • 4.1 巨噬细胞的功能
  • 4.2 巨噬细胞的调节作用
  • 5 结论
  • 第四章 复方芪竭膏对大鼠皮肤切口创面细胞凋亡的影响
  • 1.引言
  • 2.材料和方法
  • 2.1 动物及分组
  • 2.2 模型制备
  • 2.3 实验用试剂、受试药物加工、给药方法
  • 2.4 取材
  • 2.5 原位细胞凋亡检测(Tunel法)
  • 2.6 统计学处理
  • 3.结果
  • 4.讨论
  • 4.1 细胞凋亡与创伤愈合
  • 4.2 中药对细胞凋亡的影响
  • 5.结论
  • 全文结论
  • 问题和展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附件1 中医药在创伤修复领域的研究进展
  • 参考文献
  • 附件2 博士在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成绩
  • 附件3 论文附图
  • 附件4 声明
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