西兰花籽中硫代葡萄糖苷的分离及抗过敏活性研究

论文摘要

逆流色谱是一种不用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术，它可以实现连续高效的分离和制备。硫代葡萄糖苷（简称硫苷）是广泛存在于十字花科植物中的含硫次生代谢产物。此类化合物及其降解产物具有广泛的生物活性，不仅可以抑致细菌和微生物的生长，还具有很好的抗癌活性。因此，对硫苷的分离提纯及其结构鉴定在食品科学、生物医学等方面有着重要的实践意义。本论文应用逆流色谱技术分离西兰花籽中的硫代葡萄糖苷，为硫代葡萄糖苷的分离制备打下技术基础。本研究对逆流色谱分离西兰花籽中的硫代葡萄糖苷的溶剂系统进行了研究，找到了合适的溶剂系统正丁醇-乙腈-10％硫酸铵溶液（1：0．5：2．2）。采用柱容积1200 ml的HSCCC-D1200型高速逆流色谱仪分离粗提物，并经制备高效液相色谱等进一步纯化得到五种硫代葡萄糖苷单体：（Ⅰ）烯丁基硫苷（Ⅱ）4-戊烯基硫代葡萄糖苷（Ⅲ）3-甲基亚磺酰基正丙基硫代葡萄糖苷（Ⅳ）4-甲基亚磺酰基正丁基硫代葡萄糖苷（Ⅴ）7-甲基亚磺酰基正庚基硫代葡萄糖苷。它们的结构经ESI-MS和1HNMR、13CNMR进行了鉴定。在1ml含透明质酸酶（346U．／ml）的溶液中添加1mg化合物Ⅰ-Ⅶ（Ⅰ）烯丁基硫苷（Ⅱ）4-戊烯基硫代葡萄糖苷（Ⅲ）3-甲基亚磺酰基正丙基硫代葡萄糖苷（Ⅳ）4-甲基亚磺酰基正丁基硫代葡萄糖苷（Ⅴ）7-甲基亚磺酰基正庚基硫代葡萄糖苷，（Ⅵ）烯丙基硫代葡萄糖苷，（Ⅶ）4-甲基亚磺酰基-3丁烯基硫代葡萄糖苷测定它们对透明质酸酶的抑制试验结果表明：Ⅳ>Ⅶ>Ⅱ>Ⅴ>Ⅲ>Ⅰ>Ⅵ。高浓度下的抗过敏活性以及体内抗过敏活性试验有待于进一步研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 1.1 西兰花的研究现状
• 1.2 硫代葡萄糖苷的研究概况
• 1.2.1 硫代葡萄糖苷的结构及其分类
• 1.2.2 硫代葡萄糖苷的分布
• 1.2.3 硫代葡萄糖苷的分析方法
• 1.2.4 硫代葡萄糖苷的抗癌活性
• 1.2.5 硫代葡萄糖苷的抗过敏活性
• 1.3 逆流色谱技术概述
• 1.3.1 CCC工作原理
• 1.3.2 逆流色谱技术优点
• 1.3.3 逆流色谱溶剂系统的选择
• 1.4 选题背景及意义
• 1.5 西兰花研究中的不足和课题的研究目标及思路
• 1.6 本课题的项目来源
• 第二章 西兰花籽中硫苷类化合物的提取、分离及其纯化
• 2.1 西兰花籽中化学成分的提取
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.3 结果与讨论
• 2.2 HSCCC分离西兰花籽硫苷
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 方法
• 2.2.3 结果与讨论
• 2.2.4 小结
• 2.3 HPLC纯化硫代葡萄糖苷
• 2.3.1 材料
• 2.3.2 方法
• 2.3.3 结果与讨论
• 2.3.4 小结
• 第三章 结构鉴定
• 3.1 材料与仪器
• 3.2 方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.4 小结
• 第四章 抗过敏活性
• 4.1 材料
• 4.2 实验原理——透明质酸酶体外抑制实验（Morgan-Elson法）
• 4.3 实验方法—透明质酸酶体外抑制实验（Morgan-Elson法）
• 4.4 结果与讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 波谱附图
• 符号说明
• 硕士期间发表论文
• 致谢