TLR信号途径对肿瘤细胞增殖的影响

论文摘要

目的本文拟研究HSP70对小鼠肝癌细胞H22和人乳腺癌细胞MCF-7的增殖能力的影响,以探讨TLR信号通路对肿瘤细胞增殖可能的机制。方法（1）分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,RT-PCR检测TLR2和TLR4 mRNA的表达。（2）分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,作用不同时间后,Western blot检测GSK3β信号。（3）分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,Western blot检测β-catenin的表达。（4）HSP70刺激MCF-7细胞3天,RT-PCR检测cyclinD1a、cyclinD1b mRNA水平。（5）LPS和HSP70分别刺激H22细胞2天,Western blot检测HMGB1的表达。（6）体外分别加LPS和HSP70培养H22细胞和MCF-7细胞,采用细胞计数方法检测细胞增殖。（7）用丝裂霉素处理CFSE标记的H22细胞,同时分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,流式细胞术检测增殖速度。（8）以LPS和HSP70处理过的H22细胞接种于昆明小鼠右后腿肌肉内,建立实验性小鼠肝癌模型,并通过比较肿瘤瘤重及成瘤时间观察LPS及HSP70对H22细胞成瘤能力的影响。结果（1）LPS、HSP70刺激H22细胞后,TLR-2、TLR-4的表达均明显增加。（2）随LPS及HSP70刺激H22细胞时间增加,磷酸化的GSK3β表达增加,而非磷酸化的GSK3β的总量没有变化。（3）经LPS、HSP70分别刺激H22细胞24小时后,β-catenin的表达均明显增加。（4）LPS、HSP70处理细胞后,cyclinD1a表达上调。（5）LPS和HSP70刺激H22细胞2天后,HMGB1表达上调。（6）LPS和HSP70处理的H22细胞和MCF-7细胞,增殖速度与对照组相比明显加快。（7）用丝裂霉素处理H22细胞后,分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,增殖速度均比对照组快。（8）LPS和HSP70处理2天的H22细胞接种小鼠,成瘤速度及瘤重均高于对照组。结论LPS和HSP70可通过激活TLR信号通路,进一步激活Wnt信号通路,提高肿瘤细胞的增殖速度。

论文目录

• 缩略词及中英文对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢