论文摘要
目的根据骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化位点特异性,应用小鼠骨膜提取物来诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化,观察其诱导分化的情况。方法将小鼠颅骨骨膜提取物与小鼠骨髓间充质干细胞体外共培养,诱导小鼠骨髓间充质干细胞向类成骨细胞分化。实验分为对照组（单纯BMSCs）和实验组（骨膜提取物诱导分化的细胞）,应用倒置显微镜观察诱导后细胞形态的变化;应用碱性磷酸酶（ALP）染色法检测诱导分化后细胞的成骨活性;应用免疫印迹技术检测BMP-2蛋白的表达情况;应用RT-PCR方法检测BMP-2、Ⅰ型胶原、骨钙素基因的表达情况。结果形态学观察显示,BMSC细胞呈梭形,骨膜诱导分化后变成三角形、多角形、立方形;ALP活性结果显示,诱导分化后ALP活性远高于BMSC细胞,约为其六倍,两者差异具有显著统计学意义（P<0.01）;蛋白印迹结果显示,BMSC细胞组不表达BMP-2蛋白,经骨膜提取物诱导分化后BMP-2蛋白表达增高,两组差异有显著统计学意义（P<0.01）;RT-PCR结果表明,小鼠BMSC细胞不表达BMP-2、Ⅰ型胶原、骨钙素基因。经骨膜提取物诱导分化后可以检测到BMP-2（708bp）、Ⅰ型胶原（222bp）、骨钙素（219bp）基因的表达。β-actin为内参。结论骨膜提取物可以诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为类成骨细胞,分化的细胞具有成骨细胞的特性,此方法简单易行,并且分化效果很好,为骨组织工程提供一种新的类成骨细胞培养方法。
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标签：骨髓间充质干细胞论文; 骨膜提取物论文; 诱导分化论文; 成骨细胞论文;