论文摘要
目的:研究异鼠李素对H2O2所致人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化性损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,用MTT法筛选H2O2致细胞损伤的最佳浓度,在模型的基础上,用MTT法测定异鼠李素对内皮细胞相对活力的影响;ELISA法检测内皮细胞培养液t-PA和PAI-1含量;RT-PCR技术测定PAI-1 mRNA的相对表达;ELISA法检测内皮细胞培养液vWf和TM含量;流式细胞仪测定内皮细胞坏死率和平均荧光强度的变化;荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中LDH的含量;Western Blot法测定内皮细胞caspase-3的活性;共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子浓度的变化。结果:与H2O2损伤后的模型组相比,异鼠李素可以抑制PAI-1的分泌,升高t-PA和PAI-1的比值,并能下调PAI-1mRNA的表达;异鼠李素可以使培养液中vWf和TM含量减少,降低内皮细胞坏死率和平均荧光强度,减少培养液中LDH的含量;异鼠李素可以降低caspase-3活性,减少细胞内游离钙离子浓度的增加幅度。结论:异鼠李素具有内皮细胞保护作用,其保护作用机制与其抑制细胞内钙离子浓度的升高和其降低caspase-3的活性有关。
论文目录
中英文名词术语对照Abstract摘要前言实验材料1 细胞系2 药物与试剂3 实验仪器4 药品及试剂配制实验方法1 人脐静脉血管内皮细胞株ECV304 的培养1.1 细胞的复苏1.2 细胞的传代培养1.3 细胞的冻存2O2 所致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用'>2 异鼠李素对H2O2所致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用2O2所致内皮细胞损伤的浓度筛选'>2.1 MTT 法对H2O2所致内皮细胞损伤的浓度筛选2O2损伤后内皮细胞相对活力的影响'>2.2 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞相对活力的影响2O2损伤后内皮细胞培养液中t-PA 和PAI-1 的含量'>2.3 ELISA 法检测H2O2损伤后内皮细胞培养液中t-PA 和PAI-1 的含量2.4 RT-PCR 测定PAI-1 mRNA 的相对表达2O2损伤后内皮细胞培养液中vWf 含量'>2.5 ELISA 法检测H2O2损伤后内皮细胞培养液中vWf 含量2O2损伤后内皮细胞培养液中TM 含量'>2.6 ELISA 法检测H2O2损伤后内皮细胞培养液中TM 含量2O2损伤后内皮细胞坏死率和平均荧光强度'>2.7 流式细胞仪检测H2O2损伤后内皮细胞坏死率和平均荧光强度2O2损伤后内皮细胞培养液中LDH 的含量'>2.8 测定H2O2损伤后内皮细胞培养液中LDH 的含量2O2损伤后内皮细胞caspase-3 活性'>2.9 Western Blot 法测定H2O2损伤后内皮细胞caspase-3 活性2.10 共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子3 数据统计：应用SPSS13.0 软件进行数据统计分析实验结果1 内皮细胞形态观察2O2所致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用'>2 异鼠李素对H2O2所致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用2O2损伤内皮细胞形态学观察'>2.1 H2O2损伤内皮细胞形态学观察2O2致内皮细胞损伤的浓度筛选'>2.2 MTT 法对H2O2致内皮细胞损伤的浓度筛选2O2损伤后内皮细胞相对活力的影响'>2.3 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞相对活力的影响2O2损伤后内皮细胞培养上清t-PA 和PAI-1 含量的影响'>2.4 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞培养上清t-PA 和PAI-1 含量的影响2O2损伤后内皮细胞PAI-1 mRNA 的相对表达的影响'>2.5 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞PAI-1 mRNA 的相对表达的影响2O2损伤后内皮细胞培养上清vWf 含量的影响'>2.6 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞培养上清vWf 含量的影响2O2损伤后内皮细胞培养上清TM 含量的影响'>2.7 异鼠李素对H2O2损伤后内皮细胞培养上清TM 含量的影响2O2 损伤后内皮细胞坏死率和平均荧光强度的影响'>2.8 异鼠李素对 H2O2损伤后内皮细胞坏死率和平均荧光强度的影响2O2 损伤后内皮细胞培养上清中 LDH 含量的影响'>2.9 异鼠李素对 H2O2 损伤后内皮细胞培养上清中 LDH 含量的影响2O2 损伤后内皮细胞 caspase-3 活性的影响'>2.10 异鼠李素对 H2O2 损伤后内皮细胞 caspase-3 活性的影响2O2 致胞内钙离子浓度升高的影响'>2.11 异鼠李素对 H2O2致胞内钙离子浓度升高的影响讨论结论参考文献致谢综述个人简历
相关论文文献
标签：异鼠李素论文; 内皮细胞损伤论文; 保护作用论文;
