论文题目: 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体对人膀胱癌治疗作用的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 王绍勇
导师: 马庆铮
关键词: 质粒,膀胱移行细胞癌,细胞凋亡,顺铂,裸鼠
文献来源: 山东大学
发表年度: 2005
论文摘要: 第一部分 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（TRAIL）基因克隆及真核表达质粒构建 目的:采用RT-PCR方法获得全长cDNA,并构建其真核表达质粒pcDNA3.1-TRAIL。 方法:收集3x106个Jurkat淋巴瘤细胞,Trizol试剂提取总RNA。经RT-PCR反转录,将细胞总RNA中的mRNA反转录成cDNA第一链,以cDNA为模板,dNTP,Taq酶等进行PCR反应,产物经琼脂糖凝胶电泳初步鉴定,经DNA凝胶回收试剂盒回收纯化后进一步测序证实。 上游引物为:5′AGAATTCAGGATCATGGCTATGATGG3′,5′含有EcoRI的酶切位点 下游引物为:5′GAAGCTTCCAGGTCAGTTAGCCAACT3′,5′含有Hind Ⅲ的酶切位点 PCR产物经EcoRI、HindⅢ酶切后,回收酶切产物。插入经同样酶切的质粒PcDNA3.1中,T4DNA连接酶连接过夜,构建成真核表达质粒PcDNA3.1-TRAIL。PcDNA3.1-TRAIL经酶切后,电泳鉴定。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
符号说明
背景介绍
第一部分 TRAIL基因克隆及真核表达质粒构建
前言
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
第二部分 TRAIL对人膀胱癌体外作用的实验研究
前言
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
第三部分 TRAIL对人膀胱癌体内作用的实验研究
前言
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
附图
致谢
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学位论文评阅及答辩情况表
发布时间: 2005-10-17
参考文献
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