论文摘要
盐酸克仑特罗（Clenbuterol Hydrochloride）为强效的选择性肾上腺素β2受体激动剂，能舒张支气管平滑肌，用于缓解支气管哮喘以及慢性喘息型支气管炎所致的支气管痉挛。我们综合了药物本身的理化性质以及哮喘的发病特点，研制了盐酸克仑特罗快／慢双相释药系统（Clenbuterol Hydrochloride Immediate／SustainedBiphasic Delivery System，CH-ISBDS）。本释药系统为一双层片剂，由盐酸克仑特罗速释层（Clenbuterol Hydrochloride Immediate Release Component，CH-IRC）和盐酸克仑特罗缓释层（Clenbuterol Hydrochloride Sustained Release Component，CH-SRC）组成。舌下含服后，CH-IRC迅速释放有效剂量的药物，用于缓解症状，减小哮喘发作带给病人的痛苦；待数分钟哮喘缓解后用适量温水吞服，CH-SRC缓慢释放剩余剂量药物，用于维持有效血药浓度，减少给药次数和降低副作用，提高病人用药的顺应性。本文首先对盐酸克仑特罗的紫外吸收光谱、溶解度、溶液稳定性和辅料相容性作了研究，盐酸克仑特罗在215nm处有最大吸收；溶解度实验提示盐酸克仑特罗为水溶性药物；溶液稳定性实验表明盐酸克仑特罗在水、0．1mol·L-1盐酸溶液和pH6．8 PBS中24小时稳定；辅料与主药的相容性试验证实盐酸克仑特罗原料药与所用辅料无相互作用。建立液相色谱法用于CH-ISBDS含量和体外释放度测定。在0．05～0．5μg·mL-1范围内药物浓度与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为100．5％，RSD为0．5％，日内日间精密度的RSD<2％。同时，本文还考察了释放介质、搅拌速度和释放方法对CH-ISBDS体外释放的影响，确定释放方法为转篮法，释放介质为250mL去离子水，搅拌速度为100rpm。在处方设计与工艺研究中，首先考察了CH-IRC拟用辅料的流动性和口感，崩解剂的崩解特性。在此基础上以崩解时间为判断标准，应用正交设计优化了CH-IRC的处方，其中含60％甘露醇、5％PVPP-XL和35％Cellactose?，所压制的CH-IRC体外崩解时间约为33秒；以HPMC和EC为混合骨架制备CH-SRC，以体外释放度为考察指标，对所用辅料和工艺进行了单因素考察，结果表明：HPMC的用量、EC的用量和CMS-Na的用量对药物的释放有较大影响。应用正交实验设计优化HPMC、EC和CMS-Na的用量分别为40％、30％和5％，制备CH-SRC的方法为湿法制粒压片。CH-ISBDS体外0．1、2、5、10小时的释放百分率分别为标示量的20％～40％、40％～60％、60％～80％和80％以上。本文采用零级、一级和Higuchi方程对CH-ISBDS的体外释放曲线进行拟合，结果表明：0～12小时的体外释放曲线符合一级方程（R2=0．9878）；1～12小时的体外释放曲线符合零级方程（R2=0．9851），呈明显的双相控制释放特征。CH-SRC的体外释放曲线符合零级方程（R2=0．9923）；用Ritger-Peppas方程（R2=0．9880）阐明了CH-SRC在0～12小时内的释放机理为不规则转运（n=0．5155）。另外，对CH-ISBDS进行了初步稳定性考察，结果提示稳定性良好。在建立LC-MS／MS方法测定血药浓度的基础上，以市售普通片为对照，对CH-ISBDS进行了Beagle犬体内药物动力学研究。单剂量给药后，CH-ISBDS的t1／2为7．02±1．53 h，Cmax为5．49±0．98 ng·mL-1，tmax为5．17±0．98 h，AUC0～t为53．84±13．27ng·h·mL-1；市售普通片的t1／2为4．47±1．01 h，Cmax为9．84±1．61 ng·mL-1，tmax为2．33±0．52 h，AUC0～t为54．01±16．44 ng·h·mL-1，单剂量给药的相对生物利用度为101．0±6．0％。方差分析和双单侧t检验结果提示：CH-ISBDS和市售普通片的lnAUC0～24无显著性差异（p>0．05）；lnCmax有显著性差异（p<0．05）。生物等效性评价提示：CH-ISBDS与市售普通片在吸收程度上生物等效；与市售普通片相比，CH-ISBDS血药浓度变化平稳，释药时间较长，达峰时间延迟，峰浓度降低，表明其具有良好的缓释效果。经逆卷积分法计算可知CH-ISBDS体内外相关性良好（r=0．9693）。