小茴香对实验性肝纤维化大鼠细胞因子的影响

论文摘要

目的观察小茴香治疗四氯化碳（CCL4）和乙醇诱导的实验性肝纤维化大鼠后,对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）表达水平的影响,初步探讨其作用机制。方法用40 %CCl4石蜡油（0.2ml 100g-1/只）腹腔注射（每周两次）,10%乙醇为唯一饮料制造肝纤维化模型。70只wistar健康大鼠随机分正常对照组（A）、模型组（B）、秋水仙碱治疗组（C,0.02mg /天）、小茴香低剂量治疗组（D,0.05g/天）、小茴香中剂量治疗组（E,0.1g/天）、小茴香高剂量治疗组（F,0.2g/天）。造模四周,再经小茴香灌胃治疗八周后,处死动物。免疫组化方法、酶联免疫吸附法（ELISA）检测TNF-α、TGF-β1和CTGF在肝组织和血清中的含量。酶联免疫斑点技术（ELISPOT）检测单个细胞分泌TNF-α的含量。结果形态学显示:经小茴香治疗后可肝细胞脂肪变性程度减轻,纤维化程度降低。免疫组化结果显示:细胞因子TNF-α、TGF-β1和CTGF在秋水仙碱治疗组（C）、小茴香各治疗组（D、E、F）中阳性细胞染色程度较模型组减轻,阳性细胞数目减少。ELISA结果显示:TNF-α、TGF-β1和CTGF与正常对照组和模型组比较均降低,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组和各治疗组比较差异均有统计学意义（P<0.05）,其中小茴香高剂量治疗组降低TNF-α、TGF-β1和CTGF的作用高于中﹑低剂量组（P<0.05）。ELISPOT法检测单个核细胞分泌的TNF-α结果显示:正常对照组（76±38.1）与模型组（663.5±162.6）比较,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组与各治疗组比较差异均有统计学意义（P<0.05）;小茴香高剂量治疗组（191.4±43.1）与秋水仙碱治疗组（296.2±72.5）、小茴香低剂量治疗组（271.1±67.6）、小茴香中剂量治疗组（292.5±89.8）比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论小茴香低﹑中﹑高剂量治疗组均有减少促进肝纤维化的细胞因子（TNF-α、TGF-β1和CTGF）分泌,抑制和改善肝纤维化的作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 1. 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 研究用药物
• 1.3 试剂
• 1.4 主要仪器设备
• 1.5 主要试剂配制
• 2. 方法
• 2.1 动物的处理
• 2.2 常规病理标本的制备
• 2.3 HE 染色
• 2.4 免疫组化染色
• 2.5 ELISA 法检测大鼠TNF-α、TGF-β1 和CTGF
• 2.6 ELISPOT 法检测
• 3. 统计学分析
• 结果
• 1.大鼠的一般情况
• 2.大鼠肝组织病理学结果
• 3.免疫组化结果
• 4.大鼠血清细胞因子 ELISA 法检测结果
• 5.ELISPOT 法检测单个细胞分泌 TNF-α 结果
• 讨论
• 1.小茴香对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响及机制
• 2.小茴香对转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响及机制
• 3.小茴香对结缔组织生长因子（CTGF）的影响及机制
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述 细胞因子在肝纤维化中的作用
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表