尖吻蝮蛇毒论文-肖纲,刘俊琦,夏雨,张志阳,孙志良

尖吻蝮蛇毒论文-肖纲,刘俊琦,夏雨,张志阳,孙志良

导读:本文包含了尖吻蝮蛇毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:尖吻蝮蛇蛇毒,SDS–PAGE,Nano–LC–ESI–MS,MS,蛇毒金属蛋白

尖吻蝮蛇毒论文文献综述

肖纲,刘俊琦,夏雨,张志阳,孙志良[1](2019)在《湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白组分及毒性分析》一文中研究指出采用Nano–LC–ESI–MS/MS蛋白鉴定技术对湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行质谱分析,应用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对尖吻蝮蛇蛇毒LD_(50)进行测定。结果显示:尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子质量集中在1.0×10~4~2.0×10~4(46.9%)、4.0×10~4~5.0×10~4(22.4%)、2.0×10~4~3.0×10~4(10.6%)和7.0×10~4~8.0×10~4(7.6%),其中代表性的高丰度蛋白有蛇毒金属蛋白酶A(11.7%)、蛇毒金属蛋白酶H1(9.8%)、蕲蛇类凝血酶–2(7.3%)、抗凝血酶A–A亚基(6.8%),低丰度蛋白(<0.1%)有Ecto–5'–核苷酸酶、碱性磷脂酶A2 DAV–N6、生长分化因子11;蛇毒引起红细胞溶血的最低质量浓度为60.00μg/mL,尖吻蝮蛇蛇毒对KM小鼠的LD_(50)为7.1796mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安、注射部位出现奇特瘙痒和大面积溃烂,至死亡。(本文来源于《湖南农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期)

肖纲,刘俊琦,张志阳,夏雨,孙志良[2](2019)在《湖南尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分分析及毒性探索性研究》一文中研究指出[目的]尖吻蝮蛇蛇毒具有极强的毒性,其含有多种不同生物学活性的蛋白质、多肽、酶等。本研究旨在通过对湖南省永州市尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白成分分析和毒性进行初步探索研究,为湖南尖吻蝮蛇蛇毒的毒性及医药应用提供重要的参考依据。[方法]本研究采用Nano-LC-ESI-MS/MS技术对湖南尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行定性分析,采用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对KM小鼠单剂量皮下注射尖吻蝮蛇蛇毒的LD_(50)进行测定。[结果]结果显示尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子量主要在10-50KD,其中高丰度蛋白质为蛇毒金属蛋白、类凝血酶和抗凝血酶;尖吻蝮蛇蛇毒引起体外红细胞溶血的最低浓度为0.06mg/mL,对KM小鼠的LD_(50)为7.18mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安,注射部位出现奇特瘙痒,反复抓挠,至注射部位出现大面积溃烂,直至死亡。[结论]根据本研究从尖吻蝮蛇蛇毒中鉴定出的50种蛋白,体外溶血值和LD_(50)的准确测定,可对尖吻蝮蛇蛇毒中发挥重要作用的蛋白有初步的判断,可为进一步研究尖吻蝮蛇蛇毒的毒理机制提供宝贵的基础数据。本研究为湖南尖吻蝮蛇蛇毒毒性评价及药用开发与利用奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13)

熊艳,李博,和七一,余晓东[3](2019)在《尖吻蝮蛇毒对人卵巢癌A2780细胞的抑制作用研究》一文中研究指出【目的】研究尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒对人卵巢癌A2780细胞(后简称A2780细胞)形态学特征、细胞增殖活力及粘附能力的影响。【方法】采用倒置荧光显微镜观察在不同质量浓度和时间条件下,尖吻蝮蛇毒对A2780细胞形态学特征的影响;采用CCK-8法检测细胞增殖率的变化,使用细胞计数法检测尖吻蝮蛇毒对细胞粘附能力的影响。【结果】当尖吻蝮蛇毒质量浓度为3.125μg·mL-1时,A2780细胞出现少量皱缩、变圆、凋亡的现象;随着尖吻蝮蛇毒质量浓度增加,细胞凋亡的现象愈加明显。当用50μg·mL-1的尖吻蝮蛇毒处理A2780细胞1h后,被处理细胞出现少量皱缩、变圆现象;12h后,被处理细胞粘连成团,出现大量凋亡现象。在3.125~200μg·mL-1范围内,随着尖吻蝮蛇毒质量浓度的增加,A2780细胞增殖活力逐渐减弱,且呈明显剂量依赖关系。当用3.125μg·mL-1的尖吻蝮蛇毒处理A2780细胞时,细胞粘附率降为78.26%;当蛇毒质量浓度为25μg·mL-1时,细胞粘附率降为不足10%。【结论】尖吻蝮蛇毒可明显影响A2780细胞的形态学特征,抑制该细胞的增殖活力以及粘附能力。(本文来源于《重庆师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期)

向柏林,熊艳,陈春妮,龙敏,朱晓艳[4](2019)在《蛇莓乙醇提取物抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶活性初探》一文中研究指出【目的】初步探究蛇莓(Duchesnea indica)对尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒蛋白水解酶的抑制作用。【方法】采用不同极性有机溶剂对蛇莓乙醇提取物进行分级萃取,结合硅胶薄层层析(TLC)进行分离,再利用气相色谱-质谱法(GCMS)对抑制蛋白水解酶作用最强的活性部位进行组分分析。【结果】乙酸乙酯萃取相具有较强的抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶活性;经硅胶TLC分离从中获得条带1、条带2、条带3和条带4共4个条带,且条带4的尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶抑制活性最强。通过GC-MS分析检测出条带4中存在15种成分,其中2,4-二叔丁基苯酚、正十六烷酸、十八烷酸、十六烷酸,2-羟基-1-(羟甲基)乙酯、硬脂酸-2-羟基-1-(羟甲基)乙酯和10,13-十八碳二炔酸甲酯可能与抑制蛇毒活性相关。【结论】蛇莓中存在抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶的功效组分,可以作为蛇伤药物开发的资源。(本文来源于《重庆师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年03期)

陈典成,和七一,刘锦花,谭佳,罗聪[5](2019)在《石柑子水提物对尖吻蝮蛇毒活性抑制作用的初步研究》一文中研究指出【目的】寻找用于治疗尖吻蝮(Agkistrodon acutus)咬伤的中草药石柑子(Pothos chinensis)的药效实验证据。【方法】将制备所得石柑子水提物与尖吻蝮蛇毒混合孵育40min,检测混合液中蛇毒的磷脂酶A2活性、透明质酸酶活性、蛋白水解酶活性、出血活性、凝血活性和致死活性。【结果】石柑子水提物对尖吻蝮蛇毒的磷脂酶A2活性、透明质酸酶活性、蛋白水解酶活性、出血活性、凝血活性和致死活性都有明显抑制作用。【结论】研究结果初步证实了石柑子对尖吻蝮咬伤具有治疗效果。(本文来源于《重庆师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期)

熊艳,李恒,余晓东,龙敏,陈春妮[6](2018)在《小叶叁点金不同萃取相对尖吻蝮蛇毒主要酶类的抑制作用》一文中研究指出【目的】考察小叶叁点金(Desmodium microphyllum)乙醇提取物不同萃取相对尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)毒主要酶类的抑制作用。【方法】采用不同极性溶剂对小叶叁点金乙醇提取物进行萃取,检测各萃取相对尖吻蝮蛇毒中蛋白水解酶、磷脂酶A2、透明质酸酶和类凝血酶的抑制作用,再结合气相色谱-质谱法(GC-MS)对抑制作用最强的萃取相进行组分分析。【结果】乙酸乙酯萃取相能够明显抑制尖吻蝮蛇毒中的蛋白水解酶、磷脂酶A2和透明质酸酶和类凝血酶的活性,经GC-MS分析检测出26种成分,其中正十六烷酸、十八碳烯酸、豆甾醇和谷甾醇具有抑制蛇毒活性的作用。【结论】小叶叁点金醇提物乙酸乙酯萃取相对尖吻蝮蛇毒中主要酶类具有明显抑制作用,能够作为有效部位用于抗蛇毒功效组分的筛选研究。(本文来源于《重庆师范大学学报(自然科学版)》期刊2018年06期)

和七一,余晓东,李博,熊艳,肖静[7](2018)在《小叶叁点金醇提物对尖吻蝮蛇毒的抑制作用》一文中研究指出研究小叶叁点金Desmodium microphyllum醇提物对尖吻蝮蛇Deinagkistrodon acutus蛇毒的抑制作用。将尖吻蝮蛇毒与不同比例小叶叁点金醇提物在37℃下孵育30 min,检测对蛇毒中主要酶活力以及体内毒性的抑制作用。小叶叁点金醇提物对尖吻蝮蛇毒中蛋白水解酶、磷脂酶A2、透明质酸酶以及纤维蛋白原水解酶均具有明显的抑制作用,对尖吻蝮蛇毒引起的小鼠出血、水肿、组织坏死以及致死毒性具有显着的中和作用,且呈剂量效应关系。首次证实了小叶叁点金具有抑制尖吻蝮蛇毒的功效,为小叶叁点金在蛇伤治疗中的应用提供了理论依据。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2018年04期)

杨惠琼[8](2018)在《高压氧辅助抗蛇毒血清治疗尖吻蝮蛇咬伤的临床疗效观察》一文中研究指出目的:观察HBO辅助抗蛇毒血清治疗尖吻蝮蛇咬伤的疗效,探讨HBO辅助抗蛇毒血清治疗尖吻蝮蛇咬伤的临床价值,为HBO在蛇咬伤的临床应用提供依据。方法:回顾性分析我院收治的尖吻蝮蛇咬伤病例临床资料。共纳入61例,根据入院后是否行HBO治疗,分为对照组:抗蛇毒清组(31例),观察组:HBO辅助抗蛇毒血清组(30例)。分析两组治疗前后的Cr、BUrea、APTT、PT、TT、FIB、ALT、AST、CK、CK-MB、LDH、WBC、PLT、Mb、CRP等指标,并对比两组临床疗效。结果:1.两组患者性别、年龄、肿胀程度、病情严重程度差异无统计学意义(P>0.05);2.治疗前,两组患者的实验室指标差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的Cr、BUrea、APTT、TT、ALT、AST、CK、CK-MB、LDH、WBC、Mb、CRP均有所降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05),PT治疗前后两组无差异(P>0.05);PLT、FIB升高,且观察组PLT较对照组升高明显(P<0.05),FIB治疗前后两组无差异(P>0.05);3.观察组一周治愈率(73.33%)高于对照组(45.16%)(P<0.05);观察组病情好转、伤口愈合时间较对照组缩短(P<0.05)。结论:HBO辅助抗蛇毒血清治疗尖吻蝮蛇咬伤对肾脏、凝血功能有保护作用,可有效缩短病情好转、伤口愈合时间,提高一周治愈率,是辅助治疗尖吻蝮蛇咬伤行之有效的方法。(本文来源于《遵义医学院》期刊2018-05-01)

靳文[9](2018)在《尖吻蝮蛇毒PCA影响HUVEC分泌TF的机制研究》一文中研究指出目的:探讨信号通路核转录因子-κB(NF-κB)、激活蛋白-1(AP-1)在蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达组织因子(TF)过程中的作用。方法:HUVEC体外常规培养,进行实验分组,分别是空白对照组、PCA组、LPS组和PCA+LPS组。DMEM完全培养基直接加入至空白对照组,浓度为1.25μg/ml的PCA溶液加入PCA组,LPS组加入0.1μg/ml LPS溶液,浓度为1.25μg/ml PCA和0.1μg/ml LPS的混合液加入到PCA+LPS组。培养12h后,直接在荧光倒置显微镜下观察内皮细胞形态,Hoechst33258检测PCA作用后细胞核的形态变化,MTT法检测HUVEC活力,免疫组化法检测TRAF6蛋白在细胞中的分布,免疫荧光染色检测核转录因子NF-κB是否被激活-核转运,Western blot检测细胞内NF-κB p65、FOS、JUN和TF蛋白的表达,qPCR测定TF的mRNA在HUVEC的表达,ELISA检测细胞培养上清中TF的含量。结果:1.PCA对细胞结构形态及生长增殖性的影响倒置显微镜直接观察细胞形态发现,对照组HUVEC为椭圆、多变或梭形,边界清楚,胞质饱满,呈铺路石状均匀贴壁生长。与对照组比较,LPS组细胞明显梭形化,形态不规则,体积缩小,但边界仍清楚,PCA组细胞形态无明显改变。正常组的HUVEC核在显微镜下呈均匀蓝色,边界清楚,色泽均匀。LPS组可见细胞核形态改变,缺如,呈片状浓染。而在PCA组与PCA+LPS组HUVEC核在显微镜下仍呈均匀蓝色,边界清楚,色泽清楚。MTT实验结果显示,LPS组与对照组相比细胞活力明显降低(P<0.01),PCA+LPS组的细胞活力比LPS组微升(P<0.05)。2.PCA(1.25μg/ml)能降低LPS引起的细胞内TRAF6蛋白表达免疫组化法检测TRAF6蛋白活化结果发现,对照组细胞呈多边或梭形,胞质内无明显黄染颗粒,细胞边界清晰。LPS组细胞胞质内出现明显的黄染颗粒,胞质染色加深,TRAF6平均光密度值升高,与对照组比较,可见TRAF6蛋白的表达量明显增加(P<0.01)。而LPS+PCA实验组与LPS组比较,细胞形态正常,胞质黄染颗粒不明显,TRAF6平均光密度明显小于LPS组(P<0.01)。3.PCA(1.25μg/ml)可影响LPS引起的细胞核内NF-κB被激活-核转运免疫荧光染色检测细胞核内转录因子NF-κB活化,结果显示,对照组HUVEC胞核内红色荧光较少,强度微弱。与对照组进行比较,在多数细胞中LPS组细胞胞核中红色荧光明显增多,荧光强度明显增强(P<0.01),可见NF-κB明显被激活并转运至细胞核内;PCA组细胞与对照组相较,红色荧光强度较为微弱(P>0.05)。与LPS组比较,LPS+PCA组细胞胞核内红色荧光明显减少,荧光强度也明显降低(P<0.01),可见NF-κB的核转运明显受到了抑制。4.PCA(1.25μg/ml)降低LPS作用的HUVEC中NF-κB p65、JUN和FOS的蛋白表达Western Blot实验检测,结果提示,与对照组相比,LPS组NF-κB p65、JUN和FOS的光密度比值均明显增加(P<0.01),而PCA组的比值无显着变化。PCA+LPS组3种蛋白的比值则明显低于LPS组(P<0.01)。5.PCA(1.25μg/ml)降低LPS引起的内皮细胞内TF基因、蛋白及细胞上清中TF的表达通过qPCR实验检测发现,LPS组TF的基因表达量与对照组比较明显增多(P<0.01);而与空白对照组相比,PCA组的基因表达无明显增加,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS+PCA组与LPS组比较,TF的mRNA表达明显减少,小于LPS组(P<0.01)。TF蛋白检测结果,与对照组相比,LPS组TF蛋白的光密度比值明显增加(P<0.01),而PCA组的比值无显着变化。PCA+LPS组蛋白的比值则明显低于LPS组(P<0.01)。ELISA法检测细胞培养上清液中TF表达量的结果,与对照组相比,LPS组TF的表达量明显增加(P<0.01),而PCA组的分泌量无显着变化。PCA+LPS组TF的分泌量则明显低于LPS组(P<0.01)。结论:1、PCA对HUVEC结构形态及生长增殖性无明显作用,但是能够减轻LPS引起的VEC梭形化形态变化和细胞增长活性的变化;2、PCA可通过NF-κB、AP-1途径拮抗内毒素对HUVEC的损伤作用,并通过这种作用抑制TF基因的表达以减少TF的分泌,可能是PCA来防治血栓性疾病的机制之一。(本文来源于《皖南医学院》期刊2018-04-01)

桑金凤,张根葆,周淑艳,季娜[10](2017)在《尖吻蝮蛇毒PCA对HUVEC活性的影响》一文中研究指出目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的超微结构及其合成组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)和内皮素-1(ET-1)水平的影响,并探讨PCA的抗血栓机制。方法:实验分为对照组(DMEM液)、脂多糖(LPS)组(LPS 0.1μg/ml)、PCA组(PCA 1μg/ml)、PCA+LPS组(1μg/ml PCA+0.1μg/ml LPS),加药作用12 h后在透射电镜下观察各组细胞的内质网、线粒体形态及自噬体数量变化;ELISA检测各组培养上清中TF、vWF、ET-1含量;RT-PCR检测细胞内vWF、ET-1基因表达水平;Western blot检测细胞内TF蛋白表达水平。结果:LPS组的HUVEC与对照组相比,细胞膜不光滑、出现凸起样改变,并发生线粒体、内质网肿胀,自噬体数量增多等超微结构的改变,PCA组HUVEC的超微结构与对照组比无明显变化;与LPS组相比,PCA+LPS组的HUVEC线粒体、内质网肿胀消失,自噬体数量明显减少。与对照组相比,LPS组细胞培养上清中TF、vWF、ET-1的含量及细胞内vWF、ET-1基因、TF蛋白的表达水平显着增高(P<0.05);PCA组细胞培养上清及细胞内3种物质的表达量较对照组无显着变化(P>0.05);与LPS组相比,LPS+PCA组HUVEC培养上清及细胞内TF、vWF、ET-1的表达水平显着降低(P<0.05)。结论:1μg/ml的PCA可减轻LPS引起的HUVEC超微结构的改变,也可抑制LPS对HUVEC的TF、vWF、ET-1分泌量的增加作用。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2017年02期)

尖吻蝮蛇毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

[目的]尖吻蝮蛇蛇毒具有极强的毒性,其含有多种不同生物学活性的蛋白质、多肽、酶等。本研究旨在通过对湖南省永州市尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白成分分析和毒性进行初步探索研究,为湖南尖吻蝮蛇蛇毒的毒性及医药应用提供重要的参考依据。[方法]本研究采用Nano-LC-ESI-MS/MS技术对湖南尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行定性分析,采用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对KM小鼠单剂量皮下注射尖吻蝮蛇蛇毒的LD_(50)进行测定。[结果]结果显示尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子量主要在10-50KD,其中高丰度蛋白质为蛇毒金属蛋白、类凝血酶和抗凝血酶;尖吻蝮蛇蛇毒引起体外红细胞溶血的最低浓度为0.06mg/mL,对KM小鼠的LD_(50)为7.18mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安,注射部位出现奇特瘙痒,反复抓挠,至注射部位出现大面积溃烂,直至死亡。[结论]根据本研究从尖吻蝮蛇蛇毒中鉴定出的50种蛋白,体外溶血值和LD_(50)的准确测定,可对尖吻蝮蛇蛇毒中发挥重要作用的蛋白有初步的判断,可为进一步研究尖吻蝮蛇蛇毒的毒理机制提供宝贵的基础数据。本研究为湖南尖吻蝮蛇蛇毒毒性评价及药用开发与利用奠定基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

尖吻蝮蛇毒论文参考文献

[1].肖纲,刘俊琦,夏雨,张志阳,孙志良.湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白组分及毒性分析[J].湖南农业大学学报(自然科学版).2019

[2].肖纲,刘俊琦,张志阳,夏雨,孙志良.湖南尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分分析及毒性探索性研究[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集.2019

[3].熊艳,李博,和七一,余晓东.尖吻蝮蛇毒对人卵巢癌A2780细胞的抑制作用研究[J].重庆师范大学学报(自然科学版).2019

[4].向柏林,熊艳,陈春妮,龙敏,朱晓艳.蛇莓乙醇提取物抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶活性初探[J].重庆师范大学学报(自然科学版).2019

[5].陈典成,和七一,刘锦花,谭佳,罗聪.石柑子水提物对尖吻蝮蛇毒活性抑制作用的初步研究[J].重庆师范大学学报(自然科学版).2019

[6].熊艳,李恒,余晓东,龙敏,陈春妮.小叶叁点金不同萃取相对尖吻蝮蛇毒主要酶类的抑制作用[J].重庆师范大学学报(自然科学版).2018

[7].和七一,余晓东,李博,熊艳,肖静.小叶叁点金醇提物对尖吻蝮蛇毒的抑制作用[J].中山大学学报(自然科学版).2018

[8].杨惠琼.高压氧辅助抗蛇毒血清治疗尖吻蝮蛇咬伤的临床疗效观察[D].遵义医学院.2018

[9].靳文.尖吻蝮蛇毒PCA影响HUVEC分泌TF的机制研究[D].皖南医学院.2018

[10].桑金凤,张根葆,周淑艳,季娜.尖吻蝮蛇毒PCA对HUVEC活性的影响[J].中国实验血液学杂志.2017

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