托吡酯联用叶酸对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的保护作用

论文摘要

第一部分托吡酯对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响[目的]探讨托吡酯（TPM）低、中、高不同剂量对幼鼠慢性癫痫发作引起的海马神经元损伤的影响。[方法]将60只3周龄雄性Wistar大鼠随机分为5组,每组12只:阴性对照组（A组）、阳性对照组（B组）、TPM低剂量组（C组）、TPM中剂量组（D组）、TPM高剂量组（E组）。B、C、D、E四组先行戊四氮（PTZ）腹腔注射制造幼鼠慢性癫痫模型,再分别给予蒸馏水、TPM 20、40、80 mg / （ kg. d ）灌胃;A组则先行生理盐水腹腔注射,再给予蒸馏水灌胃。连续用药2个月。观察各组幼鼠行为学表现、血清神经元特异性烯醇化酶（ NSE ）及海马区病理改变。[结果]1.对幼鼠体重的影响A组与B组幼鼠体重增长差异无统计学意义;C、D、E三组幼鼠体重增长较A、B两组为慢（均P < 0.001）,且E组慢于C、D两组（均P < 0.001）,C组与D组差异无统计学意义。2.对幼鼠行为的影响A组幼鼠无惊厥发作,B、C、D、E四组幼鼠在PTZ腹腔注射后均出现不同程度的惊厥发作。B、C、D、E组的惊厥发作次数依次为:（ 48.4±3.7 ）、（ 44.7±2.9 ）、（ 44.3±3.1 ）、（ 42.7±3.2 ）次。与B组比较,C、D、E三组均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01 ）,但C、D、E三组之间差异无统计学意义。3.对幼鼠血清NSE水平的影响A、B、C、D、E五组幼鼠血清NSE值依次为:（18.717±2.954）μg/L、（35.713±5.974）μg/L、（27.402±6.401 ）μg/L、（24.791±6.221）μg/L、（21.473±6.875）μg/L。与A组相比,C、D两组差异有统计学意义（均P < 0.01）, E组差异无统计学意义;与B组相比,C、D、E三组差异均有统计学意义（均P < 0.05）;但C、D、E三组相互比较,差异无统计学意义。4.对幼鼠海马神经元形态学的影响A组海马区罕见神经元损伤;B组出现明显神经元变性、死亡,胶质细胞增生和嗜神经现象;C、D、E三组亦可见神经元变性、坏死,胶质细胞增生,但较A组明显减少。A、B、C、D、E五组幼鼠海马CA3区坏死神经元细胞百分比依次为:（5.8±1.9）%、（72.2±9.8）%、（43.9±7.1）%、（25.9±5.5）%、（10.5±4.2）%;海马CA1区坏死神经元细胞百分比依次为:（5.1±1.8） %、（65.6±8.1）%、（40.5±6.4）%、（23.1±5.2）%、（8.9±3.6）%;五组间差异有统计学意义（CA3区P < 0.001;CA1区P < 0.001）。[结论]TPM对幼鼠慢性癫痫发作引起的脑神经元损伤具有保护作用,且20、40、80 mg / （ kg. d ）三剂量之间存在剂量效应, 80 mg/（kg. d）剂量神经元保护作用最强。第二部分托吡酯联用叶酸对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响[目的]探讨托吡酯（TPM）联用叶酸（FA）对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响。[方法]将48只3周龄雄性Wistar大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、TPM组、TPM + FA组,每组12只。阳性对照组、TPM组和TPM + FA组先行戊四氮（PTZ）腹腔注射制造幼鼠慢性癫痫模型,再分别给予蒸馏水、TPM 40mg / （ kg. d ）和TPM 40 mg/ （kg.d） + FA 5 mg/ （kg.d）灌胃;阴性对照组则先行生理盐水腹腔注射,再给予蒸馏水灌胃。连续用药2个月。观察各组幼鼠行为学表现、血清神经元特异性烯醇化酶（ NSE ）及海马区病理改变。[结果]1.对幼鼠行为的影响1.1阴性对照组幼鼠无惊厥发作,阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠的惊厥发作次数依次为:（48.4±3.7）次、（44.3±3.1）次、（43.1±3 .7）次。与阳性对照组相比,TPM组和TPM + FA组差异均有统计学意义（均P < 0.05）,但TPM组和TPM + FA组两组相比,差异无统计学意义。1.2水迷宫学习记忆能力测试:阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠学会正确上台所需的训练次数依次为: （6.9±2.3）次、（9.3±2.6）次、（12.6±3.4）次、（8.4±2.7）次。与TPM组相比,阴性对照组、阳性对照组和TPM + FA组差异均有统计学意义（P < 0.001或<0.05）。2.对幼鼠血清NSE水平的影响阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠血清NSE值依次为:（18.717±2.954）μg/L、（35.713±5.974）μg/L、（24.791±6.221）μg/L、（22.550±7.019）μg/L。与阴性对照组相比, TPM组差异有统计学意义（P < 0.01）,TPM + FA组差异无统计学意义;与阳性对照组相比,TPM组和TPM + FA组差异均有统计学意义（均P < 0.01）;TPM组和TPM + FA组两组相比,差异无统计学意义。3.对幼鼠海马神经元形态学的影响3.1光镜下:阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠海马CA3区坏死神经元细胞百分比依次为:（5.8±1.9） %、（72.2±9.8） %、（25.9±5.5） %、（16.1±4.8） %,海马CA1区坏死神经元细胞百分比依次为:（5.1±1.8） %、（65.6±8.1）%、（23.1±5.2） %、（14.9±4.3） %;四组差异有统计学意义（P <0.01或<0.001）。3.2电镜下:阴性对照组海马神经元细胞边界清楚,核膜完整,线粒体内外膜清楚,短嵴清晰。阳性对照组、TPM组和TPM + FA组均可见部分海马神经元细胞核固缩,线粒体明显肿胀,嵴断裂或消失,有些空泡化,外膜破裂。阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠海马CA3区神经元线粒体的超微结构损伤程度依次为:（0.34±0.09）级、（3.76±0.28）级、（2.85±0.21）级、（2.09±0.31）级,四组间差异有统计学意义（P < 0.01）。[结论]TPM对慢性癫痫发作所致的海马神经元损伤有保护作用, FA可加强TPM的保护作用。

论文目录

• 英文缩略词表
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• 英文摘要
• 论文正文
• 前言
• 1 托吡酯对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 1.5 小结
• 2 托吡酯联用叶酸对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述