去瓣型微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术和准分子激光屈光性角膜切削术对兔角膜病理影响的对比研究

论文摘要

目的:探讨去瓣型微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术（Epi- LASIK）和准分子激光屈光性角膜切削术（PRK）对兔角膜病理影响的对比研究。方法:新西兰白兔34只,随机取32只兔的右眼行Epi—LASIK并去除角膜上皮瓣, 32只左眼行PRK,另外取2只兔（4只未手术眼）为空白对照组。术后4h、1d、3 d、5 d、7 d、14d、1m、3m时间段取角膜标本,采用HE染色观察角膜前基质细胞的数量变化,免疫组化染色PCNA观察角膜切削缘角膜上皮细胞的增殖,Ki-67观察中央角膜基质细胞的增殖,α-SMA观察中央角膜基质细胞向肌成纤维母细胞转化情况,透射电镜观察角膜超微结构的变化,进行计数和半定量分析,从haze形成的影响因素进行分析。结果:PRK和Epi-LASIK术后角膜前基质细胞均有明显的减少,在术后1d达到最低,术后各时间段PRK组比Epi-LASIK组前基质细胞数更少,差异有显著统计学意义（均p<0.01）。术后两手术组PCNA阳性细胞较空白对照组均有较高表达,术后3d增至最高,1m时基本恢复正常,术后1d、3 d、5 d、7 d、14dPRK组比Epi-LASIK组PCNA阳性细胞数更多,差异有显著统计学意义（均p<0.05）。术后4h时Ki-67阳性细胞开始在前基质浅层有表达,至术后3d增至最高,1m时基本恢复正常,术后4h、1d、3 d、5 d、7 d、14dPRK组比Epi-LASIK组Ki-67阳性细胞数更多,差异有显著统计学意义（均p<0.01）。术后5d时α-SMA阳性细胞开始在前基质浅层有较高表达,至术后1m时Ki-67阳性细胞数增至最高,术后5 d、7 d、14d、1m、3m PRK组比Epi-LASIK组α-SMA阳性细胞数更多,差异有显著统计学意义（均p<0.01）。透射电镜检查显示,PRK和Epi-LASIK术后,7d之内Epi-LASIK组细胞之间结合更紧密,1m、3m时基质内胶原纤维排列更整齐。结论:1.、去瓣型Epi-LASIK比PRK有着更低的角膜上皮损伤、增殖反应。2、去瓣型Epi-LASIK比PRK有着更低的角膜基质细胞的损伤、增殖反应。3、去瓣型Epi-LASIK比PRK有着更低的向肌成纤维母细胞转化的潜能。4、去瓣型Epi-LASIK比PRK有着更低发生haze的可能性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.4 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验分组
• 2.2.2 手术方法与术后处理
• 2.2.3 角膜组织取材与切片
• 2.2.4 HE 染色
• 2.2.5 免疫组化
• 2.2.6 透射电镜检查
• 2.3 细胞计数与统计学分析方法
• 第3章 结果
• 3.1 HE 及免疫组化染色阳性细胞光镜观察
• 3.1.1 Epi-LASIK 与 PRK 术后前基质细胞数量对比
• 3.1.2 Epi-LASIK 与 PRK 术后 PCNA 阳性细胞数量对比
• 3.1.3 Epi-LASIK 与 PRK 术后 Ki-67 阳性细胞数量对比
• 3.1.4 Epi-LASIK 与 PRK 术后α-SMA 阳性细胞数量对比
• 3.2 角膜组织透射电子显微镜观察
• 3.2.1 空白对照组
• 3.2.2 PRK 组
• 3.2.3 Epi- LASIK 组
• 第4章 讨论
• 4.1 角膜基质细胞凋亡
• 4.2 角膜上皮细胞增殖
• 4.3 角膜基质细胞增殖
• 4.4 肌成纤维母细胞增殖
• 4.5 角膜超微结构改变
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 攻读学位期间的研究成果
• 附带综述