蔡加挺:稻瘟菌免疫诱导蛋白MoSM1互作蛋白的筛选及验证论文

蔡加挺:稻瘟菌免疫诱导蛋白MoSM1互作蛋白的筛选及验证论文

本文主要研究内容

作者蔡加挺(2019)在《稻瘟菌免疫诱导蛋白MoSM1互作蛋白的筛选及验证》一文中研究指出:稻瘟菌分泌的小分子蛋白MoSM1是一类Cerato-platanin蛋白。目前,已经发现MoSM1蛋白作为稻瘟菌的毒力因子也可以作为植物免疫反应的激发子。但是,关于寄主植物识别MoSM1,并且如何激活下游抗病信号通路的机制研究还没有报道。为了鉴定出水稻中能够识别并结合MoSM1蛋白的受体蛋白,我们利用酵母双杂交和蛋白质免疫沉淀结合液相串联质谱实验筛选与MoSM1的寄主受体蛋白。在酵母双杂交实验中,将含有pGBKT7-MoSM1的Y2HGold菌株与含有水稻的cDNA文库的酵母Y187菌株进行mating。最后得到30个阳性克隆,并根据这些基因所编码的蛋白的功能将范围缩小到8个。但接下来的验证互作实验中,发现它们均不能检测出互作信号,因此,酵母双杂交实验未能鉴定出与MoSM1互作的水稻蛋白。利用IP-MS技术筛选鉴定MoSM1的水稻受体蛋白。实验中设置了三个实验组及一个阴性对照普通型水稻XS11。提取水稻叶片总蛋白进行IP实验。将所得到的蛋白进行质谱分析。质谱分析鉴定到胶条中含有220个蛋白,对这些蛋白进行GO功能分析,并依据蛋白功能、结构域、亚细胞定位等指标来初步筛选出约20个候选互作因子。接着利用酵母双杂交以及双分子荧光互补实验检测这些蛋白是否与MoSM1存在真实互作,但均没有鉴定出互作因子。但是很有可能这些激酶蛋白中存在着MoSM1互作因子,还有待于进一步探究。

Abstract

dao wen jun fen bi de xiao fen zi dan bai MoSM1shi yi lei Cerato-platanindan bai 。mu qian ,yi jing fa xian MoSM1dan bai zuo wei dao wen jun de du li yin zi ye ke yi zuo wei zhi wu mian yi fan ying de ji fa zi 。dan shi ,guan yu ji zhu zhi wu shi bie MoSM1,bing ju ru he ji huo xia you kang bing xin hao tong lu de ji zhi yan jiu hai mei you bao dao 。wei le jian ding chu shui dao zhong neng gou shi bie bing jie ge MoSM1dan bai de shou ti dan bai ,wo men li yong jiao mu shuang za jiao he dan bai zhi mian yi chen dian jie ge ye xiang chuan lian zhi pu shi yan shai shua yu MoSM1de ji zhu shou ti dan bai 。zai jiao mu shuang za jiao shi yan zhong ,jiang han you pGBKT7-MoSM1de Y2HGoldjun zhu yu han you shui dao de cDNAwen ku de jiao mu Y187jun zhu jin hang mating。zui hou de dao 30ge yang xing ke long ,bing gen ju zhe xie ji yin suo bian ma de dan bai de gong neng jiang fan wei su xiao dao 8ge 。dan jie xia lai de yan zheng hu zuo shi yan zhong ,fa xian ta men jun bu neng jian ce chu hu zuo xin hao ,yin ci ,jiao mu shuang za jiao shi yan wei neng jian ding chu yu MoSM1hu zuo de shui dao dan bai 。li yong IP-MSji shu shai shua jian ding MoSM1de shui dao shou ti dan bai 。shi yan zhong she zhi le san ge shi yan zu ji yi ge yin xing dui zhao pu tong xing shui dao XS11。di qu shui dao xie pian zong dan bai jin hang IPshi yan 。jiang suo de dao de dan bai jin hang zhi pu fen xi 。zhi pu fen xi jian ding dao jiao tiao zhong han you 220ge dan bai ,dui zhe xie dan bai jin hang GOgong neng fen xi ,bing yi ju dan bai gong neng 、jie gou yu 、ya xi bao ding wei deng zhi biao lai chu bu shai shua chu yao 20ge hou shua hu zuo yin zi 。jie zhao li yong jiao mu shuang za jiao yi ji shuang fen zi ying guang hu bu shi yan jian ce zhe xie dan bai shi fou yu MoSM1cun zai zhen shi hu zuo ,dan jun mei you jian ding chu hu zuo yin zi 。dan shi hen you ke neng zhe xie ji mei dan bai zhong cun zai zhao MoSM1hu zuo yin zi ,hai you dai yu jin yi bu tan jiu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自浙江大学的蔡加挺,发表于刊物浙江大学2019-05-20论文,是一篇关于免疫激发子论文,酵母双杂交论文,互作蛋白论文,激酶论文,浙江大学2019-05-20论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自浙江大学2019-05-20论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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