耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测与多重耐药的研究

论文摘要

目的评价头孢西丁纸片扩散、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片扩散、苯唑西林-盐琼脂筛选、青霉素结合蛋白2a（PBP2a）胶乳凝集4种方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床应用价值,寻求适合临床微生物实验室检测MRSA的简易、准确方法;研究本地区MRSA的多重耐药状况,为探讨MRSA耐药机制及临床用药提供依据。方法对安徽省细菌耐药监控中心提供2005年度各监控单位送检100株金黄色葡萄球菌,分别进行头孢西丁纸片扩散、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片扩散、苯唑西林-盐琼脂筛选、PBP2a胶乳凝集试验,以聚合酶链反应（PCR）检测mecA基因为MRSA检测金标准,按CLSI 2006版标准操作和判读结果;收集51株MRSA,用青霉素酶酸测定法、Kirby-Bauer（K-B）法检测MRSA产β-内酰胺酶以及对红霉素、克林霉素、红霉素诱导克林霉素耐药（D试验）、4种氟喹诺酮类药物（氧氟沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、加替沙星）和万古霉素耐药性。结果头孢西丁纸片扩散、MHA中添加2%NaCl苯唑西林纸片扩散、苯唑西林-盐琼脂筛选、PBP2a胶乳凝集检测MRSA灵敏度和特异性分别为96.3%（26/27）和100.0%（73/73）、77.8%（21/27）和100.0%（73/73）、92.6%（25/27）和94.5%（69/73）、100.0%（27/27）和100.0%（73/73）,其中2株MRSA在苯唑西林-盐筛选琼脂上24h未生长但延长至48h生长,48h内敏感性100.0%（27/27）,但特异性降至89.0%（65/73）;与PCR比较,MHA中添加2%NaCl苯唑西林纸片扩散检测MRSA统计学差异有显著性（P＜0.05）,头孢西丁纸片扩散、苯唑西林-盐琼脂筛选、PBP2a胶乳凝集试验检测MRSA统计学差异均无显著性（P＞0.05）;安徽省2005年度细菌耐药监控中心金黄色葡萄球菌MRSA分离率达27.0%（27/100）;51株MRSA头孢西丁纸片抑菌环直径介于6-20mm之间,产β-内酰胺酶率为84.3%（43/51）,对红霉素、克林霉素、氟喹诺酮类、万古霉素耐药率分别为98.0%（50/51）、86.3%（44/51）、88.2%（45/51）、0.0%（0/51）,3株MRSA红霉素诱导克林霉素耐药,诱导耐药率为50.0%（3/6）。结论头孢西丁纸片扩散、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片扩散、苯唑西林-盐琼脂筛选、PBP2a胶乳凝集试验均能可靠检测MRSA,PBP2a胶乳凝集可代替PCR作为检测MRSA的确证试验。头孢西丁纸片扩散和苯唑西林-盐琼脂筛选对于临床微生物实验室检测MRSA具有较高应用价值,两法联合检测MRSA结果准确;MRSA呈多重耐药,红霉素诱导克林霉素耐药率高,建议将D试验用于MRSA常规药敏监测;MRSA耐药水平与头孢西丁纸片抑菌环直径成负相关,轻度感染可根据药敏结果选用万古霉素与氟喹诺酮类抗菌素联合用药。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
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• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录一:个人简历
• 附录二:致谢
• 附录三:综述