塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense）对鲈鱼（Lateolabrax japonicus）的危害机制研究

论文摘要

本论文选择在我国分离得到的一株有毒赤潮甲藻-塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense,ATHK株）,研究了其对一种我国沿海常见和典型养殖鱼类鲈鱼（Lateolabrax japonicus）的危害机制。首先研究了塔玛亚历山大藻（ATHK）对鲈鱼鳃结构的影响及其溶血毒性;然后采用腹腔注射的方法,研究了高剂量塔玛亚历山大藻毒素（ATHK毒素:约为1.6×105细胞,相应PSP为0.886μg STX Equal,相当于每克湿重的鲈鱼PSP注射量为0.0118μg STX Equal）和低剂量塔玛亚历山大藻毒素（ATHK毒素:约为0.16×105细胞,相应PSP为0.0886μg STX Equal,相当于每克湿重的鲈鱼PSP注射量为0.00118μg STX Equal）在鲈鱼体内代谢过程中对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织的超微结构、Na+K+-ATPase活性、肝脏功能和肾脏功能的影响、以及对抗氧化系统酶活性和异生物质代谢酶的影响,以期从不同方面了解塔玛亚历山大藻及其所产水溶性毒素（ATHK毒素）对鲈鱼的毒害效应及机制,为有毒赤潮的有效管理提供一定的科学依据。塔玛亚历山大藻（ATHK）对鲈鱼鳃组织影响的实验结果表明,该藻使鲈鱼鳃组织出现水肿现象,细胞间隙变大;粘液细胞颗粒不规则,颜色加深,颗粒发生凝集,有板结状;氯细胞线粒体内部基质凝集。不产PSP的一种亚历山大藻（AT-6）也使鲈鱼鳃出现水肿,且使细胞出现一定的固缩现象。显微镜观察发现鲈鱼鳃丝间存在有这两种亚历山大藻细胞。由此推测塔玛亚历山大藻ATHK和AT-6的表面结构可能具有能导致鲈鱼鳃组织水肿的机械作用。对人血细胞溶血实验结果表明塔玛亚历山大藻（ATHK）具有较强的溶血毒性,大小与藻的生长阶段和细胞密度都有一定的关系:指数期的溶血毒性最大,随细胞数目的增多,活性逐渐加大;藻细胞、细胞碎片、细胞内容物都有一定的溶血毒性,其中细胞碎片的活性最大。通过11种（株）产PSP的亚历山大藻、不产PSP的亚历山大藻以及标准PSP的实验结果表明这种溶血毒性是由藻细胞的其它非PSP物质造成的,且这种溶血毒性在产PSP的亚历山大藻中具有一定的普遍性。塔玛亚历山大藻（ATHK）对鲈鱼组织超微结构实验结果表明:ATHK毒素（约为1.6×105细胞,相应PSP为0.886μg STX Equal,相当于每克湿重的鲈鱼PSP注射量为0.0118μg STX Equal）能导致鲈鱼组织细胞超微结构发生剧烈的变化,

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1.1 赤潮及其危害
• 1.1.1 赤潮
• 1.1.2 赤潮的发生及造成的危害
• 1.1.3 有害赤潮藻毒素
• 1.2 麻痹性贝毒毒素（PSP）及其产毒藻对海洋鱼类危害的研究
• 1.2.1 麻痹性贝毒毒素（PSP）及其产毒藻对海洋鱼类的危害
• 1.2.2 PSP及其产毒藻对海洋鱼类的急性毒性及危害机制
• 1.2.2.1 对海洋鱼类的致死效应
• 1.2.2.2 导致海洋鱼类死亡的几种机制
• 1.2.2.2.1 机械作用
• 1.2.2.2.2 耗氧
• 1.2.2.2.3 其它非PSP 毒素作用
• 1.2.3 PSP 及其产毒藻对鱼类亚急性毒性的影响
• 1.2.3.1 对鱼类酶活性的影响
• 1.2.3.2 对鱼类细胞的影响
• 1.2.3.3 对鱼类形态行为的影响
• 1.2.4 海洋鱼类对PSP 的富集和传递
• 1.3 鱼类对异源有毒物质的抵御作用
• 1.3.1 鱼类混合功能氧化酶和抗氧化系统酶对异源物质的抵御作用
• 1.3.1.1 鱼类混合功能氧化酶的作用
• 1.3.1.2 鱼类抗氧化系统酶的作用
• 1.3.2 鱼类组织器官在受到异源有毒物质时结构的变化
• 1.4 本论文研究内容及目的意义
• 第二章 塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense）藻细胞毒性及水溶性毒素组成
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.2.1 塔玛亚历山大藻（ATHK）所产PSP 毒素的制备及毒素分析
• 2.1.2.2 塔玛亚历山大藻（ATHK）对鲈鱼鳃细胞超微结构的影响
• 2.1.2.3 塔玛亚历山大藻（ATHK）的溶血毒性
• 2.1.2.3.1 血细胞的制备及皂素标准曲线制作
• 2.1.2.3.2 塔玛亚历山大藻（ATHK）的溶血毒性
• 2.1.2.3.3 12株亚历山大藻溶血毒性的比较
• 2.2 结果
• 2.2.1 塔玛亚历山大藻（ATHK）所产PSP 毒素成分及含量
• 2.2.2 塔玛亚历山大藻（ATHK）对鲈鱼幼鱼鳃组织细胞结构的影响
• 2.2.3 塔玛亚历山大藻（ATHK）的溶血毒性
• 2.2.3.1 不同生长时期塔玛亚历山大藻（ATHK）的溶血毒性
• 2.2.3.2 塔玛亚历山大藻（ATHK）各细胞组分的溶血毒性比较
• 2.2.3.3 12 株亚历山大藻溶血毒性的比较
• 2.3 讨论
• 第三章 塔玛亚历山大藻毒素（ATHK 毒素）对鲈鱼（Lateolabrax japonicus） 肝脏、前肾和鳃组织细胞超微结构的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.1.2.1 鲈鱼染毒
• 3.1.2.2 样品制备和电镜照片观察
• 3.2 结果
• 3.2.1 实验过程中鲈鱼的反应
• 3.2.2 实验组鲈鱼组织细胞的超微结构
• 3.2.2.1 正常饲养条件下鲈鱼细胞的超微结构
• 3.2.2.2 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏细胞超微结构的影响
• 3.2.2.3 ATHK 毒素对鲈鱼前肾细胞超微结构的影响
• 3.2.2.4 ATHK 毒素对鲈鱼鳃细胞超微结构的影响
• 3.2.3 对照组鲈鱼组织细胞的超微结构
• 3.2.3.1 乙酸对鲈鱼组织细胞超微结构的影响
• 3.2.3.2 STX标准品对鲈鱼组织细胞超微结构的影响
• 3.2.4 恢复组鲈鱼组织细胞的超微结构
• 3.3 讨论
• +K⁺-ATPase活性、肝脏功能及肾脏功能的影响'>第四章 塔玛亚历山大藻毒素（ATHK毒素）对鲈鱼（L. japonicus） Na⁺K⁺-ATPase活性、肝脏功能及肾脏功能的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.1.2.1 鲈鱼染毒与样品采集
• 4.1.2.2 样品处理及酶活性测定
• 4.2 结果
• +K⁺-ATPase活性的影响'>4.2.1 ATHK毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织中Na⁺K⁺-ATPase活性的影响
• 4.2.2 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏中ALT/GPT 酶活性的影响
• 4.2.3 ATHK 毒素对鲈鱼肾脏中尿素氮的影响
• 4.3 讨论
• 第五章 塔玛亚历山大藻毒素（ATHK毒素）对鲈鱼（L. japonicus）组织抗氧化系统酶和异生物质代谢酶活性的影响
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 方法
• 5.1.2.1 鲈鱼染毒
• 5.1.2.2 样品处理及酶活性测定
• 5.2 结果
• 5.2.1 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响
• 5.2.2 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织中过氧化氢酶（CAT）活性的影响
• 5.2.3 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织中谷胱肝肽过氧化物酶（GSH-Px）活性的影响
• 5.2.4 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织中谷胱肝肽转硫酶（GST）活性的影响
• 5.2.5 ATHK 毒素对鲈鱼肝脏、肾脏和鳃组织结构功能以及酶活性影响的比较
• 5.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 发表及撰写文章情况
• 致谢
• 图目录（Figure Caption）
• 表目录（Table List）