论文摘要
本试验以苹果(Malus pumila Mill.)主栽品种皇家嘎拉(Royal Gala)、岩富10号(Yanfu No.10)、长富2号(Changfu No.2)三种基因型为试验材料,建立了苹果无菌快繁体系,茎段初代培养基为不添加任何激素的MS;继代增殖添加最佳激素组合为:皇家嘎拉:MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L ;岩富10号、长富2号:MS+ 6-BA 0. 5~1.0mg/L+NAA 0.05~0.10 mg/L。苹果叶片再生不定芽试验分别研究了试管苗叶片再生不定芽与外植体基因型、氮形态及比例(NH4+:NO3-)、植物激素组合、暗培养时间、叶片苗龄和不同培养方法诸因素的关系,找出了最适叶片再生不定芽培养条件,建立优化了稳定、高效的离体叶片再生不定芽系统。试验筛选出皇家嘎拉高效不定芽诱导培养基为:添加氮形态及比例(NH4+:NO3-)=2:0,附加的激素组合为6-BA 2.0mg/L+NAA 0.15mg/L的MS培养基;筛选出富士系岩富10号、长富2号高效不定芽诱导培养基为:附加6-BA 4.0mg/L+NAA 0.15mg/L的MS培养基。在试管苗叶片中选择30~35d苗龄中叶色深绿、长势较强的叶片作为外植体有利于叶片再生;暗培养对苹果叶片再生不定芽并非必需,接种后完全光照培养叶片也能再生,但经过14d的暗培养可显著提高叶片的再生芽数及再生频率;岩富10号在与甜瓜子叶、皇家嘎拉叶片共培养后,叶片颜色加深,膨大卷曲明显,愈伤组织状态有利于不定芽再生;1μmol/L AgNO3对叶片再生不定芽有显著的促进作用,叶片迅速膨大,愈伤组织形成快,叶片再生百分率均达到100%,平均每叶再生芽数最高可达5.86个;再生不定芽生根可用无肌醇1/2MS培养基,附加激素IBA 0.5 mg/L,平均有效根数可达4.6,生根率达82%。