苹果(Malus pumila Mill.)叶片再生体系的建立与优化

苹果(Malus pumila Mill.)叶片再生体系的建立与优化

论文摘要

本试验以苹果(Malus pumila Mill.)主栽品种皇家嘎拉(Royal Gala)、岩富10号(Yanfu No.10)、长富2号(Changfu No.2)三种基因型为试验材料,建立了苹果无菌快繁体系,茎段初代培养基为不添加任何激素的MS;继代增殖添加最佳激素组合为:皇家嘎拉:MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L ;岩富10号、长富2号:MS+ 6-BA 0. 5~1.0mg/L+NAA 0.05~0.10 mg/L。苹果叶片再生不定芽试验分别研究了试管苗叶片再生不定芽与外植体基因型、氮形态及比例(NH4+:NO3-)、植物激素组合、暗培养时间、叶片苗龄和不同培养方法诸因素的关系,找出了最适叶片再生不定芽培养条件,建立优化了稳定、高效的离体叶片再生不定芽系统。试验筛选出皇家嘎拉高效不定芽诱导培养基为:添加氮形态及比例(NH4+:NO3-)=2:0,附加的激素组合为6-BA 2.0mg/L+NAA 0.15mg/L的MS培养基;筛选出富士系岩富10号、长富2号高效不定芽诱导培养基为:附加6-BA 4.0mg/L+NAA 0.15mg/L的MS培养基。在试管苗叶片中选择30~35d苗龄中叶色深绿、长势较强的叶片作为外植体有利于叶片再生;暗培养对苹果叶片再生不定芽并非必需,接种后完全光照培养叶片也能再生,但经过14d的暗培养可显著提高叶片的再生芽数及再生频率;岩富10号在与甜瓜子叶、皇家嘎拉叶片共培养后,叶片颜色加深,膨大卷曲明显,愈伤组织状态有利于不定芽再生;1μmol/L AgNO3对叶片再生不定芽有显著的促进作用,叶片迅速膨大,愈伤组织形成快,叶片再生百分率均达到100%,平均每叶再生芽数最高可达5.86个;再生不定芽生根可用无肌醇1/2MS培养基,附加激素IBA 0.5 mg/L,平均有效根数可达4.6,生根率达82%。

论文目录

  • 摘要
  • Summary
  • 前言
  • 1 国内外研究现状分析
  • 1.1 器官培养
  • 1.2 胚培养
  • 1.3 原生质体培养
  • 2 试验研究的目的和意义
  • 3 技术路线
  • 第一部分 苹果无菌营养繁殖系的建立
  • 1 材料与方法
  • 1.1 试验材料
  • 1.2 试验方法
  • 1.3 试验结果统计
  • 2 结果与分析
  • 2.1 不同防褐化处理对茎段褐化率的影响
  • 2.2 继代培养基的筛选
  • 3 讨论
  • 3.1 外植体污染
  • 3.2 外植体褐化
  • 3.3 试管苗继代增殖及玻璃化
  • 第二部分 苹果离体叶片再生体系的建立
  • 1 取材与处理
  • 1.1 试验材料
  • 1.2 试验方法
  • 1.3 试验设计与结果统计指标
  • 2 结果与分析
  • 2.1 不同来源试验材料对再生的影响
  • 2.2 不同激素配比对岩富10 号、长富2 号叶片再生不定芽的影响
  • 2.3 皇家嘎拉叶片再生不定芽试验统计
  • 2.4 暗培养对苹果离体叶片再生的影响
  • 2.5 试管苗苗龄对苹果离体叶片再生的影响
  • 2.6 共培养对岩富10 号离体叶片再生的影响
  • 2.7 不同浓度AgN03 对皇家嘎拉叶片再生的影响
  • 2.8 再生不定芽生根培养基筛选
  • 3 讨论
  • 3.1 外植体基因型对苹果叶片再生的影响
  • 3.2 不同试验材料对再生的影响
  • 3.3 激素组合对苹果离体叶片再生的影响
  • 3.4 暗培养对苹果叶片再生不定芽的影响
  • 3.5 共培养对苹果叶片再生不定芽的影响
  • 3 对苹果叶片培养影响'>3.6 不同浓度AgNO3对苹果叶片培养影响
  • 4 关于今后研究的一点建议
  • 5 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 图版
  • 个人简介
  • 导师简介
  • 相关论文文献

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