论文摘要
目的：糖尿病（diabetes mellitus,DM）是一种由多因素引起的以慢性高血糖为特征的全身性代谢疾病,同时存在着胰岛素以外的多种内分泌异常。近年流行病学研究发现2型糖尿病患者甲状腺形态及功能异常发生率比正常人群高。终末糖基化产物（AGEs）-终末糖基化产物受体（RAGE）系统与慢性高血糖引起的多种并发症密切相关,但其与DM中甲状腺组织损伤的关系研究较少。氨基胍（aminoguanidine,AG）和胰岛素（insulin,INS）可以通过不同的途径阻断AGEs-RAGE系统的作用。本实验通过观察不同时期DM大鼠未干预组（DM）、DM大鼠AG干预组（DA）、DM大鼠胰岛素干预组（DI）及对照组（N）的甲状腺超微结构改变,检测甲状腺组织中糖毒性相关因子RAGEmRNA,以及甲状腺重要功能相关因子TSHR、NIS、TG、TPOmRNA的表达情况,探讨DM大鼠甲状腺组织结构和功能变化以及AG, INS的干预作用。方法：成年雄性wistar大鼠（210-255g）112只,随机分为两组：N组（25只）和T2DM实验组（87只）。N组给予普通饲料喂养,T2DM实验组给予高脂饲料喂养8周后以30mg/kg链脲佐菌鼠尾静脉注射造模。N组鼠尾静脉注射同等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。72小时后实验组大鼠血糖均大于16.65mmol/L,造模成功。成模后将实验组大鼠随机分为DM组27只,DA组28只,DI组32只。DA组以50mg/kg.d的AG灌胃。DI组以6U/kg.d皮下注射精蛋白锌胰岛素。分别于成模后12周和20周处死各组大鼠,留取甲状腺组织①2.5%戊二醛1%锇酸溶液进行双重固定,以JEM100CXⅡ透射电镜摄片,观察甲状腺组织的超微病理结构。②液氮固定后采用半定量逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测甲状腺组织中RAGE、TSHR、NIS、TG、TPOmRNA的表达。结果：①实验结束时,DM组体重低于DA、DI、N三组（p<0.01）,后三组间无统计学差异。DM、DA、DI三组血糖均高于N组（p<0.01）,DM组和DA组无统计学差异,二者均高于DI组（p<0.01）。②超微结构：DM组大鼠甲状腺组织表现为滤泡上皮细胞损伤。血管内皮细胞损伤,基底膜增厚,炎细胞浸润,纤维增生,损伤程度随病程延长而加重；DA组和DI组甲状腺组织超微结构较DM组有所改善；且DI组治疗效果好于DA组。③RT-PCR检测mRNA相对表达量：RAGE:DM组高于DI组、DA组、N组（p<0.01）；DA组低于DI组（12周p<0.05,20周p<0.01）,与N组无统计学差异；DI组高于N组（p<0.01）。TSHR:12周：DM组高于DA组（p<0.01）、DI组（p<0.01）、N组（p<0.05）；DA组低于DI组（p=0.894）,高于N组（p=0.239）；DI组高于N组（p=0.197）。NIS:DM组低于DA组（12周p<0.01,20周p=0.075）、DI组（12周p<0.01,20周p=0.969）、N组（12及20周p<0.01）；DA组低于DI组（12周及20周p=1.000）、N组（12周p=1.000,20周p=0.002）；DI组低于N组（12周p=1.000,20周p=0.155）。TG:20周：DM组低于DA组、DI组、N组（均p<0.01）；DA组高于DI组（p=0.751）,低于N组（p=0.675）,DI组低于N组（p=0.426）。TPO:DM组低于DA组（12周p<0.01,20周p=0.505）、DI组（p<0.01）、N组（p<0.01）；DA组低于DI组、N组（p<0.01）；DI组低于N组（p<0.01）。结论：①短期高脂饲料喂养配合一次尾静脉注射小剂量STZ可以成功制备T2DM大鼠模型。②DM组甲状腺超微结构损伤,显示功能低下。RAGEmRNA、TSHRmRNA表达增高,NISmRNA、TPOmRNA、TGmRNA表达均有所降低。提示RAGE表达增加可能与甲状腺受损有关。③DA组与DM组比较,甲状腺组织超微结构损伤减轻,甲状腺功能相关因子mRNA表达改善,RAGEmRNA表达减少,提示AG可以减少RAGE表达,减轻糖毒性导致的甲状腺组织损伤。④DI组与DM组比较,血糖明显降低,甲状腺组织超微结构受损减轻,功能相关因子mRNA表达改善,RAGEmRNA表达减少,提示补充胰岛素可以降低血糖,减少RAGE表达和活化,对糖毒性导致的甲状腺损伤具有保护作用。⑤DI组治疗效果较DA组好,而DI组RAGEmRNA表达较DA组高,显示胰岛素可能除存在抑制RAGEmRNA表达机制以外,还存在其他机制对糖尿病大鼠甲状腺产生保护。