HBV S/HEV ORF2融合基因的构建及对番茄的转化

论文摘要

本研究旨在探索HBV S／HEV ORF2融合基因在植物中表达乙肝戊肝双价抗原的可能性，以期为进一步研制植物乙肝戊肝双价口服疫苗打下基础。 应用重组PCR技术将乙肝病毒（HBV）S基因连接在戊肝病毒（HEV）ORF2部分序列的5′端，二者通过柔性肽（Gly4Ser）2序列相连，构建成融合基因BE，测序结果正确。 将融合基因BE克隆到植物双元表达载体pBin438上，获得pBin438BE，然后用冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105中，侵染丽春番茄子叶和下胚轴，经预培养、共培养、筛选培养、生根培养获得了5株抗卡那霉素的番茄植株。提取抗性植株基因组DNA，进行PCR及PCR-Southern检测，4株获得阳性信号。初步表明目的基因已整合到了番茄基因组中。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第一章 前言
• 1.1 转基因植物口服疫苗的研究进展
• 1.2 乙型肝炎病毒疫苗的研究进展
• 1.3 戊型肝炎病毒疫苗的研究进展
• 1.4 本文研究目的和内容
• 第二章 HBV S/ HEV ORF2融合基因的构建
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 第三章 融合基因植物表达载体的构建
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 第四章 番茄的遗传转化及转基因植株的鉴定
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 版图