硝化细菌菌剂生态安全性研究

论文摘要

水产养殖用微生态制剂通过调节养殖水体内的微生态平衡,调整水产养殖生物环境,净化水质,达到提高养殖品种健康水平及改良养殖环境的目的。水产养殖用微生态制剂作为一个新兴产业,经过二十多年的发展,尤其是近几年的快速发展,已初具规模。但目前对水产养殖用微生态制剂的研究大多仅限于应用效果方面,在菌种选择、施用条件、施用方法和施用量、菌种间相互作用、配伍的和谐性、作用机理、对环境的影响形式和影响程度、菌体保活技术、菌体回收和消除技术等方面的研究严重滞后。在具体选用菌种上,如何选择安全、无毒副作用的菌株,更加值得研究。本论文选用发光细菌、藻类、水溞、鱼类一系列由低等到高等的水生生物作为受试生物,同时通过致病菌检测和抗药性试验,研究硝化细菌的生态安全性。经过试验得出以下结论:（1）硝化细菌菌剂对发光细菌在较短时间内抑制率很低,相关作用不明显。当作用时间达30min时,EC20为抑制率为20%时样品的含量浓度占74.6%,说明硝化细菌菌剂对发光细菌的抑制作用不明显。（2）研究硝化细菌菌剂对普通小球藻（Chlorella Vulgaris）和斜生栅藻（Scenedesmus obliquus）整个生命周期内生长的影响,结果表明,硝化细菌菌剂对两种藻类生长不存在抑制作用,反而具有促进作用。当促进率为50%时,普通小球藻的菌剂投加浓度为1053.9mg/L,95%置信区间为[184.1,6039.5] mg/L;斜生栅藻的菌剂投加浓度为124.0mg/L,95%置信区间为[19.1,807.2] mg/L。（3）硝化细菌菌剂对多刺裸腹溞的24hEC50为1.15×1025mg/L、48hEC50为1.00×1022mg/L,远大于规定的100mg/L的低毒标准。且硝化细菌菌剂的对数浓度和多刺裸腹溞24和48h的死亡率线性关系不显著,对溞类无明显毒害作用。（4）对斑马鱼96h的急性毒性试验显示,硝化细菌菌剂各种浓度组都未对斑马鱼产生任何抑制影响。（5）使用大肠杆菌和沙门氏菌显色培养基进行细菌学检测表明,硝化细菌菌剂中不含大肠杆菌和沙门氏菌。（6）研究6种消毒剂和抗生素对硝化细菌活性影响,结果表明,高锰酸钾和硫酸铜对硝化细菌的抑制作用明显,24h和48h对硝化细菌50%抑制率浓度均大于水产养殖中的泼洒浓度。土霉素和磺胺对硝化细菌的抑制作用明显小于消毒剂,其中土霉素的抑制性最小。磺胺对硝化细菌50%的抑制浓度远大于水产养殖中的泼洒浓度。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 课题来源
• 1.2 前言
• 1.3 微生态制剂研究现状
• 1.3.1 微生态制剂的定义及其特征
• 1.3.2 水产养殖中常用的微生态制剂种类
• 1.3.3 硝化细菌
• 1.3.4 其它种类的微生态制剂
• 1.3.5 水产养殖中常用微生态制剂的作用机理
• 1.3.6 水产养殖用微生态制剂存在问题
• 1.4 课题研究目的、意义、内容及参照标准
• 1.4.1 研究的目的和意义
• 1.4.2 研究内容
• 1.4.3 参照标准
• 1.5 论文创新点
• 第2章 硝化细菌菌剂对发光细菌急性毒性试验研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料和仪器
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 试验准备
• 2.3.1.1 发光细菌复苏
• 2.3.1.2 样品制备
• 2.3.2 筛检测量（Scrn）
• 2.3.3 测定EC 值
• 2.4 结果及讨论
• 2.4.1 筛检测量结果
• 2.4.2 EC 测量结果
• 2.5 结论
• 第3章 硝化细菌菌剂对藻类的毒性试验研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料和仪器
• 3.2.1 试验材料
• 3.2.2 试验仪器
• 3.3 试验方法和条件
• 3.3.1 预试验
• 3.3.1.1 贮备培养
• 3.3.1.2 预培养
• 3.3.1.3 最佳波长的确定
• 3.3.1.4 沉降性试验
• 3.3.2 正式试验
• 3.3.2.1 制作标准曲线
• 3.3.2.2 测定生长曲线
• 3.3.2.3 毒性试验
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 预试验
• 3.4.1.1 贮备培养和预培养
• 3.4.1.2 最佳测定波长
• 3.4.1.3 沉降性试验
• 3.4.2 正式试验
• 3.4.2.1 标准曲线
• 3.4.2.2 生长曲线
• 3.4.2.2.1 制作生长曲线
• 3.4.2.2.2 生命周期过程pH 监测
• 3.4.2.3 毒性试验
• 3.5 结论
• 第4章 硝化细菌对多刺裸腹溞急性毒性试验研究
• 4.1 引言
• 4.2 材料和仪器
• 4.2.1 试验材料
• 4.2.2 实验仪器
• 4.3 试验方法和条件
• 4.3.1 培养试验
• 4.3.1.1 营养试验
• 4.3.1.2 生长周期试验
• 4.3.2 急性毒性试验
• 4.3.3 参比试验
• 4.3.4 分析方法
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 培养试验
• 4.4.2 生长周期试验
• 4.4.3 急性毒性试验
• 4.4.4 参比试验
• 4.5 结论
• 第5章 硝化细菌菌剂对斑马鱼的急性毒性试验研究
• 5.1 前言
• 5.2 材料和仪器
• 5.3 试验方法
• 5.3.1 驯养
• 5.3.2 正式实验
• 5.4 试验结果及讨论
• 5.5 结论
• 第6章 硝化细菌菌剂致病菌检测
• 6.1 前言
• 6.2 材料和仪器
• 6.2.1 试验材料
• 6.2.2 试验仪器
• 6.3 试验方法
• 6.3.1 大肠杆菌检测试验方法
• 6.3.2 沙门氏菌检测试验方法
• 6.4 试验结果
• 6.5 结论
• 第7章 硝化细菌菌剂抗药性试验研究
• 7.1 前言
• 7.2 材料和仪器
• 7.2.1 试验材料
• 7.2.2 试验仪器
• 7.3 试验方法
• 7.3.1 试验设计
• 7.3.2 分析方法
• 7.4 试验结果及讨论
• 7.4.1 高锰酸钾对硝化细菌活性的影响
• 7.4.2 硫酸铜对硝化细菌活性的影响
• 7.4.3 戊二醛对硝化细菌活性的影响
• 7.4.4 84 消毒液对硝化细菌活性的影响
• 7.4.5 土霉素对硝化细菌活性的影响
• 7.4.6 磺胺对硝化细菌活性的影响
• 7.4.7 6 种消毒剂和抗生素的比较
• 7.5 结论
• 第8章 结论
• 8.1 主要结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间获得的科研成果
• 致谢