论文摘要
目的评价添加双歧杆菌(bifidobacteria,BF)对肠道内毒素(LPS)诱导引起的炎症反应的保护作用,并研究双歧杆菌的抗炎症反应的具体机制。方法采用鼠替代奶(rat milk substitute,RMS)人工喂养的新生Sprague—Dewlye大鼠,40只生后48小时的新生大鼠按析因设计随机分为4组,每组10只,2组新生大鼠用添加了LPS(1.5mg/kg·day)的RMS人工喂养,其中1组RMS中补充了双歧杆菌(1x 108cfu/day);另2组均用RMS喂养,不添加LPS,其中1组RMS中补充了双歧杆菌(1x 108cfu/day)。每天观察新生SD大鼠的生长情况。进行5天的特殊RMS喂养后,取远端小肠,应用HE染色观察组织学病理变化,另取肺、小肠和肝脏组织,采用蛋白质免疫印迹法半定量检测胞核NF-κBp65表达水平和胞浆HSP70表达水平。结果1.给予LPS处理的2组新生大鼠,出现腹泻、腹胀、活动减少等表现,其中补充双歧杆菌组的新生大鼠这些表现的程度较轻。析因设计的方差分析显示,新生大鼠的体重增长受到LPS干预的影响(P<0.05),LPS处理的2组新生大鼠体重增长明显比未予LPS处理的新生大鼠慢,但补充双歧杆菌对体重增长的影响没有统计学意义(P>0.05),LPS干预与补充双歧杆菌之间没有交互作用。2.远端小肠的组织学变化显示LPS破坏了小肠黏膜结构;添加双歧杆菌的LPS处理组新生大鼠小肠黏膜损伤程度较轻。3.析因分析显示,在小肠、肝脏和肺组织中,胞核NF-κBp65表达水平受到LPS干预和双歧杆菌两个因素的影响(P均<0.05),LPS干预和双歧杆菌干预之间存在交互作用(P<0.05);提示LPS干预提高NF-κBp65活性,而补充双歧杆菌能降低LPS诱导的NF-κBp65活性,从而下调炎症级联反应。4.析因分析显示,在小肠、肝脏和肺组织中,胞浆HSP70表达水平受到LPS干预和双歧杆菌两个因素的影响(P均<0.05),LPS干预和双歧杆菌干预之间存在交互作用(P<0.05);提示LPS干预提高HSP70表达水平,而补充双歧杆菌能进一步提高HSP70表达水平,起保护作用。结论通过胃肠道途径补充双歧杆菌能减轻由LPS诱导引起的炎症对机体的损害,具有抗炎症作用。双歧杆菌的抗炎症作用与降低炎症状态下各脏器(小肠、肝脏、肺)组织胞核NF-κB活性,同时提高各脏器组织胞浆HSP表达水平有关。
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