α辅肌动蛋白4在背部变皱膜中的功能研究

论文摘要

背部变皱膜又称环形变皱膜（Circular ruffling）,是富含F-肌动蛋白的环状质膜隆起物；是细胞在受到一系列生长因子包括表皮（PDGF）、血管内皮生长因子（VEGF）等的刺激下,从细胞顶端伸展出来的的一种结构。背部变皱膜在巨胞饮和细胞迁移等生理现象中有着重要的生理学功能。α-辅肌动蛋白4（α-actinin 4,ACTN4）在运动细胞变皱膜中有较高的表达。EGF诱导的信号通路,可引起α-ACTN4酪氨酸磷酸化,降低其与肌动蛋白的结合能力,使细胞骨架解体,从而有利于细胞迁移及胞质分裂。我们的前期研究表明α-ACTN4、肿瘤转移抑制蛋白（Metastasis suppressor 1,Mtss1 ）与Wiskott-Aldrich综合症蛋白家族成员2（Wiskott-Aldrich Syndrome protein family member 2, WASF2）可能共存于变皱膜蛋白分子复合物中。本论文主要采用pull down和免疫共沉淀技术分别对α-ACTN4与Mtss1和WASF2三者之间的相互作用进行探索。结果显示α-ACTN4可与Mtss1-GFP免疫共沉淀,暗示两者之间有相互作用,但这种相互作用不依赖于PDGF的刺激。而pull down试验显示α-ACTN4不能pull down Mtss1,反之亦然。表明二者之间的相互作用不是直接的,可能还有其他蛋白质参与二者之间的相互作用。而WASF2复合物是变皱膜的关键组分。我们对Mtss1与WASF2二者之间是否存在相互作用进行研究,初步的免疫沉淀结果表明二者之间存在相互作用,但仍有待我们进一步的进行研究。最后,前期的数据显示特定的F-肌动蛋白结合蛋白能调节小脑发育过程。因而我们对其中一些蛋白如Mtss1, Hug1-1, drebrin和coronin在出生后SD大鼠小脑发育中的表达模式进行了研究。结果表明这四种蛋白在出生后都有一个表达峰,推测可能与小脑发育存在着某种联系。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩写表（中英文对照）
• 第一章 前言
• 1.1 细胞运动
• 1.2 板状伪足/变皱膜的构造
• 1.3 背部变皱膜
• 1.4 α-辅肌动蛋白4
• 1.5 本文的研究背景与思路
• 第二章 包含ACTN4的变皱膜复合物中蛋白质相互作用研究
• 2.1 材料、试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 试验结果与讨论
• 2.4 讨论
• 第三章 大鼠小脑出生后发育不同时期中Hugl-1、Mtss1、Drebrin与Coronin的表达水平研究
• 3.1 材料与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果及讨论
• 参考文献
• 附录
• 致谢